Materials and methods
2.1 collection of plants
Fully developed leaves of the A. paniculata were collected from different riegions of Cuddalore District, Tamilnadu, India. It was authenticated by a plant taxonomist form the Department of Botany, Annamalai University. A voucher specimen is deposited at the herbarium of pant phytochemistry division, Department of Zoology, Annamalai University.
2.2 Extraction
The leaves were washed with tap water, shade dhade dried and finely ground. The finely ground plant material (3.0 kg/solevnt) wes loaded in soxhlet apparatus and was extracted with five diffcrcnt solvents namely benzene, hexane,ethyl acetate, methnol and chloroform individually [29] . The solvent from the extract was removed using a rotary vacuum evaporator to collect the crude extract. The crude residue of this plant varies with the solvents used. The A. paniculata with five different solvents yielded 81.20,94.85.79.40,97.60 and 121.30 g of crude residue respectively. Standard stock solutions were prepared at 1% by dissoving the residues in acetone. From this stock solution, different concentrations were prepared and these solutions were used for larvicidal and ovicidal bioassays.
2.3 test organisms
The mospquitoes, Cx. Quinquefasciatus and Ae aegypti were reared in the vector control laboratory, Department of Zoology, Annamalai University. The larvae were fed on dog biscuits and yeast powder in the 3:1 ratio Adulte were provided with 10% sucrose solution and one week old chick for blood meal. Mosquitoes were held t +- 2 C , 70%-85% relative humidty (RH), with a photo period of 14 h light,10 h dark
2.4 Larvicidal bioassay
The laricidal activity of the plant crude extracith was evaluated as per the method recommended by WHO[30]. Batches of 25 third instar were thansferred to a small disposable test cups,each containing 200 ml. of water The appropriate volme of dilution was added to 200 ml water in the cups to obtain the desired target dosage (concentration ranging from 40to 250 ppm), staeting with the lowest concentration. Six replicate were set up for each concentration and an equal number of control were set up simultaneously using yap water . To this 1ML of appropriate solvent was added . The LC50 value was calculated after 24 h by probit analysis[31].
2.5 Ovicidal activity
For ovicidal activity,slightly modified method of Su and Mulla[32] was performed. The egg raft/eggs of Cx. Quinquefasciatus and Ae. Aegypti were collected from vector control laboratory, Annamalai University. The different leaf extract diluted in the appropriate solvent to achieve various concentrations ranging from 50 to 300 ppm . Eggs of these mosquito species (100 nos) were exposed to each concentrations of leaf extract until they hatched or died. After treatment the eggs from each concentrations were individually transferred to distilled water cuqs for hatching assessment after counting the eggs under microscoperiate control. The hatch rates were assessed 48 h post treatment by following formula.
2.6. Stalistial analysis
The average larval mortality data were sudjected to probit analysis for calculating LC50,LC90 and other statistics at 95% confidence limits of upper confidence limit and lower using the SPSS12.0 (Statistical Package of Social Sciences) software. Results with P
วัสดุและวิธีการชุดที่ 2.1 ของพืช พัฒนาเต็มใบของฟ้าทะลายโจรอ.ได้รวบรวมจาก riegions ต่าง ๆ ของ Cuddalore, Tamilnadu อินเดีย มีการพิสูจน์ตัวจริง โดยพืช taxonomist แบบภาควิชาพฤกษศาสตร์ มหาวิทยาลัยนามา ตัวอย่างสำคัญมีการฝากเงินที่หอพรรณไม้มหาวิทยาลัย pant พฤกษเคมีกอง ภาควิชาสัตววิทยา นามา2.2 สกัด ใบไม้ถูกล้าง ด้วยน้ำประปา dhade สีแห้ง และประณีตดิน ประณีตดินพืชวัสดุ (3.0 kg/solevnt) เวสโหลดในเครื่อง soxhlet และถูกสกัด ด้วยห้า diffcrcnt หรือสารทำละลายคือเบนซีน เฮกเซน เอทิล acetate, methnol และคลอโรฟอร์มละ [29] ตัวทำละลายจากการดึงข้อมูลถูกลบใช้ evaporator สิวโรตารี่ที่รวบรวมสารสกัดหยาบ สารตกค้างน้ำมันพืชนี้แตกต่างกันไปหรือสารทำละลายที่ใช้ ฟ้าทะลายโจรอ. ด้วยหรือสารทำละลายต่าง ๆ 5 ผล 81.20,94.85.79.40,97.60 และ 121.30 g ของสารตกค้างน้ำมันตามลำดับ หุ้นแก้ได้เตรียม 1% โดย dissoving ตกในอะซิโตน จากวิธีนี้สินค้าคงคลัง ความเข้มข้นแตกต่างกันถูกเตรียม และโซลูชั่นเหล่านี้ใช้สำหรับ larvicidal และ ovicidal bioassays2.3 ทดสอบสิ่งมีชีวิต Mospquitoes, Cx. Quinquefasciatus และ Ae aegypti ถูกผลิตภัณฑ์ในเวกเตอร์ควบคุมห้องปฏิบัติการ ภาควิชาสัตววิทยา นามามหาวิทยาลัย ตัวอ่อนได้เลี้ยงสุนัขขนมปังและยีสต์ผงในอัตราส่วน 3:1 Adulte ได้ 10% ซูโครสโซลูชันและหนึ่งสัปดาห์เก่าเจี๊ยบอาหารเลือด ยุงได้จัด t + 2 C, 70% - 85% ญาติ humidty (RH), มีระยะเวลาการถ่ายแสง 14 h, h เข้ม 102.4 larvicidal bioassay กิจกรรม laricidal ของ extracith น้ำมันพืชถูกประเมินตามวิธีที่แนะนำ โดย [30] ชุดของ instar 25 สามถูก thansferred กับถ้วยทดสอบผ้าอ้อมขนาดเล็ก แต่ละที่มี 200 ml. น้ำ volme ที่เหมาะสมของเจือจางเพิ่ม 200 ml น้ำในถ้วยปริมาณเป้าหมายที่ต้องการรับ (ตั้งแต่ 40to ความเข้มข้น 250 ppm), staeting กับความเข้มข้นต่ำ ทำซ้ำหกถูกตั้งค่าสำหรับแต่ละความเข้มข้น และของตัวควบคุมถูกติดตั้งพร้อมใช้น้ำยาบ ML นี้ 1 ของตัวทำละลายที่เหมาะสมที่เพิ่มขึ้น ค่า LC50 ถูกคำนวณหลังจาก 24 ชม โดย probit วิเคราะห์ [31]2.5 กิจกรรม ovicidal สำหรับกิจกรรม ovicidal วิธีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อยของ Su และ Mulla [32] ที่ดำเนินการ ไข่แพ/ไข่ของ Cx. Quinquefasciatus และ Ae Aegypti ถูกเก็บรวบรวมจากห้องปฏิบัติการควบคุมเวกเตอร์ มหาวิทยาลัยนามา สารสกัดจากใบอื่นยกเว้นในตัวทำละลายที่เหมาะสมเพื่อให้ได้ความเข้มข้นต่าง ๆ ตั้งแต่ 50 ถึง 300 ppm ไข่พันธุ์ยุง (หมายเลข 100) ได้สัมผัสกับแต่ละความเข้มข้นของสารสกัดจากใบจนกว่าจะฟัก หรือเสียชีวิต หลังการรักษา จากแต่ละความเข้มข้นถูกโอนย้ายไป cuqs น้ำกลั่นสำหรับฟักประเมินหลังจากการตรวจนับไข่ภายใต้การควบคุมของ microscoperiate ที ราคาพิเศษขณะโพสต์ 48 h จากการประเมินการรักษา ด้วยสูตรต่อไปนี้2.6 Stalistial วิเคราะห์ข้อมูลการตาย larval เฉลี่ยได้ sudjected การวิเคราะห์ probit คำนวณ LC50, LC90 และสถิติอื่น ๆ ที่จำกัดความเชื่อมั่น 95% ของขีดจำกัดความเชื่อมั่นบน และล่างโดยใช้ซอฟต์แวร์ SPSS12.0 (สถิติแพคเกจของสังคมศาสตร์) ผล P < 0.05 ได้ถือเป็นซอฟต์แวร์ ผล P < 0.05 ได้ถือได้อย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ
การแปล กรุณารอสักครู่..

วัสดุและวิธีการ
2.1 คอลเลกชันของพืช
ได้รับการพัฒนาอย่างเต็มที่ใบของฟ้าทะลายโจรที่ถูกเก็บรวบรวมจาก riegions แตกต่างกันของคุดอำเภอทมิฬนาฑูอินเดีย มันได้รับการรับรองความถูกต้องโดยอนุกรมวิธานรูปแบบกรมพฤกษศาสตร์ Annamalai มหาวิทยาลัย ตัวอย่างบัตรกำนัลจะฝากที่หอพรรณไม้ของฝ่ายพฤกษเคมีกางเกง, ภาควิชาสัตววิทยา Annamalai มหาวิทยาลัย.
2.2 การสกัด
ใบถูกล้างด้วยน้ำประปา dhade ที่ร่มแห้งและบดละเอียด วัสดุปลูกบดละเอียด (3.0 กก. / solevnt) เวสสตรีทโหลดในอุปกรณ์วิธีการสกัดแบบและได้รับการสกัดด้วยตัวทำละลายห้า diffcrcnt คือเบนซินเฮกเซนเอทิลอะซีเต, methnol และคลอโรฟอร์มที [29] ตัวทำละลายจากสารสกัดจะถูกลบออกโดยใช้เครื่องระเหยแบบหมุนสูญญากาศในการเก็บรวบรวมสารสกัดหยาบ สารตกค้างดิบของพืชชนิดนี้ขึ้นอยู่กับตัวทำละลายที่ใช้ ฟ้าทะลายโจรห้าตัวทำละลายที่แตกต่างกันส่งผลให้ผู้ 81.20,94.85.79.40,97.60 และ 121.30 กรัมของสารตกค้างดิบตามลำดับ มาตรฐานโซลูชั่นหุ้นได้เตรียมที่ 1% โดย dissoving ตกค้างในอะซีโตน จากสารละลายหุ้นนี้ความเข้มข้นที่แตกต่างกันได้รับการเตรียมความพร้อมและการแก้ปัญหาเหล่านี้ถูกนำมาใช้สำหรับการฆ่าลูกน้ำยุงและสารยับยั้งการวางไข่ bioassays.
2.3 การทดสอบชีวิต
mospquitoes, Cx quinquefasciatus และ Ae aegypti ถูกเลี้ยงในห้องปฏิบัติการควบคุมเวกเตอร์, ภาควิชาสัตววิทยา Annamalai มหาวิทยาลัย ตัวอ่อนได้รับการเลี้ยงดูในหมาและผงยีสต์ในอัตราส่วน 3: 1 Adulte มีให้กับ 10% วิธีการแก้ปัญหาน้ำตาลซูโครสและเจี๊ยบเก่าหนึ่งสัปดาห์สำหรับการรับประทานอาหารในเลือด ยุงที่ถูกจัดขึ้น t + - 2 C, 70% -85% เมื่อเทียบ humidty (RH) โดยมีระยะเวลาภาพของแสง 14 ชั่วโมง, 10 ชั่วโมงที่มืด
2.4 ฆ่าลูกน้ำยุงชีวภาพ
กิจกรรม laricidal ของ extracith น้ำมันดิบโรงงานถูกประเมินตามวิธีการที่แนะนำ โดยองค์การอนามัยโลก [30] สำหรับกระบวนการของ 25 วัยที่สามถูก thansferred การทดสอบที่ใช้แล้วทิ้งถ้วยเล็ก ๆ แต่ละที่มีขนาด 200 ml น้ำ Volme ที่เหมาะสมในการลดสัดส่วนถูกบันทึกอยู่ในน้ำ 200 มล. ในถ้วยเพื่อให้ได้ปริมาณเป้าหมายที่ต้องการ (ความเข้มข้นตั้งแต่ 40to 250 ppm), staeting ที่มีความเข้มข้นต่ำสุดที่ หกซ้ำถูกตั้งขึ้นสำหรับแต่ละความเข้มข้นและจำนวนที่เท่ากันของการควบคุมถูกตั้งขึ้นพร้อมกันโดยใช้น้ำเห่าบ๊อก ๆ ต้องการ 1 ล้านเหรียญของตัวทำละลายที่เหมาะสมนี้ถูกเพิ่มเข้ามา ค่า LC50 ที่คำนวณได้หลังจาก 24 ชั่วโมงโดยการวิเคราะห์ probit [31].
2.5 สารยับยั้งการวางไข่กิจกรรม
สำหรับกิจกรรมสารยับยั้งการวางไข่, การแก้ไขเล็กน้อยวิธีการของซูและ Mulla [32] ถูกดำเนินการ แพไข่ / ไข่ของ Cx quinquefasciatus และแอะ อียิปต์ถูกเก็บรวบรวมจากห้องปฏิบัติการควบคุมเวกเตอร์, Annamalai มหาวิทยาลัย สารสกัดจากใบที่แตกต่างกันเจือจางในตัวทำละลายที่เหมาะสมเพื่อให้บรรลุความเข้มข้นต่างๆตั้งแต่ 50-300 พีพีเอ็ม ไข่ของยุงเหล่านี้ (100 ซึ่งไม่ได้ระบุ) ได้รับการสัมผัสกับความเข้มข้นของแต่ละสารสกัดจากใบจนกว่าพวกเขาจะฟักหรือเสียชีวิต หลังจากการรักษาไข่จากความเข้มข้นของแต่ละถูกโอนเป็นรายบุคคลเพื่อ cuqs น้ำกลั่นสำหรับการประเมินหลังจากฟักไข่นับภายใต้การควบคุม microscoperiate อัตราการฟักได้รับการประเมิน 48 ชั่วโมงการรักษาโพสต์โดยทำตามสูตร. 2.6 การวิเคราะห์ Stalistial ข้อมูลการตายของตัวอ่อนเฉลี่ยถูก sudjected การวิเคราะห์ probit สำหรับการคำนวณ LC50, LC90 และสถิติอื่น ๆ ที่ขีด จำกัด ของความเชื่อมั่นที่ 95% ของวงเงินความเชื่อมั่นบนและล่างโดยใช้ SPSS12.0 (สถิติแพคเกจสังคมศาสตร์) ซอฟแวร์ ผลกับ P <0.05 ได้รับการพิจารณาให้เป็นซอฟแวร์ ผลกับ P <0.05 ได้รับการพิจารณาอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ
การแปล กรุณารอสักครู่..

วัสดุและวิธีการรวบรวมพืช
2.1 พัฒนาอย่างเต็มที่ใบของฟ้าทะลายโจรโดยใช้ข้อมูลจาก riegions A แตกต่างกันของคุด District , Tamilnadu , อินเดีย มันคือการรับรองโดย taxonomist พืชจากภาควิชาพฤกษศาสตร์ annamalai มหาวิทยาลัย คูปองตัวอย่างเป็นเงินฝากที่หอพรรณไม้กองพฤกษเคมี กางเกง ภาควิชาสัตววิทยา annamalai มหาวิทยาลัย .
22 Extraction
The leaves were washed with tap water, shade dhade dried and finely ground. The finely ground plant material (3.0 kg/solevnt) wes loaded in soxhlet apparatus and was extracted with five diffcrcnt solvents namely benzene, hexane,ethyl acetate, methnol and chloroform individually [29] .ตัวทำละลายจากสารสกัดถูกลบโดยใช้ระเหยแบบสุญญากาศเพื่อรวบรวมสารสกัด . กากดิบของโรงงานนี้แตกต่างกับตัวทำละลายที่ใช้ เอ. ฟ้าทะลายโจรกับห้าตัวทำละลายแตกต่างกันและให้ผล 81.20,94.85.79.40, 97.60 121.30 กรัมของกากดิบตามลำดับ โซลูชั่นสินค้ามาตรฐานเตรียมไว้ที่ 1% โดย dissoving สารตกค้างในอะซิโตน จากโซลูชั่นหุ้นนี้ความเข้มข้นต่าง ๆถูกเตรียมและโซลูชั่นเหล่านี้ถูกใช้สำหรับโปรตีน ovicidal ละเอียดและสิ่งมีชีวิต
.
2.3 ทดสอบ mospquitoes ราคาถูก , . และถูกเลี้ยงดูโดยเอ / ในเวกเตอร์ควบคุมห้องปฏิบัติการ ภาควิชาสัตววิทยา annamalai มหาวิทยาลัย ตัวอ่อนที่ถูกดูดเลือดสุนัขขนมขบเคี้ยว และผงยีสต์ใน 3 :1 ratio Adulte were provided with 10% sucrose solution and one week old chick for blood meal. Mosquitoes were held t - 2 C , 70%-85% relative humidty (RH), with a photo period of 14 h light,10 h dark
2.4 Larvicidal bioassay
The laricidal activity of the plant crude extracith was evaluated as per the method recommended by WHO[30].รุ่นที่สามวัย 25 มี thansferred ทิ้งถ้วยเล็กๆ ทดสอบแต่ละที่มี 200 มล. ของน้ำที่เหมาะสมของการ volme เพิ่ม 200 มิลลิลิตร น้ำในถ้วยเพื่อให้ได้เป้าหมายที่ต้องการใช้ยา ( ความเข้มข้นตั้งแต่ 40to 250 ppm ) , staeting ที่มีความเข้มข้นต่ำสุด Six replicate were set up for each concentration and an equal number of control were set up simultaneously using yap water . To this 1ML of appropriate solvent was added . The LC50 value was calculated after 24 h by probit analysis[31].
2.5 Ovicidal activity
For ovicidal activity,slightly modified method of Su and Mulla[32] was performed. The egg raft/eggs of Cx. Quinquefasciatus and Ae.และศึกษาจากห้องปฏิบัติการ การควบคุมเวกเตอร์ annamalai มหาวิทยาลัย สารสกัดจากใบแตกต่างกันเจือจางในตัวทำละลายที่เหมาะสมเพื่อให้บรรลุความเข้มข้นต่าง ๆ ตั้งแต่ 50 ถึง 300 ส่วนในล้านส่วน ไข่ของยุงชนิดนี้ ( 100 NOS ) มีการเปิดรับแต่ละความเข้มข้นของ สารสกัดจากใบจนกว่าพวกเขาจะฟักเป็นหรือตายหลังจากการรักษาไข่แต่ละความเข้มข้นแบบย้ายไปกลั่นฟัก cuqs สำหรับการประเมินหลังจากนับไข่ภายใต้การควบคุม microscoperiate . ประตูราคาประเมิน 48 h โพสต์การรักษาโดยต่อไปนี้สูตร
2.6 การวิเคราะห์ stalistial
มีหนอนตาย sudjected ข้อมูลการวิเคราะห์คำนวณ ) ตัว ,LC90 and other statistics at 95% confidence limits of upper confidence limit and lower using the SPSS12.0 (Statistical Package of Social Sciences) software. Results with P<0.05 were considered to be software. Results with P<0.05 were considered to be statistically significant.
การแปล กรุณารอสักครู่..
