Monitoring of immunological respons

Monitoring of immunological response
The humoral immune response to rHaa86 antigen was
monitored by indirect ELISA. The ELISA was optimized
and antigen was applied to the microtiter plate in a concentration
of 6 lg/ml. The collected sera were diluted into
1:500 and were used in triplicate wells. Sheep anti-bovine
IgG, IgG1 and IgG2:HRPO conjugate (AbD serotec, UK)
were used at a dilution of 1:10,000 as secondary antibody.
The peroxidase mediated colour development was performed
at room temperature with o-phenylene diamine
dihydrochloride (OPD) (Pierce, USA) in citrate buffer, pH
5.0. The reaction was stopped with 50 ll of 3 N HCl per
well, and absorbance was recorded by microplate ELISA
reader (Tecan-Sunrise, Austria), as the mean OD492 of
triplicate samples.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ตรวจสอบการตอบสนองภูมิคุ้มกันมีการตอบสนองภูมิคุ้มกัน humoral เพื่อตรวจหา rHaa86ตรวจสอบ ELISA ทางอ้อม ELISA ถูกปรับให้เหมาะสมตรวจหาถูกนำมาใช้กับจาน microtiter ในเข้มข้นของ lg 6/ml จะรวบรวมถูกทำให้เจือจางลง1: 500 และใช้ในบ่อ triplicate แกะต่อต้าน bovineIgG, IgG1 และ IgG2:HRPO สังยุค (AbD serotec สหราชอาณาจักร)ถูกใช้ในการเจือจางของ 1:10,000 เป็นแอนติบอดีรองมีดำเนินการพัฒนาสี peroxidase mediatedที่อุณหภูมิห้องมี o phenylene diaminedihydrochloride (ผู้ป่วยนอก) (เพียร์ซ สหรัฐอเมริกา) ในซิเตรตบัฟเฟอร์ pH5.0 หยุดปฏิกิริยา.กับ 50 จะ 3 N HCl ต่อดี และ absorbance ถูกบันทึก โดย microplate ELISAอ่าน (Tecan ซันไรส์ ออสเตรีย), เป็น OD492 หมายถึงของตัวอย่าง triplicate

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การตรวจสอบของการตอบสนองภูมิคุ้มกัน
ตอบสนองของภูมิคุ้มกันของร่างกายที่จะแอนติเจน rHaa86 ถูก
ตรวจสอบโดยวิธี ELISA ทางอ้อม วิธี ELISA ถูกปรับให้เหมาะสม
และแอนติเจนถูกนำไปใช้แผ่นไมโครความเข้มข้น
ของแอลจีที่ 6 / ml ซีรั่มที่ได้มาปรับลดลงใน
1: 500 และถูกนำมาใช้ในบ่อเพิ่มขึ้นสามเท่า แกะต่อต้านวัว
IgG, IgG1 และ IgG2: HRPO คอนจูเกต (ABD serotec สหราชอาณาจักร)
ถูกนำมาใช้ในการลดสัดส่วน 1:. 10,000 เป็นแอนติบอดีที่สอง
การพัฒนาสีพึ่ง peroxidase ได้ดำเนินการ
ที่อุณหภูมิห้องที่มี diamine o-phenylene
dihydrochloride (OPD) (เพียร์ซ, สหรัฐอเมริกา) ในบัฟเฟอร์ซิเตรต, พีเอช
5.0 ปฏิกิริยาก็หยุด 50 ของ LL 3 N HCl ต่อ
กันและการดูดกลืนแสงที่บันทึกโดยวิธี ELISA microplate
อ่าน (Tecan-Sunrise, ออสเตรีย) ในขณะที่ค่าเฉลี่ยของ OD492
ตัวอย่างเพิ่มขึ้นสามเท่า

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การตรวจสอบของการตอบสนองทางภูมิคุ้มกัน
humoral ภูมิคุ้มกันเพื่อ rhaa86 แอนติเจนคือ
ตรวจสอบโดยวิธี indirect ELISA การ ) และปรับ
แอนติเจนใช้จานหลุมในความเข้มข้น
6 LG / มล. เก็บซีรั่มลดเป็น 1 : 500
และถูกใช้ในบ่อทำสำเนาสามฉบับ . แกะต่อต้าน bovine
และ IgG ( igg2 : hrpo สังยุค ( อับดุล serotec , UK )
ใช้ที่เจือจาง 1 : 10000 เป็นระดับแอนติบอดี มีการพัฒนาสีสัน
( )
อุณหภูมิห้องกับ o-phenylene ไดอะ
: ( ไทย ) ( เพียร์ซ สหรัฐอเมริกา ) ในซิเตรตบัฟเฟอร์ pH
5.0 . ปฏิกิริยาที่ถูกหยุดด้วย 50 จะ 3 N HCl /
ดีและค่าถูกบันทึกไว้โดยพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทย (
อ่าน ( TECAN พระอาทิตย์ขึ้น , ออสเตรีย ) เป็นค่าเฉลี่ยของ od492
ตัวอย่างทำสำเนาสามฉบับ .