Many of the extreme halophiles whic

Many of the extreme halophiles which belong to the archaebacteria produce extracellular proteases. The extracellular serine protease (designated ESP4) of Halobacterium sp. strain TuA4 was isolated in a pure state with a fast protein liquid chromatographic (FPLC) system. Because the enzyme is only stable at high ionic strength, it was necessary to develop a procedure that would allow a minimum Na+ ion concentration of 0.3 M in each step. This is the first halophilic salt-dependent enzyme purified with FPLC. Two precipitation steps with PEG 6000 and acetone in combination with ion-exchange chromatography (CM-Sephadex, Mono Q HR 55) and hydrophobic interaction chromatography (phenyl-Superose HR 55) permitted the isolation of 216-fold purified ESP4 with a total recovery of 3%. The purified ESP4 was shown to possess a molecular weight of 60 000 dalton in sodium dodecyl sulphate—polyacrylamide gel electrophoresis, which correlates very well with the native molecular weight determined for this enzyme

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

มาย halophiles มากซึ่งอยู่ใน archaebacteria ผลิต extracellular proteases รติเอสแถ extracellular (กำหนด ESP4) ของต้องใช้ sp. Halobacterium TuA4 แยกต่างหากในสถานะบริสุทธิ์ด้วยโปรตีนอย่างรวดเร็วของเหลว chromatographic (FPLC) ระบบ เนื่องจากเอนไซม์นี้จะมีเสถียรภาพที่แข็ง ionic สูง จำเป็นต้องพัฒนาวิธีที่จะช่วยให้ความเข้มข้นไอออน Na ต่ำสุด 0.3 เมตรในแต่ละขั้นตอน ได้ แรกชอบเกลือเกลือขึ้นอยู่กับเอนไซม์บริสุทธิ์ที่ มี FPLC อยู่ ฝนขั้นตอนที่สอง 6000 ตรึงและอะซีโตนในร่วมกับการแลกเปลี่ยนไอออน chromatography (CM Sephadex พิมพ์ Q HR 55) และโต้ตอบ hydrophobic chromatography (phenyl Superose HR 55) สามารถแยกบริสุทธิ์ ESP4 216-fold กู้คืนรวม 3% ESP4 บริสุทธิ์ที่แสดงให้มีน้ำหนักโมเลกุลของดาลตัน 60 000 ในโซเดียมซัลเฟต dodecyl — เจ polyacrylamide electrophoresis ซึ่งคู่กับน้ำหนักโมเลกุลภาษาที่กำหนดสำหรับเอนไซม์นี้ดีมาก

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

จำนวนมากของ halophiles Extreme ซึ่งเป็นของ archaebacteria ที่ผลิต proteases extracellular extracellular serine protease (ที่ได้รับมอบหมาย ESP 4 )การดึงสี halobacterium Tua 4 แยกในรัฐบริสุทธิ์พร้อมด้วยระบบได้อย่างรวดเร็วโปรตีนของเหลว chromatographic ( fplc ) เนื่องจากเอนไซม์ที่มีความมั่นคงเท่านั้นที่ความแรงของพลังไอออนสูงมันมีความจำเป็นที่จะต้องพัฒนากระบวนการที่จะอนุญาตให้ต่ำสุดที่นาสมาธิไอออนของ 0.3 เมตรในแต่ละขั้นตอน โรงแรมแห่งนี้คือเอนไซม์เกลือ - ขึ้นอยู่กับ halophilic ครั้งแรกที่บริสุทธิ์ด้วย fplc. สองขั้นตอนตกตะกอนพร้อมด้วยวิสกี้ 6000 อะซีโตนและในการใช้งานร่วมกับไอออน - แลกเปลี่ยน chromatography (ซม. - sephadexเสียงโมโน, Q HR 55 )และการถูกขับ chromatography ( phenyl - superose HR 55 )ได้รับอนุญาตให้มีการขจัดของ 216 - พับบริสุทธิ์ ESP 4 พร้อมด้วยการกู้คืนข้อมูลรวมที่ 3% กรอง ESP 4 ที่เป็นที่แสดงให้มีน้ำหนักระดับโมเลกุลของ 60000 FORTY DALTON ใน electrophoresis เจลโซเดียม dodecyl จุนสี - polyacrylamide ซึ่งเชื่อมโยงไว้สำหรับเอนไซม์แห่งนี้ได้อย่างดีเยี่ยมด้วยน้ำหนักโมเลกุลพื้นเมืองที่