.Aspergillus flavus is a major prod

.Aspergillus flavus is a major producer of aflatoxin and an opportunistic pathogen for a wide range of hosts. Understanding genotypic and phenotypic variation within strains of A. flavus is important for controlling disease and reducing aflatoxin contamination. A. flavus is multinucleate and predominantly haploid (n) and homokaryotic. Although cryptic heterokaryosis may occur in nature, it is unclear how nuclei in A. flavus influence genetic heterogeneity and if nuclear condition plays a role in fungal ecology. A. flavus mainly reproduces asexually by producing conidia. In order to observe whether conidia are homokaryotic or heterokaryotic, we labeled nuclei of A. flavus using two different nuclear localized fluorescent reporters. The reporter constructs (pYH2A and pCH2B), encode histones HH2A and HH2B fused at the C terminus with either yellow (EYFP) or cyan (ECFP) fluorescent proteins, respectively. The constructs were transformed into the double auxotrophic strain AFC-1 (−pyrG, −argD) to generate a strain containing each reporter construct. By taking advantage of the nutritional requirement for each strain, we were able to generate fusants between FR36 (−argD) expressing yellow fluorescence, and FR46 (−pyr4) expressing cyan fluorescence. Conidia from fusants between FR36 and FR46 showed three types of fluorescence: only EYFP, only ECFP or both EYFP + ECFP. Conidia containing nuclei expressing EYFP + ECFP were separated by Fluorescence-Activated Cell sorting (FACS) and were found to contain both yellow and cyan fluorescent markers in the same nucleus. Further characterization of conidia having only one nucleus but expressing both EYFP + ECFP fluorescence were found to be diploid (2n). Our findings suggest that A. flavus maintains nuclear heterogeneity in conidial populations.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

. Aspergillus flavus เป็นโปรดิวเซอร์หลักของ aflatoxin และศึกษาการยกสำหรับหลากหลายของโฮสต์ เข้าใจการเปลี่ยนแปลงจีโนไทป์ และไทป์ภายในสายพันธุ์ของ A. flavus เป็นสิ่งสำคัญสำหรับการควบคุมโรค และลด aflatoxin ปน A. flavus เป็น multinucleate เป็น haploid (n) และ homokaryotic แม้ระทม heterokaryosis อาจเกิดขึ้นในธรรมชาติ เป็นที่ชัดเจนว่ามีอิทธิพลต่อแอลฟาใน A. flavus heterogeneity พันธุกรรมและถ้าเงื่อนไขนิวเคลียร์มีบทบาทในระบบนิเวศเชื้อรา A. flavus ส่วนใหญ่คม asexually ผลิต conidia การสังเกต ว่า conidia เป็น homokaryotic หรือ heterokaryotic เราชื่อแอลฟาของ A. flavus โดยใช้สองอื่นนิวเคลียร์ถิ่นฟลูออเรสผู้สื่อข่าว โปรแกรมรายงานที่สร้าง (pYH2A และ pCH2B) เข้ารหัส histones HH2A และ HH2B fused ที่นัส C กับโปรตีนเรืองแสงฟ้า (ECFP) หรือสีเหลือง (EYFP) ตามลำดับ โครงสร้างถูกเปลี่ยนเป็นสายพันธุ์ auxotrophic ดับเบิลเอเอฟซี-1 (−pyrG, −argD) การสร้างต้องใช้ประกอบด้วยโครงสร้างโปรแกรมรายงานแต่ละ โดยใช้ประโยชน์จากความต้องการทางโภชนาการสำหรับแต่ละต้องใช้ เราไม่สามารถสร้าง fusants ระหว่าง FR36 (−argD) แสดง fluorescence สีเหลือง และ FR46 แสดง fluorescence สี (−pyr4) Conidia จาก fusants ระหว่าง FR36 และ FR46 แสดงให้เห็นว่าการ fluorescence: EYFP เพียง เท่านั้น ECFP หรือติดต่อ EYFP + ECFP Conidia ประกอบด้วยแอลฟาแสดง EYFP + ECFP ถูกคั่น ด้วยเซลล์ Fluorescence-Activated เรียงลำดับ (FACS) และพบมีทั้งสีเหลือง และสีเรืองแสงเครื่องหมายของในนิวเคลียสเดียว เพิ่มเติมคุณสมบัติของ conidia ที่มีนิวเคลียสเดียว แต่แสดง EYFP + ECFP fluorescence พบเป็น diploid (2n) ผลการวิจัยของเราแนะนำ flavus ที่อ.รักษา heterogeneity นิวเคลียร์ในประชากร conidial

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

.Aspergillus flavus เป็นผู้ผลิตรายใหญ่ของอะฟลาท็อกซินและการติดเชื้อฉวยโอกาสที่หลากหลายของครอบครัว การทำความเข้าใจและการเปลี่ยนแปลงทางพันธุกรรมฟีโนไทป์ที่อยู่ในสายพันธุ์ของ A. flavus เป็นสิ่งสำคัญสำหรับการควบคุมโรคและลดการปนเปื้อนของอะฟลาท็อกซิน A. flavus เป็น multinucleate และเดี่ยวส่วนใหญ่ (n) และ homokaryotic แม้ว่า heterokaryosis ลับอาจเกิดขึ้นในธรรมชาติมันก็ไม่มีความชัดเจนว่าในนิวเคลียส A. flavus มีอิทธิพลต่อความหลากหลายทางพันธุกรรมและถ้าเงื่อนไขนิวเคลียร์มีบทบาทในระบบนิเวศเชื้อรา A. flavus ส่วนใหญ่เป็นพันธุ์เซ็กโดยการผลิตสปอร์ เพื่อที่จะสังเกตว่าสปอร์มี homokaryotic หรือ heterokaryotic เราติดป้ายนิวเคลียสของ A. flavus ใช้สองภาษาท้องถิ่นที่แตกต่างกันนิวเคลียร์ผู้สื่อข่าวเรืองแสง เป็นผู้ก่อสร้างนักข่าว (pYH2A และ pCH2B) เข้ารหัส histones HH2A และ HH2B ผสมที่ปลายทาง C ที่มีทั้งสีเหลือง (EYFP) หรือสีฟ้า (ECFP) โปรตีนเรืองแสงตามลำดับ เป็นผู้ก่อสร้างถูกเปลี่ยนเป็นสายพันธุ์เอเอฟซีคู่ auxotrophic-1 (-pyrG, -argD) เพื่อสร้างสายพันธุ์ที่มีการสร้างนักข่าวแต่ละ โดยการใช้ประโยชน์จากความต้องการทางโภชนาการสำหรับแต่ละสายพันธุ์เราก็สามารถที่จะสร้าง fusants ระหว่าง FR36 (-argD) การแสดงแสงสีเหลืองและ FR46 (-pyr4) การแสดงแสงสีฟ้า สปอร์จาก fusants ระหว่าง FR36 FR46 และแสดงให้เห็นว่าสามประเภทของการเรืองแสงเพียง EYFP เพียง ECFP หรือทั้งสอง EYFP + ECFP สปอร์ที่มีนิวเคลียสแสดง EYFP + ECFP ถูกแยกออกจากเซลล์เรืองแสงที่ทำงานโดยใช้การเรียงลำดับ (FACS) และพบว่ามีเครื่องหมายทั้งสีเหลืองและสีฟ้าเรืองแสงในนิวเคลียสเดียวกัน ลักษณะต่อไปของสปอร์มีเพียงหนึ่งในนิวเคลียส แต่แสดงการเรืองแสงทั้ง EYFP + ECFP พบว่ามีการซ้ำ (2n) ค้นพบของเราแสดงให้เห็นว่าเอ flavus รักษาเซลล์สืบพันธุ์นิวเคลียร์ในประชากรเชื้อรา

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

. Aspergillus flavus อะฟลาทอกซินเป็นผู้ผลิตรายใหญ่และเป็นเชื้อฉวยโอกาสที่หลากหลายของโฮสต์ การศึกษาความเข้าใจและคุณสมบัติการเปลี่ยนแปลงภายในสายพันธุ์ A . flavus เป็นสิ่งสำคัญเพื่อการควบคุมโรค และลดการปนเปื้อนอะฟลาทอกซิน . A . flavus เป็นแฮพลอยด์ ( n ) และ multinucleate เด่น และ homokaryotic . แม้ว่า heterokaryosis ที่อาจเกิดขึ้นในธรรมชาติมันยังไม่ชัดเจนว่านิวเคลียสใน A . flavus อิทธิพลทางพันธุกรรมที่สามารถและถ้าเงื่อนไขนิวเคลียร์บทบาทในระบบนิเวศของเชื้อรา A . flavus ส่วนใหญ่ reproduces asexually ผลิต conidia . เพื่อสังเกตว่าเดียเป็น homokaryotic หรือ heterokaryotic เราติดป้ายว่านิวเคลียสของ A . flavus ใช้นิวเคลียร์เป็นเรืองแสงแตกต่างกันสองนักข่าว นักข่าว ( pyh2a โครงสร้าง และ pch2b )เข้ารหัสและ hh2a ฮิสโตน hh2b ฟิวส์ที่ C ปลายทางด้วยสีเหลือง ( eyfp ) หรือสีฟ้า ( ecfp ) โปรตีนฟลูออเรสเซนต์ ตามลำดับ การสร้างถูกเปลี่ยนเป็น afc-1 สายพันธุ์คู่ auxotrophic ( − pyrg − , argd ) เพื่อสร้างสายพันธุ์ที่มีแต่ละนักข่าวสร้าง โดยการใช้ประโยชน์จากความต้องการทางโภชนาการของแต่ละสายพันธุ์เราสามารถที่จะสร้างลูกผสมระหว่าง fr36 ( − argd ) แสดงการเรืองแสงสีเหลือง และ fr46 ( − pyr4 ) การแสดงสีฟ้าเรืองแสงด้วย สร้างจากลูกผสมระหว่าง fr36 fr46 และพบสามประเภทของการ eyfp ecfp เท่านั้น , เท่านั้น หรือทั้ง eyfp ecfp .โคนิที่มีนิวเคลียสแสดง eyfp ecfp แยกกัน โดยการกระตุ้นเซลล์เรียง ( facs ) และพบว่ามีทั้งสีเหลืองและสีฟ้าเรืองแสงเครื่องหมายในนิวเคลียสเท่ากัน เพิ่มเติม การสร้าง มีเพียงหนึ่งนิวเคลียสแต่การแสดงทั้ง eyfp ecfp เรืองแสงพบเป็นดิพลอยด์ ( 2n ) เราได้ค้นพบว่า .เชื้อราสามารถรักษานิวเคลียร์ในประชากรเดีย .