Bacterial strains and inoculum preparation. A. citrulli strain
AAC00-1 was used in this study and was routinely grown on
King’s medium B (19) or nutrient agar (Becton-Dickinson, Sparks,
MD) for 48 h at 28°C. To prepare inoculum, nutrient broth was
inoculated with a single colony of AAC00-1 from a 48 h agar
culture and incubated overnight at 30°C on a rotary shaker
(Innova; New Brunswick Scientific Co., Edison, NJ) at 250 rpm.
The culture was centrifuged at 6,000 × g (Allegra 25R, Beckman
Coulter, Fullerton, CA) for 5 min and the supernatant was
decanted. The pellet was resuspended in 0.1 M phosphate
buffer saline solution (PBS) and the bacterial concentration was
adjusted to an optical density of 0.3 at 600 nm (≈1 × 108 CFU/ml)
spectrophometrically (Spectronic 20; Bausch and Lomb, Rochester,
NY) and diluted to a final concentration of ≈1 × 106 CFU/ml
in PBS.
Bacterial strains and inoculum preparation. A. citrulli strainAAC00-1 was used in this study and was routinely grown onKing’s medium B (19) or nutrient agar (Becton-Dickinson, Sparks,MD) for 48 h at 28°C. To prepare inoculum, nutrient broth wasinoculated with a single colony of AAC00-1 from a 48 h agarculture and incubated overnight at 30°C on a rotary shaker(Innova; New Brunswick Scientific Co., Edison, NJ) at 250 rpm.The culture was centrifuged at 6,000 × g (Allegra 25R, BeckmanCoulter, Fullerton, CA) for 5 min and the supernatant wasdecanted. The pellet was resuspended in 0.1 M phosphatebuffer saline solution (PBS) and the bacterial concentration wasadjusted to an optical density of 0.3 at 600 nm (≈1 × 108 CFU/ml)spectrophometrically (Spectronic 20; Bausch and Lomb, Rochester,NY) and diluted to a final concentration of ≈1 × 106 CFU/mlin PBS.
การแปล กรุณารอสักครู่..
สายพันธุ์แบคทีเรียและการเตรียมหัวเชื้อ สายพันธุ์เอ citrulli
AAC00-1 ถูกใช้ในการศึกษาครั้งนี้และได้เติบโตขึ้นเป็นประจำใน
B กลางของกษัตริย์ (19) หรืออาหารเลี้ยงเชื้อ (Becton-ดิกคินสันปาร์กส์,
MD) เป็นเวลา 48 ชั่วโมงวันที่ 28 ° C เพื่อเตรียมความพร้อมหัวเชื้อน้ำซุปสารอาหารที่ได้รับเชื้อด้วยอาณานิคมเดียวของ AAC00-1 จากอาหารเลี้ยงเชื้อเอช 48 วัฒนธรรมและบ่มค้างคืนที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสบนเครื่องปั่นหมุน(Innova; New Brunswick Scientific Co. , เอดิสัน, นิวเจอร์ซีย์) ที่ 250 รอบต่อนาทีวัฒนธรรมที่ได้รับการหมุนเหวี่ยงที่ 6,000 × g (Allegra 25R, เบคค์โคลเตอร์ฟุลเลอร์, CA) เป็นเวลา 5 นาทีและใสถูกdecanted เม็ดถูก resuspended ใน 0.1 M ฟอสเฟตน้ำเกลือบัฟเฟอร์ (พีบีเอส) และความเข้มข้นของเชื้อแบคทีเรียที่ถูกปรับให้มีความหนาแน่นออปติคอล0.3 ที่ 600 นาโนเมตร (108 ×≈1 CFU / ml) spectrophometrically (SPECTRONIC 20; Bausch Lomb และโรเชสเตอร์, นิวยอร์ก ) และเจือจางความเข้มข้นสุดท้ายของ≈1× 106 CFU / ml ในพีบีเอส
การแปล กรุณารอสักครู่..