where C0 is the initial concentrati

where C0
is the initial concentration of anthocyanin (mg/L); Cd
is
the desorption concentration of the solute in the desorption solution
(mg/L); Ce
is equilibrium concentration of anthocyanin (mg/L); Vd
is
volume of the eluent (L); V0
is volume of initial anthocyanin solution
(L).
Analytical procedures
Anthocyanins were directly determined by the pH-differential
method as described by Wrolstad [22]. Samples were diluted with buffer
and the absorbance was read at 520 and 700 nm using a Jasco V-560
UV/VIS spectrophotometer. Anthocyanin content was calculated as
pelargonidin-3-glucoside, with molar absorbance of 22,400 M-1 cm-1
and molecular weight of 433.2 Da.
Total sugar concentration was determined by 3, 5-dinitrosalicylic
acid colorimetry [23]. Protein concentration was determined by
Coomassie Brilliant Blue method using BSA as standard protein [24].
Results and Discussion
Selection of aqueous two-phase system
Partition behavior and stability of anthocyanins were studied
in ATPSs employing ethanol and different phase forming salts
(dipotassium hydrogen phosphate, natrium carbonate and ammonium
sulphate). Ammonium sulphate was selected as the best salt due to
higher stability of anthocyanins in ammonium sulphate (pH 4.3) than
dipotassium hydrogen phosphate (pH 8.2) and natrium carbonate (pH
9.0). The stability of anthocyanins was proved to be affected by the
pH of the system: When pH of anthocyanin solution was above 8, the
pyran ring in structure of anthocyanin was opened [4]. There was less
than 33.5% anthocyanin in those systems comparing with the acidified
ethanol extract.
The effects of ethanol and ammonium sulphate concentration
on the partitioning of anthocyanins were determined on the basis
of phase diagram of ATPS of ethanol/ (NH4
)2
SO4
as shown in figure
1. Comparing with the previous phase diagram [25], the upper limit
line of two phases was added in figure 1. As shown in figures 2 and
3, the partition coefficient and recovery of anthocyanins increased
dramatically with increasing concentrations of (NH4
)2
SO4
and ethanol,
which indicated that anthocyanins tended to concentrate in the top
phase. The partitioning behavior of anthocyanins was similar with
another water soluble pigments-betalain in ATPS consisting of PEG
and (NH4
)2
SO4
[13]. Compared these ATPSs, the partition coefficient
and recovery of anthocyanins in ATPS of 30% (w/w) ethanol and
19% (w/w) (NH4
)2
SO4
were 10.67 and 96.09%, respectively. And the
recovery was the highest. Thus this ATPS was chosen for the ATPE of
anthocyanins in the next study.
Extraction of anthocyanins from V. uliginosum residue
To optimize ATPE, the effects of ATPE strategies on partition
coefficient and recovery of anthocyanins were investigated (Figure 4).
When (NH4
)2
SO4
solution and ethanol were added to V. uliginosum

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ซึ่ง C0 มีความเข้มข้นเริ่มต้นของมีโฟเลทสูง (mg/L); ซีดี มีdesorption ความเข้มข้นของตัวถูกละลายในโซลูชัน desorption(mg/L); Ce มีความเข้มข้นสมดุลของมีโฟเลทสูง (mg/L); Vd มีปริมาณ eluent (L); V0 เป็นปริมาตรของโซลูชันเริ่มต้นมีโฟเลทสูง(L)ขั้นตอนที่วิเคราะห์Anthocyanins ถูกกำหนด โดยค่า pH แตกต่างกันโดยตรงวิธีตามที่อธิบายไว้ โดย Wrolstad [22] ตัวอย่างที่ผสมกับบัฟเฟอร์และ absorbance ที่ถูกอ่านใน 520 และ 700 nm ใช้ Jasco V-560เครื่องทดสอบกรดด่าง UV/VIS เนื้อหามีโฟเลทสูงคำนวณเป็นpelargonidin-3-glucoside กับ absorbance สบ 22,400 M-1 ซม. 1และน้ำหนักโมเลกุลของดา 433.2กำหนดความเข้มข้นของน้ำตาลรวม 3, 5-dinitrosalicylicกรด colorimetry [23] กำหนดโดยความเข้มข้นของโปรตีนวิธี Coomassie Brilliant Blue ที่ใช้บีเอสเอเป็นโปรตีนมาตรฐาน [24]ผลและการสนทนาเลือกระบบอควี two-phaseศึกษาลักษณะการทำงานของพาร์ติชันและเสถียรภาพของ anthocyaninsใน ATPSs ใช้เอทานอลและระยะต่าง ๆ ที่เป็นเกลือ(dipotassium ไฮโดรเจนฟอสเฟต natrium คาร์บอเนต และแอมโมเนียซัลเฟต) แอมโมเนียมซัลเฟตถูกเลือกเป็นเกลือที่ดีที่สุดเนื่องเสถียรภาพสูงของ anthocyanins ในแอมโมเนียมซัลเฟต (pH 4.3) มากกว่าdipotassium ไฮโดรเจนฟอสเฟต (pH 8.2) และ natrium carbonate (pH9.0) . ความมั่นคงของ anthocyanins ถูกพิสูจน์จะได้รับผลกระทบจากการpH ของระบบ: เมื่อ pH ของโซลูชันที่มีโฟเลทสูงเหนือ 8 การแหวน pyran ในโครงสร้างของมีโฟเลทสูงถูกเปิด [4] มีน้อยกว่ามีโฟเลทสูง 33.5 ในระบบเหล่านั้นเปรียบเทียบกับที่ acidifiedเอทานอลสารสกัดจากผลกระทบของเอทานอลและแอมโมเนียมซัลเฟตความเข้มข้นในการแบ่งพาร์ทิชันของ anthocyanins ถูกกำหนดบนพื้นฐานของเฟสไดอะแกรมของ ATPS ของเอทานอล / (NH4) 2SO4 ดังแสดงในรูป1. เปรียบเทียบกับระยะก่อนหน้าไดอะแกรม [25], ขีดจำกัดบนมีเพิ่มรายการ 2 ขั้นตอนในรูปที่ 1 ดังแสดงในรูปที่ 2 และ3 สัมประสิทธิ์ของพาร์ติชันและการกู้คืนของ anthocyanins ที่เพิ่มขึ้นอย่างมากกับการเพิ่มความเข้มข้นของ (NH4) 2SO4 และเอทานอ ลซึ่งระบุว่า anthocyanins มีแนวโน้มจ่อด้านบนขั้นตอนการ การแบ่งพาร์ติชันของ anthocyanins คล้ายกับอีกน้ำละลายสี-betalain ใน ATPS ประกอบด้วย PEGและ (NH4) 2SO4 [13] การเปรียบเทียบเหล่านี้ ATPSs สัมประสิทธิ์พาร์ติชันและการกู้คืนของ anthocyanins ใน ATPS ของเอทานอล 30% (w/w) และ19% (w/w) (NH4) 2SO4 มี 10.67 และ 96.09% ตามลำดับ และกู้ได้สูงสุด ดัง นี้ ATPS ถูกเลือกสำหรับ ATPE ของanthocyanins ในการศึกษาต่อไปสกัด anthocyanins จาก V. uliginosum สารตกค้างการเพิ่มประสิทธิภาพ ATPE ผลกระทบของกลยุทธ์ ATPE บนพาร์ติชันสอบสวนสัมประสิทธิ์และการกู้คืนของ anthocyanins (รูปที่ 4)เมื่อ (NH4) 2SO4 โซลูชั่นและเอทานอลได้เพิ่ม V. uliginosum

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ที่ C0
เป็นความเข้มข้นเริ่มต้นของ anthocyanin (มิลลิกรัม / ลิตร); Cd
คือ
ความเข้มข้นของการคายตัวถูกละลายในสารละลายคาย
(มิลลิกรัม / ลิตร); Ce
คือความเข้มข้นของ anthocyanin สมดุล (mg / L); Vd
คือ
ปริมาณของตัวชะ (L); V0
ปริมาณของการแก้ปัญหา anthocyanin เริ่มต้น
(L).
ขั้นตอนการวิเคราะห์
Anthocyanins ถูกกำหนดโดยตรงจากค่า pH ที่แตกต่างกัน
วิธีการตามที่อธิบาย Wrolstad [22] ตัวอย่างที่ถูกเจือจางด้วยบัฟเฟอร์
และการดูดกลืนแสงได้อ่านที่ 520 และ 700 นาโนเมตรโดยใช้ Jasco V-560
UV / VIS spectrophotometer เนื้อหา anthocyanin ที่คำนวณได้เป็น
pelargonidin-3-glucoside มีการดูดกลืนแสงของฟันกราม 22,400 M-1-1 ซม.
และน้ำหนักโมเลกุล 433.2 ดา.
ความเข้มข้นของน้ำตาลทั้งหมดถูกกำหนดโดย 3, 5-dinitrosalicylic
colorimetry กรด [23] ความเข้มข้นของโปรตีนถูกกำหนดโดย
วิธีการ Coomassie สีฟ้าสดใสโดยใช้บีเอสเอเป็นโปรตีนมาตรฐาน [24].
ผลการอภิปรายและ
การเลือกระบบน้ำสองเฟส
พฤติกรรมพาร์ทิชันและความมั่นคงของ anthocyanins ศึกษา
ใน ATPSs จ้างเอทานอลและเฟสที่แตกต่างกันขึ้นรูปเกลือ
(dipotassium ฟอสเฟตไฮโดรเจน natrium คาร์บอเนตและแอมโมเนียม
ซัลเฟต) แอมโมเนียมซัลเฟตได้รับเลือกเป็นเกลือที่ดีที่สุดเนื่องจาก
มีความมั่นคงสูงขึ้นของ anthocyanins ในแอมโมเนียมซัลเฟต (pH 4.3) มากกว่า
ฟอสเฟต dipotassium ไฮโดรเจน (pH 8.2) และคาร์บอเนต natrium (pH
9.0) ความมั่นคงของ anthocyanins ได้รับการพิสูจน์แล้วว่าได้รับผลกระทบจาก
ค่า pH ของระบบ: เมื่อค่า pH ของการแก้ปัญหา anthocyanin อยู่เหนือ 8
แหวน pyran ในโครงสร้างของ anthocyanin ถูกเปิด [4] มีน้อย
กว่า 33.5% anthocyanin ในระบบเหล่านั้นเปรียบเทียบกับกรด
สารสกัดเอทานอล.
ผลกระทบของเอทานอลและแอมโมเนียมซัลเฟตความเข้มข้น
ในการแบ่งพาร์ทิชันของ anthocyanins ได้รับการพิจารณาบนพื้นฐาน
ของแผนภาพขั้นตอนของการ Atps เอทานอล / (NH4
) 2
SO4
ที่แสดง ในรูปที่
1 เปรียบเทียบกับเฟสไดอะแกรมก่อนหน้านี้ [25], ขีด จำกัด บน
สายของสองขั้นตอนถูกบันทึกในรูปที่ 1 ดังแสดงในรูปที่ 2 และ
3 สัมประสิทธิ์และการฟื้นตัวของ anthocyanins เพิ่มขึ้น
อย่างมากที่มีความเข้มข้นที่เพิ่มขึ้นของ (NH4
) 2
SO4
และ เอทานอล
ซึ่งชี้ให้เห็นว่า anthocyanins มีแนวโน้มที่จะมีสมาธิในด้านบน
เฟส พฤติกรรมการแบ่งพาร์ทิชันของ anthocyanins ก็คล้ายคลึงกับ
ที่ละลายน้ำได้อีกเม็ดสี-betalain ใน Atps ประกอบด้วย PEG
และ (NH4
) 2
SO4
[13] เมื่อเทียบ ATPSs เหล่านี้สัมประสิทธิ์
และการฟื้นตัวของ anthocyanins ใน Atps 30% (w / w) และเอทานอล
19% (w / w) (NH4
) 2
SO4
เป็น 10.67 และ 96.09% ตามลำดับ และ
การกู้คืนสูงสุด ดังนั้น Atps นี้เป็นทางเลือกสำหรับ ATPE ของ
anthocyanins ในการศึกษาต่อไป.
สกัดจากสารตกค้าง anthocyanins uliginosum โวลต์
เพื่อเพิ่มประสิทธิภาพ ATPE, ผลกระทบของกลยุทธ์ ATPE บนพาร์ติชัน
สัมประสิทธิ์และการฟื้นตัวของ anthocyanins ถูกตรวจสอบ (รูปที่ 4).
เมื่อ (NH4
) 2
SO4
วิธีการแก้ปัญหาและเอทานอลมีการเพิ่มโวลต์ uliginosum

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ที่ C0
มีความเข้มข้นเริ่มต้นของสารแอนโทไซยานิน ( mg / L )

; ซีดีเป็นมีผลต่อความเข้มข้นของตัวถูกละลายในสารละลายไคโต
( mg / L )
; CE เป็นสมดุลความเข้มข้นของแอนโธไซยานิน ( mg / L )

; กามโรคคือปริมาตรของสารละลาย ( L ) ; การผลิ
คือ แอนโทไซยานินปริมาณเริ่มต้นแก้ปัญหา
( L )

ขั้นตอนการวิเคราะห์แอนโทไซยานินเป็นโดยตรง โดยค่า
อวิธีการตามที่อธิบายไว้โดย wrolstad [ 22 ] ตัวอย่างที่เจือจางด้วยบัฟเฟอร์และค่า
คืออ่านแล้ว 700 nm ใช้ jasco v-560
UV / VIS วัสดุ แอนโธไซยานินปริมาณคำนวณเป็นค่า
pelargonidin-3-glucoside กับฟันกรามของ 22400 m-1 cm-1
และน้ำหนักโมเลกุลของ 433.2 ดา .
ความเข้มข้นน้ำตาลทั้งหมดถูกกำหนดจาก 3 , 5-dinitrosalicylic
กรดเม็ด [ 23 ]ความเข้มข้นของโปรตีนถูกกำหนดโดย
เหล่านี้น่าจะเป็นสีฟ้าสดใสโดยใช้ BSA เป็นโปรตีนมาตรฐาน [ 24 ] .
ผลลัพธ์และการอภิปรายของน้ำแบบพาร์ทิชันระบบ

พฤติกรรมและเสถียรภาพของแอนโทไซยานินได้
atpss ใช้เอทานอล และขั้นตอนต่าง ๆในรูปเกลือ
( ไดไฮโดรเจนฟอสเฟต แอมโมเนียซัลเฟต คาร์บอเนต และ natrium
)แอมโมเนียมซัลเฟต ถูกเลือกเป็นเกลือที่ดีที่สุดเนื่องจากเสถียรภาพของแอนโทไซยานินใน
สูงกว่าแอมโมเนียมซัลเฟต ( pH 4.3 ) มากกว่า
ไดไฮโดรเจนฟอสเฟต ( pH 8.2 ) และนาเทรียมคาร์บอเนต ( M
9.0 ) เสถียรภาพของแอนโทไซยานินได้พิสูจน์แล้วว่าได้รับผลกระทบโดย
พีเอชของระบบ : เมื่อพีเอชของสารละลายแอนโธไซยานินเหนือ 8 ,
Name แหวนในโครงสร้างของแอนโธไซยานินเปิด [ 4 ]
มีน้อยกว่า 33.5% แอนโธไซยานินในระบบ เมื่อเปรียบเทียบกับสารสกัดเอทานอลที่ปรับ
.
ผลกระทบของเอทานอลและแอมโมเนียมซัลเฟตความเข้มข้น
บนพาร์ติชั่นของแอนโทไซยานินโดยพิจารณาบนพื้นฐาน
ของแผนภาพเฟสของ atps เอทานอล / ( NH4
) 2


ปา ดังแสดงในรูปที่ 1 เปรียบเทียบกับก่อนหน้าแผนภาพเฟส [ 25 ] , บนจำกัด
สายสองขั้นตอนที่ถูกเพิ่มเข้ามาในรูปที่ 1ดังแสดงในรูป 2
3 , ค่าสัมประสิทธิ์การแบ่งและการกู้คืนของแอนโทไซยานินเพิ่มขึ้น
อย่างมากกับเพิ่มความเข้มข้นของ ( NH4
)
2

ปา และเอทานอล ซึ่งพบว่า แอนโทไซยานิน มีแนวโน้มที่จะมีสมาธิในขั้นตอนด้านบน

แบ่งพาร์ติชันพฤติกรรมของแอนโทไซยานินก็คล้ายกับอีกสี ละลายในน้ำ
betalain atps ประกอบด้วย PEG และ ( NH4

) 2
ปา
[ 13 ]เปรียบเทียบเหล่านี้ atpss , ค่าสัมประสิทธิ์การแบ่ง
และการกู้คืนของแอนโทไซยานินใน atps 30 % ( w / w ) และเอทานอล
19 % ( w / w ) ( NH4
) 2

) และปาพืช 96.09 ตามลำดับ และ
กู้คืนมากที่สุด จึง atps ได้รับเลือกให้ atpe ของ
แอนโธไซยานินในการทดลองต่อไป การสกัดแอนโทไซยานินจาก V . uliginosum
กาก
เพื่อเพิ่มประสิทธิภาพ atpe ผลของ atpe กลยุทธ์บนพาร์ติชัน
สัมประสิทธิ์และการกู้คืนของแอนโทไซยานิน คือ ( รูปที่ 4 ) .
เมื่อ ( NH4
) โซลูชั่นปา
2
และ ethanol เพิ่ม V . uliginosum