Serum ammonium (n=30), was sampled

Serum ammonium (n=30), was sampled at all stages, but for posttransportation
was restricted to treatments with lids (i.e., ice & lid or lid
only, for both depurated and non-depurated fractions only). Each individual
sampled was considered a replicate. Haemolymph was removed
fromthe adductor muscle using a 21 gauge needle and syringe, and immediately
placed on ice. Samples were centrifuged (10,000 xg; 5 min)
on a portable microcentrifuge (Galaxy, VWR International LLC, USA)
with 100 μL aliquots frozen until further use. The ammonium assay
was performed with modifications on the Indophenol method after
Bolz and Howel (1978) with modifications for a 96 well plate. Serum
was defrosted and deproteinised with an equal amount of 5% TCA.
After further centrifugation, 100 μL of supernatant was diluted 5–20
fold in 3% sodiumchloride solution. To 100 μl diluted serumin triplicate,
50 μL of reagent 1 (phenol 1 g; sodium nitroprusside 5 mg; 50 mL
ddH2O) was added and shaken for 30 s; 50 μL of reagent 2 (sodium hydroxide
0.5 g; sodium hypochlorite 1 mL; 50 ml ddH2O) were then
added and the plate was incubated at 37 °C for 30 min. Optical density
was determined at 635 nm spectrophotometer (Sunrise, Tecan Group
Ltd, Switzerland). Ammonium content of the serum samples were then
calibrated against a standard curve of ammonium chloride (0–1 μg/mL).
For survival and mortality, individual mussels were extracted or
removed from bags after grading, depuration and transport (n= 100)
and 24 h after re-watering (n = 300) and checked for gaping and
death (defined as lack of adductor muscle contraction when tapped,
or shells broken due to physical trauma). Even though mussels with
broken shells are not dead, they are discarded because according to
the quality criteria used by the industry, these mussels are therefore
worthless. Each individual sampledwas considered a replicate. Changes
in biomass (difference in mass, post-transport or post-rewatering)were
calculated as a batch weight (n = 4–8 bags of mussels) weighed on a
bench scale (Ohaus Europe GmbH, Switzerland).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เซรั่มแอมโมเนีย (n = 30), เป็นตัวอย่าง ในขั้นตอนทั้งหมด แต่ สำหรับ posttransportationถูกจำกัดให้มีฝา (เช่น น้ำแข็ง และฝา หรือฝาเท่านั้น สำหรับ depurated และ depurated ไม่ใช่เศษส่วนเท่านั้น) แต่ละคนตัวอย่างถือเป็นการจำลองแบบ Haemolymph ถูกเอาออกจาก adductor ที่ กล้ามเนื้อใช้ 21 การวัดเข็มและเข็มฉีดยา และทันทีวางบนน้ำแข็ง ตัวอย่างที่ centrifuged (xg 10000; 5 นาที)ใน microcentrifuge แบบพกพา (สหรัฐอเมริกากาแล็กซี่ VWR International LLC )มี aliquots μL 100 แช่แข็งจนกระทั่งใช้ต่อไป การวิเคราะห์แอมโมเนียทำพร้อมกับวิธี Indophenol หลังจากการปรับเปลี่ยนBolz และ Howel (1978) มีการปรับเปลี่ยนสำหรับจานดี 96 เซรั่มdefrosted และ deproteinised กับจำนวนเท่าของ 5% TCAหลังจากเพิ่มเติม centrifugation, μL 100 ของ supernatant ถูกแตกออก 5 – 20พับในโซลูชัน sodiumchloride 3% การ 100 μl ผสม triplicate, seruminΜL 50 ของรีเอเจนต์ 1 (วาง 1 g; nitroprusside โซเดียม 5 มิลลิกรัม 50 mLเพิ่ม ddH2O) และเขย่าสำหรับ 30 s ΜL 50 ของรีเอเจนต์ 2 (โซเดียมไฮดรอกไซด์0.5 g ฟอกขาว 1 mL 50 ml ddH2O) ถูกแล้วเพิ่ม และจานถูก incubated ที่ 37 ° C สำหรับ 30 นาทีแสงความหนาแน่นกำหนดที่ 635 nm เครื่องทดสอบกรดด่าง (พระอาทิตย์ขึ้น Tecan กลุ่มจำกัด สวิตเซอร์แลนด์) มีแอมโมเนียเนื้อหาตัวอย่างซีรั่มแล้วปรับเทียบกับเส้นโค้งมาตรฐานของแอมโมเนียคลอไรด์ (0-1 μg/mL)สำหรับการอยู่รอดและการตาย ภู่ละถูกสกัด หรือเอาออกจากถุงหลังจากการจัดเกรด depuration และขนส่ง (n = 100)และ 24 ชมหลังจากรดน้ำอีกครั้ง (n = 300) และการตรวจสอบสำหรับ gaping และตาย (กำหนดเป็นขาด adductor กล้ามเนื้อหดตัวเมื่อเคาะหรือเปลือกหอยที่เสียเนื่องจากการบาดเจ็บทางกายภาพ) แม้ภู่มีเปลือกหอยแตกไม่ตาย พวกเขาจะถูกละทิ้งเนื่องจากตามเกณฑ์คุณภาพที่ใช้ โดยอุตสาหกรรม ภู่เหล่านี้ดังสามหาว Sampledwas แต่ละแต่ละถือว่าเป็นจำลอง การเปลี่ยนแปลงในชีวมวล (ส่วนต่างในมวล หลังขนส่ง หรือไปรษณีย์ rewatering) ได้คำนวณเป็นน้ำหนักชุด (n = 4 – 8 ถุงภู่) ชั่งน้ำหนักในการขนาดม้านั่ง (Ohaus ยุโรป GmbH สวิตเซอร์แลนด์)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

แอมโมเนียมเซรั่ม (n = 30) เป็นตัวอย่างในทุกขั้นตอน แต่สำหรับ posttransportation
ถูก จำกัด ให้การรักษาที่มีฝาปิด
(เช่นน้ำแข็งและฝาหรือฝาเดียวสำหรับทั้งdepurated และไม่ depurated เศษส่วนเท่านั้น) แต่ละตัวอย่างได้รับการพิจารณาซ้ำ
เลือดจะถูกลบออก
fromthe adductor กล้ามเนื้อโดยใช้เข็มวัด 21
และเข็มฉีดยาและทันทีที่วางอยู่บนน้ำแข็ง ตัวอย่างหมุนเหวี่ยง (10,000 XG 5 นาที)
ในไมโครแบบพกพา (กาแล็กซี่, VWR International LLC สหรัฐอเมริกา)
100 ไมโครลิตร aliquots แช่แข็งจนใช้งานต่อไป การทดสอบแอมโมเนียมได้ดำเนินการมีการปรับเปลี่ยนโดยวิธี Indophenol หลังจาก Bolz และ Howel (1978) มีการปรับเปลี่ยนเป็น 96 แผ่นเดียว เซรั่มที่ถูกละลายโปรตีนต่ำและมีจำนวนที่เท่ากันของ TCA 5%. หลังจากการหมุนเหวี่ยงต่อ 100 ไมโครลิตรของสารละลายเจือจาง 5-20 เท่าใน 3% วิธีการแก้ปัญหา sodiumchloride 100 ไมโครลิตรปรับลดเพิ่มขึ้นสามเท่า serumin, 50 ไมโครลิตรของสาร 1 (ฟีนอล 1 กรัมโซเดียม nitroprusside 5 มิลลิกรัม; 50 มลddH2O) ถูกบันทึกและเขย่าเป็นเวลา 30 วินาที 50 ไมโครลิตร 2 สาร (โซดาไฟ0.5 กรัมโซเดียมไฮโปคลอไรต์ 1 มิลลิลิตร 50 มล. ddH2O) จากนั้นก็เพิ่มและแผ่นได้รับการบ่มที่อุณหภูมิ37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 นาที ความหนาแน่นของออปติคอลได้กำหนดที่ 635 นาโนเมตร spectrophotometer (Sunrise, Tecan กรุ๊ป จำกัด วิตเซอร์แลนด์) เนื้อหาแอมโมเนียมของกลุ่มตัวอย่างซีรั่มจากนั้นก็สอบเทียบกับกราฟมาตรฐานของแอมโมเนียมคลอไร (0-1 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร). สำหรับการอยู่รอดและการตายของหอยแต่ละถูกสกัดหรือลบออกจากกระเป๋าหลังจากการจัดลำดับ depuration และการขนส่ง (n = 100) และ 24 ชั่วโมงอีกครั้งหลังจากรดน้ำ (n = 300) และการตรวจสอบที่อ้าปากค้างและการตาย(หมายถึงการขาดกล้ามเนื้อหด adductor เมื่อเคาะหรือเปลือกหักเนื่องจากการบาดเจ็บทางกายภาพ) แม้ว่าหอยกับเปลือกหอยที่ขาดไม่ได้ตายที่พวกเขาจะถูกยกเลิกเพราะตามเกณฑ์คุณภาพที่ใช้โดยอุตสาหกรรมหอยเหล่านี้จึงไร้ค่า แต่ละ sampledwas แต่ละถือว่าทำซ้ำ การเปลี่ยนแปลงในชีวมวล (ความแตกต่างในมวลการโพสต์การขนส่งหรือการโพสต์ rewatering) ถูกนำมาคำนวณเป็นน้ำหนักชุด(n = 4-8 ถุงหอย) ชั่งน้ำหนักในระดับม้านั่ง(Ohaus ยุโรป GmbH, วิตเซอร์แลนด์)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เซรั่มแอม
( n = 30 ) ตัวอย่างในทุกขั้นตอน แต่สำหรับ posttransportation
ถูก จำกัด การรักษามีฝาปิด ( เช่น ฝา&น้ำแข็งหรือฝา
เท่านั้น ทั้ง depurated และไม่ depurated เศษส่วนเท่านั้น ) แต่ละคน
ตัวอย่างเป็นการสืบพันธุ์ น้ำเลือดออก
จากโมเสสใช้ 21 วัดเข็มและกระบอกฉีดและทันที
วางไว้บนน้ำแข็ง จำนวนระดับ ( 10000 XG ; 5 นาที )
บนไมโครเซนตริฟิวจ์แบบพกพา ( Galaxy , บริษัท Imcopa International LLC , USA )
100 μผมเฉยๆแช่แข็งจนกว่าจะใช้ต่อไป แอมโมเนียวิเคราะห์
แสดงกับการปรับเปลี่ยนในวิธีการและ indophenol หลังจาก
โบลส์ howel ( 1978 ) มีการปรับเปลี่ยนสำหรับ 96 ครับจาน เซรั่ม
ถูกละลายด้วยคุณสมบัติและจํานวนเท่า 5% TCA .
หลังจากปั่นต่อ100 μ l สูงเจือจาง 5 พับ 20
) ในสารละลายโซเดียมคลอไรด์ 3% 100 μเจือจาง serumin ทำสำเนาสามฉบับ L , l
50 μรีเอเจนต์ 1 ( ฟีนอล 1 g ; โซเดียมไนโตรปรัสไซด์ 5 มิลลิกรัม ; 50 ml
ddh2o ) คือการเพิ่มและเขย่าเป็นเวลา 30 s ; 50 μ L ของรีเอเจนต์ 2 ( โซดาไฟ
0.5 g ; โซเดียมไฮโปคลอไรด์ 1 มิลลิลิตร ; ddh2o 50 มิลลิลิตรจากนั้น
เพิ่ม และจานถูกบ่มที่ 37 ° C เป็นเวลา 30 นาที ซิกแซ็ก
ตั้งใจที่ 635 nm Spectrophotometer ( พระอาทิตย์ขึ้น TECAN จำกัดกลุ่ม
, สวิตเซอร์แลนด์ ) ส่วนเนื้อหาของเซรั่มจำนวนแล้ว
เทียบกับกราฟมาตรฐานของแอมโมเนียมคลอไรด์ ( 0 – 1 μ g / ml ) .
เพื่อความอยู่รอดและอัตราการตาย หอยแต่ละตัวแยกหรือเอาออกจากกระเป๋าหลัง
การ depuration และการขนส่ง ( n = 100 )
24 ชั่วโมงหลังจากแวะรดน้ำ ( n = 300 ) และการตรวจสอบที่อ้าปากค้างและ
ความตาย ( เช่นขาด adductor กล้ามเนื้อหดตัว เมื่อเลือก
หรือเปลือกแตก เนื่องจากร่างกายบาดเจ็บ ) แม้ว่าหอยกับ
หอยแตกจะตายไม่ได้ จะทิ้ง เพราะตาม
คุณภาพเกณฑ์ที่ใช้โดยอุตสาหกรรม หอยเหล่านี้จึง
ไร้ค่า แต่ละคน sampledwas ถือว่าจําลองการเปลี่ยนแปลง
ในมวลชีวภาพ ( ความแตกต่างในมวล ไปรษณีย์ ขนส่ง หรือไปรษณีย์ ถั่วเหลืองพันธุ์ )
คำนวณเป็นชุดน้ำหนัก ( n = 4 – 8 ถุงหอย ) หนักบน
ชั่ง ม้านั่ง ( ohaus ยุโรป GmbH , สวิตเซอร์แลนด์ )