Glucose-6-phosphate dehydrogenase (

Glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PD) catalyzes the first step of the pentose phosphate pathway. In erythrocytes, the functionality of the pathway is crucial to protect these cells against oxidative damage. G6PD deficiency is the most frequent enzymopathy in humans with a global prevalence of 4.9 %. The clinical picture is characterized by chronic or acute hemolysis in response to oxidative stress, which is related to the low cellular activity of G6PD in red blood cells. The disease is heterogeneous at genetic level with around 160 mutations described, mostly point mutations causing single amino acid substitutions. The biochemical studies aimed to describe the detrimental effects of mutations on the functional and structural properties of human G6PD are indispensable to understand the molecular physiopathology of this disease. Therefore, reliable systems for efficient expression and purification of the protein are highly desirable. In this work, human G6PD was heterologously expressed in Escherichia coli and purified by immobilized metal affinity chromatography in a single chromatographic step. The structural and functional characterization indicates that His-tagged G6PD resembles previous preparations of recombinant G6PD. In contrast with previous protein yield systems, our method is based on commonly available resources and fully accessible laboratory equipment; therefore, it can be readily implemented.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

กลูโคส-6-ฟอสเฟต dehydrogenase (G6PD) catalyzes ขั้นตอนแรกของการสฟอสเฟต ใน erythrocytes การทำงานของทางเดินเป็นสิ่งสำคัญเพื่อป้องกันเซลล์ oxidative ความเสียหายเหล่านี้ ขาด G6PD เป็น enzymopathy บ่อยในมนุษย์กับชุกทั่วโลก 4.9% รูปภาพทางคลินิกเป็นลักษณะ โดยเฉียบพลัน หรือเรื้อรัง hemolysis ในตอบสนองต่อความเครียด oxidative ซึ่งเกี่ยวข้องกับกิจกรรมโทรศัพท์มือถือที่ต่ำของ G6PD ในเม็ดเลือดแดง โรคได้แตกต่างกันในระดับพันธุกรรม มีประมาณ 160 กลายพันธุ์อธิบาย ส่วนใหญ่จุด mutations ก่อให้เกิดกรดอะมิโนเดี่ยวแทน ศึกษาชีวเคมีที่มีวัตถุประสงค์เพื่ออธิบายผลกระทบผลดีของการกลายพันธุ์ในคุณสมบัติหน้าที่ และโครงสร้างของ G6PD มนุษย์สำคัญเข้าใจ physiopathology ระดับโมเลกุลของโรคนี้ได้ ดังนั้น ระบบเชื่อถือได้สำหรับนิพจน์ที่มีประสิทธิภาพและทำให้บริสุทธิ์ของโปรตีนต้องการอย่างมาก ในงานนี้ G6PD มนุษย์ถูกแสดงใน Escherichia coli heterologously และบริสุทธิ์ ด้วยความสัมพันธ์โลหะเอนไซม์ chromatography chromatographic ใน จำแนกโครงสร้าง และการทำงานบ่งชี้ว่า พระติดแท็ก G6PD มีลักษณะเตรียมก่อนหน้าของ recombinant G6PD In contrast with ก่อนหน้านี้โปรตีนผลผลิตระบบ วิธีการของเราอยู่โดยทั่วไปทรัพยากรและอุปกรณ์ห้องปฏิบัติการสามารถเข้าถึงเต็ม ดังนั้น มันสามารถพร้อมดำเนินการ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

กลูโคส 6 ฟอสเฟต dehydrogenase (G6PD) กระตุ้นขั้นตอนแรกของทางเดินฟอสเฟต pentose ในเม็ดเลือดแดง, การทำงานของทางเดินเป็นสิ่งสำคัญในการปกป้องเซลล์เหล่านี้กับความเสียหายออกซิเดชัน ขาด G6PD เป็น enzymopathy บ่อยที่สุดในคนที่มีความชุกทั่วโลก 4.9% ภาพทางคลินิกเป็นลักษณะเม็ดเลือดแดงแตกเรื้อรังหรือเฉียบพลันในการตอบสนองต่อความเครียดออกซิเดชันซึ่งมีความเกี่ยวข้องกับกิจกรรมของเซลล์ต่ำของ G6PD ในเซลล์เม็ดเลือดแดง โรคที่แตกต่างกันในระดับพันธุกรรมที่มีประมาณ 160 การกลายพันธุ์ที่อธิบายไว้ส่วนใหญ่ที่ก่อให้เกิดการกลายพันธุ์ชี้แทนกรดอะมิโนที่เดียว การศึกษาทางชีวเคมีมีวัตถุประสงค์เพื่ออธิบายถึงผลกระทบที่เป็นอันตรายของการกลายพันธุ์ในคุณสมบัติการทำงานและโครงสร้างของ G6PD มนุษย์จะขาดไม่ได้ที่จะเข้าใจ physiopathology โมเลกุลของโรคนี้ ดังนั้นระบบที่เชื่อถือได้สำหรับการแสดงออกที่มีประสิทธิภาพและการทำให้บริสุทธิ์ของโปรตีนที่เป็นที่ต้องการอย่างมาก ในงานนี้ G6PD มนุษย์ได้แสดงออก heterologously ใน Escherichia coli และบริสุทธิ์โดยโลหะตรึงความสัมพันธ์ในขั้นตอนที่โคโครเดียว ลักษณะโครงสร้างและการทำงานแสดงให้เห็นว่าเขา G6PD ติดแท็กคล้ายกับการเตรียมการก่อนหน้านี้ของ G6PD recombinant ในทางตรงกันข้ามกับระบบผลผลิตโปรตีนก่อนหน้านี้วิธีการของเราจะขึ้นอยู่กับทรัพยากรที่มีอยู่ทั่วไปและอุปกรณ์ห้องปฏิบัติการเข้าถึงได้อย่างเต็มที่จึงจะสามารถดำเนินการได้อย่างง่ายดาย

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

glucose-6-phosphate dehydrogenase ( G6PD ) และขั้นตอนแรกของวิถีเพนโตสฟอสเฟต . ในการการทำงานของทางเดินเป็นสิ่งสำคัญเพื่อปกป้องเซลล์จากความเสียหายออกซิเดชัน การขาด G6PD เป็น enzymopathy บ่อยที่สุดในมนุษย์ ที่มีความชุกของโลก 4.9 %ภาพที่คลินิกมีลักษณะเรื้อรังหรือเฉียบพลันการตอบสนองออกซิเดชันความเครียดซึ่งจะเกี่ยวข้องกับกิจกรรมของเซลล์ต่ำของ G6PD ในเซลล์เม็ดเลือดแดง โรคที่แตกต่างกันที่ระดับประมาณ 160 การกลายพันธุ์ทางพันธุกรรมการกลายพันธุ์ที่ทำให้เกิดจุดไว้ ส่วนใหญ่เป็นกรดอะมิโนเดียวแทนได้การศึกษาทางชีวเคมี โดยมีวัตถุประสงค์เพื่อศึกษาผลของการกลายพันธุ์ที่เป็นอันตรายต่อสมบัติเชิงหน้าที่และโครงสร้างของ G6PD มนุษย์ขาดไม่ได้ที่จะเข้าใจ physiopathology โมเลกุลของโรคนี้ ดังนั้น ระบบที่เชื่อถือได้สำหรับการแสดงออกของโปรตีนบริสุทธิ์และมีประสิทธิภาพเป็นที่พึงปรารถนาอย่างสูง ในงานนี้G6PD มนุษย์ heterologously แสดงออกในเชื้อ Escherichia coli และทำให้บริสุทธิ์ โดยการตรึงโลหะขี้รังแคในครั้งเดียว และขั้นตอน มีลักษณะโครงสร้างและการทำงานพบว่า G6PD คล้ายกับแท็กของเขาก่อนหน้าการเตรียม recombinant G6PD . ในทางตรงกันข้ามกับระบบผลผลิตโปรตีนก่อนวิธีของเราจะขึ้นอยู่กับทรัพยากรที่มีอยู่และอุปกรณ์ห้องปฏิบัติการทั่วไปสามารถเข้าถึงได้อย่างเต็มที่ ดังนั้น จึงสามารถพร้อมใช้