All strains were stored in cryovials in a freezer at −80 °C and were
revived by plating. L. monocytogenes, Salmonella spp., E. coli O157:H7
and B. cereus strains were plated individually on Brain Heart Infusion
(BHI) agar [37 g BHI broth (Oxoid, Basingstoke, UK) and 12 g agar bacteriological
(Oxoid), in 1 L of distilled water]. C. jejuni strains were plated
individually on blood agar [40 g blood agar base (Oxoid) and 7%
sterile blood in 1 L of distilled water]. BHI agar plates with either E.
coli, L. monocytogenes or Salmonella spp. were incubated aerobically at
37 °C for 24 h. Plates with B. cereus were incubated aerobically at 30 °
C for 24 h. Plates with C. jejuni were incubated microaerobically at
41.5 °C for 48 h. To prepare the inoculum, a colony of each strain was
picked from a respective plate and inoculated into BHI broth, with
heart infusion (HI) broth (Oxoid) being used for each C. jejuni strain. Incubation
was done in stationary incubators for 24 h, reaching a bacterial
broth culture concentration of approximately 9 log cfu/mL. A cocktail of
five strains of each species in suspension was produced by mixing equal
portions (2 mL) of each strain in a sterile test tube. The three strains of
Salmonella Enteritidis, a strain each of Salmonella Paratyphi B and Salmonella
Typhimurium were mixed together in equal portions (2 mL) of
each strain in a sterile test tube. Each pathogenic bacterial cocktail was
then ready for inoculation into mutandabota. In total 5 pathogenic bacterial
cocktails were produced.
ทุกสายพันธุ์ ที่ถูกเก็บไว้ใน cryovials ในตู้แช่ที่ 80 ° C และ−
revived โดยการชุบ ฉัน monocytogenes , Salmonella spp . , E . coli เป็นสมาชิก : H7
และ B . cereus สายพันธุ์ ใน สมอง หัวใจ แบบชุบยา
( BHI ) วุ้น BHI broth [ 37 กรัม ( oxoid Basingstoke , สหราชอาณาจักร , และ 12 กรัมต่อแบคทีเรีย
( oxoid ) ใน 1 ลิตรของน้ำ ) C . ใช้ชุบ
สายพันธุ์เป็นรายบุคคลในเลือดวุ้น [ 40 G เลือดวุ้นฐาน ( oxoid ) และ 7 %
เป็นหมันในเลือด 1 ลิตรของน้ำ ) วุ้น BHI จานด้วย E .
( L . monocytogenes หรือซัลโมเนลลาที่ถูกบ่ม aerobically
37 °องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมง จานกับ B . cereus ถูกบ่ม aerobically 30 /
c เป็นเวลา 24 ชั่วโมง จาน C ถูกบ่มเชื้อที่ microaerobically
41.5 °องศาเซลเซียสที่เวลา 48 ชั่วโมง เพื่อเตรียมเชื้อ ,อาณานิคมของแต่ละสายพันธุ์
เลือกจากจานที่เกี่ยวข้องและเชื้อ BHI broth ที่มีหัวใจ ( HI )
infusion broth ( oxoid ) ถูกใช้สำหรับแต่ละสายพันธุ์เชื้อ C . . บ่ม
าในตู้เครื่องเขียน 24 H ถึงแบคทีเรีย
ซุปวัฒนธรรมความเข้มข้นประมาณ 9 log CFU / ml ค็อกเทล
5 สายพันธุ์ แต่ละสายพันธุ์ในการผลิตโดยการผสมเท่ากับ
ส่วน ( 2 มล. ) ของแต่ละสายพันธุ์ในหลอดทดลองที่เป็นหมัน 3 สายพันธุ์ของเชื้อซัลโมเนลลาสายพันธุ์แต่ละ enteritidis
, เชื้อ Salmonella typhimurium และ
paratyphi B มาผสมกันในส่วนเท่ากัน ( 2 มล. )
แต่ละสายพันธุ์ในหลอดทดลองที่เป็นหมัน แต่ละโรคแบคทีเรียค็อกเทลคือ
แล้วพร้อมสำหรับการเป็น mutandabota . มีทั้งหมด 5 เชื้อโรคแบคทีเรีย
ค็อกเทลถูกผลิต
การแปล กรุณารอสักครู่..
