Fixed bacterial cells were used in

Fixed bacterial cells were used in DPCR analysis.
Immediately before DPCR analysis, the cell pellets were
thawed, resuspended in 50 ll and decimally diluted in
double distilled water. Each dilution was used as a template
for PCR. For quantitative analysis, 50 ll of a cell suspension
containing 107 cells was serially diluted to extinction in five
replicate series. A negative control with no template was
included in each dilution series. The final volume of each
PCR was 100 ll. We have previously described the calculation
of most probable number-DPCR (MPN-DPCR)
(Fode-Vaughan et al. 2001). The sensitivity of DPCR with
each primer pair was evaluated by comparing the number of
cells added to the DPCR reactions determined by direct
count and the cell number estimated by MPN-DPCR.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เซลล์แบคทีเรียคงถูกนำมาใช้ในการวิเคราะห์ DPCR.
ทันทีก่อนที่จะวิเคราะห์ DPCR, เกล็ดเซลล์ที่ถูกละลาย
, resuspended ใน 50? จะเจือจางและ decimally
ในน้ำกลั่นคู่ แต่ละเจือจางถูกนำมาใช้เป็นแม่แบบในการ pcr
สำหรับการวิเคราะห์เชิงปริมาณ 50? จะของเซลล์แขวนลอย
มี 107 เซลล์ถูกเจือจางแบบขนานกับการสูญเสียในห้า
ทำซ้ำชุดการควบคุมเชิงลบที่ไม่มีแม่เป็น
รวมอยู่ในแต่ละชุดการเจือจาง เล่มสุดท้ายของแต่ละ
pcr 100? จะ เราได้อธิบายไว้ก่อนหน้าการคำนวณ
ส่วนใหญ่น่าจะเป็นจำนวน DPCR (MPN-DPCR)
(fode-วอห์นและคณะ. 2001) ความไวของ DPCR ด้วย
แต่ละคู่ไพรเมอร์ได้รับการประเมินโดยการเปรียบเทียบจำนวนของเซลล์
เพิ่มปฏิกิริยา DPCR กำหนดโดยโดยตรง
และนับจำนวนเซลล์ประมาณโดย MPN-DPCR

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ใช้เซลล์แบคทีเรียถาวรใน DPCR วิเคราะห์
ก่อนการวิเคราะห์ DPCR ขี้เซลล์ถูก
thawed, resuspended ใน 50 จะ และแตกออกใน decimally
คู่กลั่นน้ำ เจือจางแต่ละถูกใช้เป็นแม่แบบ
สำหรับ PCR สำหรับการวิเคราะห์เชิงปริมาณ 50 จะระงับเซลล์
serially ถูกผสมเซลล์ 107 การสูญพันธุ์ในห้า
จำลองชุด ตัวควบคุมลบแม่แบบไม่ถูก
รวมในแต่ละชุดเจือจาง ปริมาตรสุดท้ายของแต่ละ
PCR 100 จะ เราได้อธิบายไว้ก่อนหน้านี้การคำนวณ
ของน่าเป็นมากที่สุดจำนวน-DPCR (บริษัทเอ็มพีเอ็น-DPCR)
(วอน Fode et al. 2001) ความไวของ DPCR ด้วย
แต่ละคู่พื้นถูกประเมิน โดยการเปรียบเทียบจำนวน
เซลล์เพิ่มปฏิกิริยา DPCR ตามตรง
ตรวจนับและจำนวนเซลล์ประมาณ โดย DPCR บริษัทเอ็มพีเอ็น

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เซลล์เกิดจากเชื้อแบคทีเรียที่กำหนดจะถูกใช้ในการวิเคราะห์ dpcr .
ทันทีก่อนการวิเคราะห์ dpcr กระสุนลูกปรายเซลล์ที่มี
ละลาย resuspended ใน 50 ll และ decimally
ซึ่งจะช่วยเจือจางในน้ำกลั่นคู่ แต่ละเจือจางได้เคยถูกใช้เป็นเทมเพลต
สำหรับ pcr. สำหรับการวิเคราะห์เชิงปริมาณ 50 ll ของเซลล์ระบบกันสะเทือน
ประกอบด้วย 107 เซลล์ก็เจือจางไปการสูญพันธุ์ใน Series ห้า
ลอกเลียนแบบอนุกรมการควบคุมค่าติดลบที่ไม่มีเทมเพลตเป็น
รวมอยู่ในชุดแต่ละเจือจาง ระดับเสียงครั้งสุดท้ายของ
pcr แต่ละสรรพ 100 เราได้อธิบายถึงการคำนวณ
มากที่สุดน่าจะเป็นหมายเลข - dpcr ( mpn - dpcr )
( fode-vaughan et al .ก่อนหน้านี้ 2001 ) ความไวของ dpcr พร้อมด้วย
คู่เชื้อปะทุแต่ละห้องได้รับการประเมินจากการเปรียบเทียบจำนวนของเซลล์เพิ่ม
ซึ่งจะช่วยให้เกิดปฏิกิริยา dpcr ที่ถูกกำหนดโดยตรง
นับจำนวนเซลล์และการประเมินโดย mpn - dpcr.