The present study was carried out t

The present study was carried out to isolate and characterize
active antioxidant protein from the buffer extract of T. chebula
fruit. The active protein was isolated and purified to homogeneity
after gel chromatography and preparative HPLC. SDS–PAGE and
MALDI-TOF/MS analyses of protein demonstrated its approximate
molecular weight of 16 kDa. Protease digestion of the protein
(TCP-III) destroyed the antioxidant activity, which confirmed that
the active principle is proteinaceous in nature. TCP-III contains
amino acids as evidenced by ninhydrin test, and it was found to
be devoid of sugars, polyphenols, lipids, fatty acid derivatives and
chlorophyll which confirmed that the obtained active principle is
protein. Ellman’s test detected presence of sulphydryl groups in
TCP-III. LC–MS/MS analysis of TCP-III led to identification of 11 sequences (Table 2). Amongst the 11 sequences, four sequences
showed homology to predicted protein fragments from P. trichocarpa, four sequences showed homology with putative uncharacterized protein from O. sativa indica and three sequences showed
homology with 17 kDa thylakoid lumenal protein from S. oleracea.
Peptide fragments obtained by LC–MS analysis showed that TCP-III
contained leucine, lysine, alanine and proline amino acids.
Literature search revealed that antioxidant activity of some proteins is attributed to the presence of Leu- His-Pro amino acid
sequence (Peña-Ramos, Xiong, & Arteaga, 2004). It has been
reported that SH group acts as a free radical scavenger in plant
and animal tissue and SH group of cysteine facilitates antioxidant
activity of glutathione (Selvam & Devaraj, 1996). Presence of Ser,
Thr and Cys amino acids having free hydroxyl and thiol groups in
the peptide fragments of TCP-III, may also contribute to antioxidant potential of the protein (TCP-III) along with other unknown
functional groups.
Oxidative stress inducers could cause a significant increase in
the rate of formation of ROS, such as the superoxide anion radical,
hydroxyl radical, NO radical and Hydrogen peroxide. These could
also cause enhanced lipid peroxidation and oxidation of proteins
as well as DNA. TCP-III effectively scavenges free radicals such as
DPPH, ABTS, NO and H2O2 radicals at the lower concentrations than
the standard BHA and BHT. These results offer scientific evidence
for the use of Hirda fruit in the indigenous system.
Along with free radical scavenging activity, TCP-III significantly
inhibited the oxidation of lenoleic acid in b-carotene bleaching assay. It also showed the tendency to reduce ferric ions and moderate
ferrous ions binding capacity as demonstrated in the ferric ion
reducing and ferrous ion chelating assays.
The outcome of present study reveals that antioxidant protein
from Hirda fruit exhibits multiple antioxidative properties. The
mode of action of antioxidant protein TCP-III could probably be
counteracting or quenching of reactive oxygen species, thereby
reducing the potential of prooxidants to attack the cellular components. Therefore, effective dose of antioxidant protein can be useful
for efficient prevention of oxidative stress. In conclusion, the
16 kDa protein molecule isolated from T. chebula fruit possesses
potential antioxidant and free radical scavenging properties,although the actual mechanism of its protective action is not
clearly known. Further studies are necessary to fully characterize
this active principle, both structurally and functionally, to arrive
at a clear picture of its role as an antioxidant molecule and the
work is in progress.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การศึกษาดำเนินการแยก และลักษณะสารสกัดจากโปรตีนสารต้านอนุมูลอิสระที่ใช้งานอยู่จากบัฟเฟอร์ของ T. chebulaผลไม้ โปรตีนใช้แยก และบริสุทธิ์ไปเนื้อเดียวกันหลังจากเจ chromatography และเตรียม HPLC SDS-หน้า และMALDI-TOF/MS วิเคราะห์โปรตีนแสดงให้เห็นโดยการประมาณน้ำหนักโมเลกุลของ 16 kDa โปรติเอสย่อยโปรตีน(TCP-III) ทำลายอนุมูล ซึ่งยืนยันว่าหลักการใช้งานคือโปรตีนในธรรมชาติ TCP III ประกอบด้วยกรดอะมิโนทลาย ninhydrin ทดสอบ และมันก็จะจะไร้น้ำตาล ไขมัน โพลีฟีน อนุพันธ์ของกรดไขมัน และคลอโรฟิลซึ่งยืนยันว่า หลักการใช้งานได้รับโปรตีนที่มี ทดสอบของ Ellman ตรวจพบสถานะการออนไลน์ของ sulphydryl กลุ่มในTCP-III วิเคราะห์ LC – MS/MS TCP III นำไปสู่การระบุของลำดับ 11 (ตารางที่ 2) หมู่ที่ 11 ลำดับ ลำดับที่สี่แสดงให้เห็นว่า homology การทำนายโปรตีนเศษจาก P. trichocarpa สี่ลำดับแสดงให้เห็นว่า homology กับ putative uncharacterized โปรตีนจาก o. ก sativa indica และลำดับที่สามที่แสดงให้เห็นว่าhomology กับ 17 kDa thylakoid lumenal โปรตีนจาก S. ตื่นสายบางส่วนของเปปไทด์ได้ โดย LC – MS วิเคราะห์พบว่า TCP IIIประกอบด้วยกรดอะมิโน leucine ไลซีน อะลานีน และ prolineค้นหาวรรณกรรมเผยว่า อนุมูลโปรตีนบางมาประกอบกับการปรากฏตัวของกรดอะมิโนลิว - พระ-Proลำดับ (Peña ฟิต คายเนสหยง & Arteaga, 2004) จะได้รับรายงานว่า กลุ่ม SH ที่ทำหน้าที่เป็น scavenger อนุมูลอิสระในโรงงานและเนื้อเยื่อสัตว์และ SH กลุ่ม cysteine ช่วยในการต้านอนุมูลอิสระกิจกรรมของกลูตาไธโอน (Selvam & Devaraj, 1996) สถานะการออนไลน์ของ Serกรดอะมิโนพฤหัสบดีราคาและ Cys มีกลุ่มไฮดรอกและ thiol ฟรีในบางส่วนของเปปไทด์ของ TCP-III ยังอาจนำไปสู่ศักยภาพของสารต้านอนุมูลอิสระโปรตีน (TCP-III) บริการอื่น ๆ ที่ไม่รู้จักกลุ่ม functionalInducers เครียดอาจทำให้เกิดการเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญในอัตราการก่อตัวของ ROS เช่นไอออนอนุมูลซูเปอร์ออกไซด์ไฮดรอกรุนแรง ไม่รุนแรงและไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ เหล่านี้อาจทำ ให้เกิด peroxidation ของไขมันเพิ่มขึ้นและการเกิดออกซิเดชันของโปรตีนเช่นเดียวกับดีเอ็นเอ TCP III มีประสิทธิภาพ scavenges อนุมูลอิสระเช่นDPPH รเรียน NO และอนุมูล H2O2 ที่ความเข้มข้นต่ำกว่าBHA และบาทมาตรฐาน ผลลัพธ์เหล่านี้เสนอหลักฐานทางวิทยาศาสตร์สำหรับการใช้ระบบพื้นเมืองผลไม้ Hirdaพร้อมกับอนุมูลอิสระ scavenging กิจกรรม TCP III อย่างมีนัยสำคัญยับยั้งการเกิดออกซิเดชันของกรด lenoleic ในทดสอบฟอกสี b-แคโรทีน มันยังแสดงให้เห็นแนวโน้มที่จะลดแหล่งไอออน และปานกลางเหล็กไอออนความจุมีผลผูกพันตามที่แสดงในไอออนแหล่งคีเลต assays ไอออนลดลง และเหล็กผลวิจัยเผยว่า โปรตีนสารต้านอนุมูลอิสระจาก Hirda ผลไม้แสดงคุณสมบัติต่าง ๆ ก่อนหน้านี้ การกลไกการทำงานของสารต้านอนุมูลอิสระโปรตีน TCP III อาจจะเอนหรือชุบพันธุ์ ออกซิเจนปฏิกิริยาจึงลดศักยภาพของ prooxidants เพื่อโจมตีคอมโพเนนต์ของเครือข่ายโทรศัพท์ ดังนั้น ยาที่มีประสิทธิภาพของสารต้านอนุมูลอิสระโปรตีนจะเป็นประโยชน์สำหรับการป้องกันที่มีประสิทธิภาพของความเครียดออกซิเดชัน สรุป การมี 16 kDa โมเลกุลโปรตีนที่แยกได้จากผลไม้ chebula ต.สารต้านอนุมูลอิสระและอนุมูลอิสระ scavenging คุณสมบัติ ถึงแม้ว่ากลไกที่แท้จริงของการป้องกันไม่รู้จักกันได้อย่างชัดเจน ศึกษาเพิ่มเติมเป็นสิ่งจำเป็นอย่างสมบูรณ์หลักการนี้ใช้งานอยู่ ทั้งโครงสร้าง และ หน้าที่ จะมาถึงดูภาพชัดเจนของบทบาทของการเป็นโมเลกุลเป็นสารต้านอนุมูลอิสระ และการงานกำลังดำเนินการอยู่

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การศึกษาครั้งนี้ได้ดำเนินการเพื่อแยกและลักษณะของ
โปรตีนสารต้านอนุมูลอิสระที่ใช้งานจากสารสกัดกันชนของ chebula ตัน
ผลไม้ โปรตีนที่ใช้งานถูกแยกบริสุทธิ์และเพื่อความเป็นเนื้อเดียวกัน
หลังจากที่โคเจลและ HPLC เตรียม ระบบ SDS-PAGE และ
MALDI-TOF / MS วิเคราะห์ของโปรตีนที่แสดงให้เห็นถึงตัวอย่างของ
น้ำหนักโมเลกุล 16 กิโลดาลตัน โปรติเอสการย่อยโปรตีน
(TCP-III) ทำลายฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระซึ่งยืนยันว่า
หลักการที่ใช้งานอยู่เป็นโปรตีนในธรรมชาติ TCP-III มี
กรดอะมิโนเป็นหลักฐานโดยใช้ ninhydrin ทดสอบและมันก็พบว่า
จะไร้น้ำตาลโพลีฟีนไขมันอนุพันธ์ของกรดไขมันและ
คลอโรฟิลซึ่งได้รับการยืนยันว่าหลักการที่ใช้งานได้เป็น
โปรตีน ทดสอบ Ellman ของการตรวจพบการปรากฏตัวของกลุ่ม sulphydryl ใน
TCP-III วิเคราะห์ LC-MS / MS ของ TCP-III จะนำไปสู่การระบุ 11 ลำดับ (ตารางที่ 2) ในบรรดา 11 ลำดับสี่ลำดับ
แสดงให้เห็นว่าคล้ายคลึงกันที่จะทำนายเศษโปรตีนจาก P. trichocarpa สี่ลำดับแสดงให้เห็นว่าคล้ายคลึงกับโปรตีน uncharacterized สมมุติจากข้าวปลูก indica และสามลำดับแสดงให้เห็นว่า
คล้ายคลึงกับ 17 กิโลดาลตันโปรตีน lumenal thylakoid จากเอส oleracea.
เปปไทด์ที่ได้รับชิ้นส่วน โดยการวิเคราะห์ LC-MS พบว่า TCP-III
มี leucine, ไลซีน, อะลานีนและกรดอะมิโนโพรลีน.
การค้นหาวรรณกรรมเปิดเผยว่าสารต้านอนุมูลอิสระของโปรตีนบางส่วนมาประกอบกับการปรากฏตัวของเขา Leu--Pro กรดอะมิโน
ลำดับ (Peña-รามอส, Xiong และ Arteaga, 2004) มันได้รับ
รายงานว่ากลุ่ม SH ทำหน้าที่เป็นคนเก็บขยะอนุมูลอิสระในโรงงาน
และเนื้อเยื่อสัตว์และกลุ่ม SH ของ cysteine อำนวยความสะดวกในการต้านอนุมูลอิสระ
การทำงานของกลูตาไธโอน (เซลแวม & Devaraj, 1996) การปรากฏตัวของ Ser,
Thr และ Cys กรดอะมิโนที่มีไฮดรอกฟรีและกลุ่ม thiol ใน
เศษเปปไทด์ของ TCP-III นอกจากนี้ยังอาจนำไปสู่ศักยภาพการต้านอนุมูลอิสระของโปรตีน (TCP-III) พร้อมกับคนอื่น ๆ ที่ไม่รู้จัก
การทำงานเป็นกลุ่ม.
ปฏิกิริยา Oxidative ความเครียดอาจก่อให้เกิด การเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญใน
อัตราการก่อตัวของชมพูเช่นไอออน superoxide รุนแรง
ไฮดรอกรุนแรงไม่รุนแรงและไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ เหล่านี้อาจ
ยังเป็นสาเหตุที่เพิ่มขึ้นเกิด lipid peroxidation และการเกิดออกซิเดชันของโปรตีน
เช่นเดียวกับดีเอ็นเอ TCP-III ได้อย่างมีประสิทธิภาพ scavenges อนุมูลอิสระเช่น
DPPH, ABTS, NO และอนุมูล H2O2 ที่ความเข้มข้นต่ำกว่า
มาตรฐาน BHA และ BHT ผลการเหล่านี้มีหลักฐานทางวิทยาศาสตร์
สำหรับการใช้งานของผลไม้ Hirda ในระบบพื้นเมือง.
พร้อมกับกิจกรรมอนุมูลอิสระ, TCP-III อย่างมีนัยสำคัญ
ยับยั้งการเกิดออกซิเดชันของกรด lenoleic ใน B-แคโรทีนฟอกทดสอบ นอกจากนี้ยังแสดงให้เห็นแนวโน้มที่จะลดไอออนธาตุเหล็กและปานกลาง
ไอออนเหล็กกำลังการผลิตที่มีผลผูกพันตามที่แสดงในไอออน ferric
ลดและเหล็กตรวจไอออนคีเลต.
ผลของการศึกษาครั้งนี้แสดงให้เห็นว่าโปรตีนสารต้านอนุมูลอิสระ
จากผลไม้ Hirda แสดงคุณสมบัติต้านอนุมูลอิสระหลาย
โหมดของการกระทำของโปรตีนสารต้านอนุมูลอิสระ TCP-III อาจจะได้รับการ
ตอบโต้หรือดับของออกซิเจนจึง
ลดศักยภาพของ prooxidants เพื่อโจมตีส่วนประกอบโทรศัพท์มือถือ ดังนั้นยาที่มีประสิทธิภาพของโปรตีนสารต้านอนุมูลอิสระจะมีประโยชน์
ในการป้องกันที่มีประสิทธิภาพของความเครียดออกซิเดชัน สรุปได้ว่า
โมเลกุล 16 กิโลดาลตันโปรตีนที่แยกได้จากผลไม้ T. chebula มีคุณสมบัติ
ต้านอนุมูลอิสระที่มีศักยภาพและฟรีคุณสมบัติต้านอนุมูลอิสระแม้ว่ากลไกที่เกิดขึ้นจริงของการดำเนินการป้องกันของมันไม่ได้เป็น
ที่รู้จักกันอย่างเห็นได้ชัด การศึกษาเพิ่มเติมเป็นสิ่งจำเป็นในการรองรับการแสดงลักษณะของ
หลักการใช้งานนี้ทั้งโครงสร้างและหน้าที่ที่จะมาถึง
ในภาพที่ชัดเจนของบทบาทของการเป็นโมเลกุลสารต้านอนุมูลอิสระและ
การทำงานในความคืบหน้า

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การศึกษาครั้งนี้ มีวัตถุประสงค์เพื่อแยกและจำกัดความโปรตีนสารต้านอนุมูลอิสระปราดเปรียวจากบัฟเฟอร์ สารสกัดจาก chebula Tผลไม้ โปรตีนที่ใช้งานได้แยกและทำให้บริสุทธิ์ การรวมตัวหลังจากเครื่องเจลและค่าปริมาณซูโครส SDS - หน้าmaldi-tof / นางสาวการวิเคราะห์โปรตีน ) ซึ่งโดยประมาณน้ำหนักโมเลกุล 16 กิโลดาลตัน เอนไซม์โปรตีเอส ย่อยโปรตีน( tcp-iii ) ทำลายสารต้านอนุมูลอิสระ ซึ่งยืนยันว่าหลักการทำงานคือ proteinaceous ในธรรมชาติ tcp-iii ประกอบด้วยกรดอะมิโนเป็นหลักฐานโดยทดสอบ ninhydrin และพบว่าไร้น้ำตาล โพลีฟีน , ไขมัน กรดไขมันและอนุพันธ์คลอโรฟิลล์ ซึ่งยืนยันว่าได้ใช้หลักการคือโปรตีน เอลเมิ่นทดสอบที่ตรวจพบการปรากฏตัวของซัลฟดริลกลุ่มในtcp-iii. LC MS / MS และการวิเคราะห์ tcp-iii นำไปสู่การจำแนก 11 ลำดับ ( ตารางที่ 2 ) หมู่ 11 ลำดับ ลำดับสี่พบว่าตัวทำนายเศษโปรตีนจากหน้า trichocarpa สี่ลำดับ พบว่ามีโปรตีนซึ่งเป็น uncharacterized จาก O . sativa indica และสามลำดับแสดงลำดับ 17 กิโลไทลาคอยด์ lumenal โปรตีนจาก S . oleracea .เปปไทด์ที่ได้จากการวิเคราะห์เศษ ( MS ) พบว่า tcp-iii LCที่มีอยู่ลิวซีน , ไลซีน , อะลานีนและ proline กรดอะมิโนค้นหาวรรณกรรมพบว่าฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของโปรตีนเกิดจากการปรากฏตัวของลิว - กรดอะมิโน โปรของเขาลำดับ ( PE 15 a-ramos , xiong , & Arteaga , 2004 ) มันได้รับรายงานว่า กลุ่ม SH ทำหน้าที่เป็นของอนุมูลอิสระในพืชและเนื้อเยื่อสัตว์ และกลุ่มของกรดอะมิโนสารต้านอนุมูลอิสระในอังกฤษกิจกรรมของกลูตาไธโอน ( selvam & devaraj , 1996 ) การปรากฏตัวของเซอร์และกรดอะมิโนที่มีหมู่ไฮดรอกซิล CYS thr ฟรีและกลุ่มขนาดในเปปไทด์ ชิ้นส่วนของ tcp-iii อาจส่งผลให้ศักยภาพของสารต้านอนุมูลอิสระโปรตีน ( tcp-iii ) พร้อมกับอื่น ๆ ที่ไม่รู้จักหมู่ฟังก์ชันการใช้ความเครียดออกซิเดชันสามารถทำให้เกิดการเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญในอัตราผลตอบแทนของการก่อตัวของ เช่น Superoxide anion หัวรุนแรงเอชทีทีพี ไม่รุนแรง และไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ เหล่านี้สามารถทำให้เพิ่ม lipid peroxidation และออกซิเดชันของโปรตีนเช่นเดียวกับดีเอ็นเอ tcp-iii มีประสิทธิภาพเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ เช่นdpph Abbr , ไม่มี , และที่ความเข้มข้นต่ำกว่า H2O2 อนุมูลใช้ bha มาตรฐานและบาท ผลลัพธ์เหล่านี้มีหลักฐานทางวิทยาศาสตร์สำหรับใช้ในระบบ hirda ผลไม้พื้นเมืองพร้อมกับกำจัดอนุมูลอิสระ tcp-iii อย่างมาก ,ยับยั้งปฏิกิริยาออกซิเดชันของกรดใน lenoleic ( ฟอก - . และยังพบแนวโน้มการลดประจุขั้นปานกลางเฟอร์รัสไอออนความจุดังที่แสดงในการจับไอออนเฟอร์ริคการลดและเฟอร์รัสไอออนชนิด ) .ผลของการศึกษาพบว่าสารต้านอนุมูลอิสระโปรตีนจาก hirda ผลไม้แสดงคุณสมบัติต้านหลาย ที่โหมดของการกระทำของสารต้านอนุมูลอิสระโปรตีน tcp-iii อาจจะชนิดหรือดับของชนิดออกซิเจนปฏิกิริยาจึงการลดศักยภาพของ prooxidants โจมตีส่วนประกอบของเซลล์ ดังนั้น ยาที่มีประสิทธิภาพของสารต้านอนุมูลอิสระโปรตีนสามารถเป็นประโยชน์การป้องกันที่มีประสิทธิภาพของความเครียดออกซิเดชัน สรุปโมเลกุลโปรตีน 16 กิโลดาลตันแยกจาก ต. chebula ผลไม้มีคุณสมบัติศักยภาพของสารต้านอนุมูลอิสระและคุณสมบัติขจัดอนุมูลอิสระ แม้ว่ากลไกที่แท้จริงของการกระทำของมันก็ไม่ได้ป้องกันอย่างชัดเจนว่า . มีการศึกษาเพิ่มเติมที่จำเป็นอย่างเต็มที่จำกัดความหลักการใช้งานนี้ ทั้งด้านโครงสร้างและหน้าที่จะมาถึงที่ภาพที่ชัดเจนของบทบาทในฐานะเป็นโมเลกุลที่มีสารต้านอนุมูลอิสระและทำงานอยู่ในความคืบหน้า