COX activity was determined photome

COX activity was determined photometrically in lysated sperm cells, essentially as in Miró et al., 1998, following Cytochrome C oxidation. Briefly, by using a JASCO V-560 and V-520 dual-beam dual-wavelength system, the oxidation of externally added reduced Cytochrome C was measured as an absorbance decrease at 550 (absorbance peak of Cytochrome C reduced form) minus 540 (isosbestic point) nm. To measure total COX activity, spermatozoa (1 mg protein) were completely lysated before addition to reaction medium consisting of 1 mL of Tris–HCl 50 mM pH 7.2. The reaction was started by the addition of saturating concentration of reduced cytochrome C (usually 100 μM) and for each sample we checked that cyanide completely inhibited the reaction to rule out any other mechanism for COX oxidation. The COX activity was obtained as tangent at the initial part of experimental curve. COX activities of irradiated samples are expressed as percentage of control sample COX activity.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

กิจกรรมค็อกซ์พิจารณา photometrically ใน lysated เซลล์สเปิร์ม เป็นหลักเช่นใน Miró et al. 2541 ออกซิเดชัน Cytochrome C สั้น ๆ โดยใช้ 560 JASCO V และ V-520 สองลำแสงความยาวคลื่นสองระบบ ออกซิเดชันของภายนอกเพิ่มลด Cytochrome C ถูกวัดเป็นการลดค่าที่ 550 (ค่าสูงสุดของฟอร์ม Cytochrome C ลดลง) ลบด้วย 540 nm (isosbestic จุด) วัดรวมกิจกรรมค็อกซ์ ตัวอสุจิ (1 มก.โปรตีน) ได้อย่างสมบูรณ์ lysated ก่อนจากปฏิกิริยาสื่อประกอบด้วย 1 มล.ของทริสเรทติ้ง – HCl 50 มม. pH 7.2 ปฏิกิริยาเริ่มต้น โดยการเพิ่มความเข้มข้นลด cytochrome C (ปกติ 100 μ m) และแต่ละอย่างที่เราตรวจสอบว่า ไซยาไนด์ยับยั้งปฏิกิริยาการแยกแยะจากกลไกอื่น ๆ สำหรับค็อกซ์ออกซิเดชันอย่างสมบูรณ์พอดิบพอดี กิจกรรมค็อกซ์ได้รับเป็นที่ส่วนเริ่มต้นของเส้นโค้งทดลองแทนเจนต์ กิจกรรม COX อย่างฉายรังสีจะแสดงเป็นเปอร์เซ็นต์ของกิจกรรมควบคุมอย่างค็อกซ์

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

กิจกรรม COX ถูกกำหนด photometrically ในเซลล์สเปิร์ม lysated เป็นหลักในขณะที่Miró et al., 1998 ดังต่อไปนี้การเกิดออกซิเดชัน Cytochrome C ในเวลาสั้น ๆ โดยใช้ JASCO V-560 และ V-520 Dual-คานระบบ Dual ความยาวคลื่นออกซิเดชันของภายนอกเพิ่มลด Cytochrome C วัดเป็นการลดลงของการดูดกลืนแสงที่ 550 (การดูดกลืนแสงสูงสุดของ Cytochrome C ลดลงแบบฟอร์ม) ลบ 540 (isosbestic จุด) นาโนเมตร ในการวัดกิจกรรม COX รวมตัวอสุจิ (1 มิลลิกรัมโปรตีน) ถูก lysated สมบูรณ์ก่อนที่นอกเหนือไปจากปฏิกิริยาปานกลางประกอบด้วย 1 มิลลิลิตรของ Tris-HCl 50 มิลลิค่า pH 7.2 ปฏิกิริยาที่เริ่มต้นจากการเพิ่มขึ้นของความเข้มข้นของ saturating ลด cytochrome C (ปกติ 100 ไมครอน) และสำหรับแต่ละตัวอย่างที่เราตรวจสอบว่าไซยาไนด์ยับยั้งปฏิกิริยาการออกกฎกลไกอื่น ๆ สำหรับ COX ออกซิเดชัน กิจกรรม COX ได้รับสัมผัสที่เป็นส่วนเริ่มต้นของเส้นโค้งการทดลอง กิจกรรม COX ตัวอย่างฉายรังสีจะแสดงเป็นร้อยละของการควบคุมกิจกรรมตัวอย่าง COX

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

กิจกรรม Cox ตั้งใจ photometrically ใน lysated เซลล์สเปิร์มเป็นหลักในโครงการó et al . , 1998 , ต่อไปนี้มั่มออกซิเดชัน สั้น ๆ , โดยใช้ v-560 jasco v-520 คานคู่คู่และความยาวคลื่นระบบออกซิเดชันของภายนอกเพิ่มลดมั่มวัดเป็นค่าลดลง 550 ( การดูดกลืนแสงสูงสุดของมั่มลดแบบฟอร์ม ) ลบ 540 ( isosbestic จุด ) nm . เพื่อวัดกิจกรรม Cox ทั้งหมด 5 ( 1 มิลลิกรัมโปรตีน ) ได้อย่างสมบูรณ์ lysated ก่อนนอกจากนี้ปฏิกิริยาปานกลาง ประกอบด้วย 1 มิลลิลิตรโดย– hcl 50 mm pH 7.2 . ปฏิกิริยาเริ่มต้น โดยการเพิ่มความเข้มข้นสูงลดมั่ม ( ปกติ 100 μ M ) และสำหรับแต่ละตัวอย่าง เราได้ตรวจสอบว่าสารยับยั้งปฏิกิริยาออกกฎกลไกอื่น ๆสำหรับ Cox ออกซิเดชัน กิจกรรม Cox ได้เป็นสัมผัสที่ส่วนเริ่มต้นของเส้นโค้งที่ทดลอง กิจกรรมตัวอย่างที่ฉายรังสีค็อกซ์แสดงร้อยละของตัวอย่างควบคุม คอกซ์ กิจกรรม