This paper describes an mRT-PCR ass

This paper describes an mRT-PCR assay for the simultaneousdetection of three viruses infecting pear trees. Pear is a perennialfruit crop, in which viruses can replicate and spread to the wholeplant, and then persistently affect its development. Although morethan ten viruses and virus-like pathogens have been reported, Applechlorotic leaf spot virus (ACLSV), Apple stem pitting virus (ASPV) andApple stem grooving virus (ASGV) are the most commonly occurringviruses in commercially cultivated pear plants, and these virusesare also commonly present in apple plants. They have been includedin the lists of pathogens requiring tests in certification schemes inmany countries (EPPO, 1999). The mRT-PCR assay described aboveprovides a sensitive tool for the simultaneous detection of theseviruses in a large number of pear materials. For the effective appli-cation of mRT-PCR assay for virus detection in specific hosts, it isimportant to determine experimentally the specificity and sensi-tivity of the primers and to optimize the PCR conditions in thosehosts. In this study, serial PCRs were tried by using different anneal-ing temperatures, primer concentration ratios, and primer pairsto determine the best reaction program and primer combinationfor the mRT-PCR assay. Using the optimized mRT-PCR assay, theexpected fragments of 500 bp, 358 bp and 247 bp specific for ASGV,ACLSV and ASPV could be identified clearly in agarose gel, andthere was not the interference of un-specific products in the PCRproducts. The results indicated that the primer pairs selected werevirus-specific, and that the optimized PCR conditions were idealfor the rapid detection and discrimination of those three viruses inRNA preparations from pear plants.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เอกสารนี้อธิบายถึงการวิเคราะห์รถไฟ PCR สำหรับ simultaneousdetection ไวรัสสามติดต้นไม้ลูกแพร์ ลูกแพร์เป็นพืช perennialfruit ที่ไวรัสสามารถจำลองแพร่กระจายไป wholeplant และจากนั้น สามารถส่งผลกระทบต่อการพัฒนา ถึงแม้ว่าไวรัสสิบ morethan และโรคไวรัสเช่นรายงาน Applechlorotic ลีฟจุดไวรัส (ACLSV), ก้านแอปเปิ้ล pitting ไวรัส (ASPV) andApple ก้าน grooving ไวรัส (ASGV) ได้บ่อยที่สุด occurringviruses ในพืชปลูกในเชิงพาณิชย์ลูกแพร์ และ virusesare เหล่านี้ยังนำเสนอทั่วไปในพืชแอปเปิ้ล พวกเขาได้รับ includedin รายโรคที่ต้องการทดสอบในการรับรองแผนงาน inmany ประเทศ (สนพ. 1999) วิเคราะห์รถไฟ PCR อธิบาย aboveprovides เครื่องมือสำคัญสำหรับการตรวจพบ theseviruses ในวัสดุลูกแพร์เป็นจำนวนมากพร้อมกัน สำหรับการมีประสิทธิภาพ appli cation ของทดสอบรถไฟ PCR สำหรับการตรวจหาไวรัสในโฮสต์เฉพาะ มัน isimportant เพื่อกำหนด experimentally specificity และเซนซิ-tivity ของไพรเมอร์ที่ และ เพื่อเพิ่มประสิทธิภาพการ PCR เงื่อนไขใน thosehosts ในการศึกษานี้ PCRs ตอนุกรมได้พยายาม โดยใช้อุณหภูมิต่างหลอมแบบ-ing อัตราส่วนความเข้มข้นของสีรองพื้น และรองพื้น pairsto กำหนดสุดปฏิกิริยาโปรแกรมและรองพื้น combinationfor ทดสอบรถไฟ PCR ใช้เพิ่มประสิทธิภาพรถไฟ-PCR assay, theexpected ชิ้นส่วนของ 500 bp, 358 bp และ 247 bp เฉพาะสำหรับ ASGV, ACLSV และ ASPV สามารถระบุอย่างชัดเจนใน agarose เจล andthere ไม่มีสัญญาณรบกวนของผลิตภัณฑ์ยังไม่ได้ระบุใน PCRproducts ผลระบุว่า คู่รองพื้นเลือกเฉพาะ werevirus และเงื่อนไข PCR ให้เหมาะถูก idealfor ตรวจสอบอย่างรวดเร็วและการเลือกปฏิบัติของเตรียม inRNA ไวรัสสามเหล่านั้นจากต้นพืช

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

กระดาษนี้อธิบายการทดสอบ MRT-PCR สำหรับ simultaneousdetection ในสามของการติดเชื้อไวรัสต้นไม้ลูกแพร์ ลูกแพร์เป็นพืช perennialfruit ซึ่งในไวรัสที่สามารถทำซ้ำและแพร่กระจายไปยัง wholeplant แล้วเสมอส่งผลกระทบต่อการพัฒนาของ แม้ว่า morethan สิบไวรัสและเชื้อโรคไวรัสเช่นได้รับรายงานไวรัสโรคใบจุด Applechlorotic (ACLSV) ไวรัสเกิดบ่อแอปเปิ้ล (ASPV) andApple เกิดร่องไวรัส (ASGV) เป็นกันมากที่สุด occurringviruses ในการเพาะปลูกในเชิงพาณิชย์พืชลูกแพร์และเหล่านี้ virusesare ยัง ทั่วไปที่มีอยู่ในพืชแอปเปิ้ล พวกเขาได้รับ includedin รายการของเชื้อโรคที่ต้องใช้การทดสอบในรูปแบบที่ได้รับการรับรอง inmany ประเทศ (สนพ 1999) การทดสอบ MRT-PCR อธิบาย aboveprovides เครื่องมือที่มีความสำคัญสำหรับการตรวจสอบพร้อมกันของ theseviruses ในจำนวนมากของวัสดุลูกแพร์ สำหรับที่มีประสิทธิภาพ appli ไอออนบวกของการทดสอบ MRT-PCR ในการตรวจหาไวรัสในโฮสต์ที่เฉพาะเจาะจงก็ isimportant ทดลองเพื่อตรวจสอบความจำเพาะและประสิทธิภาพในการ sensi-ของไพรเมอร์เพื่อเพิ่มประสิทธิภาพและเงื่อนไข PCR ใน thosehosts ในการศึกษานี้ PCRs อนุกรมกำลังพยายามโดยใช้อุณหภูมิหลอมไอเอ็นจีที่แตกต่างกันอัตราส่วนความเข้มข้นของไพรเมอร์และไพรเมอร์ pairsto ตรวจสอบโปรแกรมปฏิกิริยาที่ดีที่สุดและไพรเมอร์ combinationfor การทดสอบ MRT-PCR การใช้เพิ่มประสิทธิภาพการทดสอบ MRT-PCR เศษ theexpected 500 bp 358 bp และ 247 bp ที่เฉพาะเจาะจงสำหรับ ASGV, ACLSV ASPV และอาจจะมีการระบุไว้อย่างชัดเจนในเจล agarose, andthere ไม่ได้รบกวนของผลิตภัณฑ์ยกเลิกเฉพาะใน PCRproducts ที่ ผลการวิจัยพบว่าคู่ไพรเมอร์ที่เลือก werevirus เฉพาะและที่ดีที่สุดเงื่อนไข PCR เป็น idealfor การตรวจสอบอย่างรวดเร็วและการเลือกปฏิบัติของผู้ที่สามไวรัสเตรียม inRNA จากพืชลูกแพร์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

บทความนี้อธิบายวิธี PCR assay รถไฟใต้ดินสำหรับ simultaneousdetection สามไวรัสติดต้นไม้ลูกแพร์ ลูกแพร์เป็น perennialfruit พืชผล ซึ่งไวรัสจะคัดลอกและแพร่กระจายไปยัง wholeplant แล้วไม่มีผลต่อการพัฒนาของ ถึงแม้ว่ามากกว่าสิบไวรัสและไวรัส เช่น โรคที่ได้รับรายงาน applechlorotic ไวรัสใบจุด ( aclsv )ก้านแอปเปิ้ลแบบไวรัส ( aspv ) andapple ก้านเซาะไวรัส ( asgv ) ที่พบบ่อยที่สุดในการปลูกพืชเชิงพาณิชย์ occurringviruses ลูกแพร์ และ virusesare เหล่านี้โดยทั่วไปยังอยู่ในพืชแอปเปิ้ล พวกเขาได้รับรายการของเชื้อโรคที่ต้องเกี่การทดสอบการรับรองโครงการในหลายประเทศ ( สนพ. , 1999 )MRT PCR assay อธิบาย aboveprovides เครื่องมือสำคัญสำหรับการ theseviruses พร้อมกันในตัวเลขขนาดใหญ่ของวัสดุลูกแพร์ สำหรับประสิทธิภาพการใช้รถไฟฟ้า PCR assay สำหรับการตรวจหาไวรัสในเฉพาะโยธา ทั้งนี้เพื่อศึกษาทดลอง และเซนซิ tivity เฉพาะของไพรเมอร์ และ การปรับเงื่อนไขในการตรวจ thosehosts . ในการศึกษานี้อนุกรม pcrs กำลังพยายามใช้หลอมอุณหภูมิแตกต่างกันไอเอ็นจี อัตราส่วนความเข้มข้นของรองพื้นและ primer pairsto ตรวจสอบโปรแกรมปฏิกิริยาที่ดีที่สุดและไพรเมอร์ combinationfor MRT PCR assay . การใช้ที่เหมาะสมซึ่งเป็นรถไฟฟ้าใต้ดินโดยเศษของ 500 BP , 358 BP และ 247 BP เฉพาะ asgv aclsv aspv , และอาจจะระบุไว้อย่างชัดเจนในกาโรสเจลandthere ไม่ใช่การแทรกแซงของผลิตภัณฑ์ที่เฉพาะเจาะจงและใน pcrproducts . พบว่าไพรเมอร์คู่เลือก werevirus เฉพาะและที่เหมาะสมและเงื่อนไข idealfor การตรวจสอบอย่างรวดเร็วและการแบ่งแยกของทั้งสาม inrna การเตรียมไวรัสจากพืชลูกแพร์