2.2. Seed treatme nt and plant growth
Open-pollinated seeds of Theobroma cacao variety comum (Lower Amazon Amelonado type) were collected
from established plantations at the Almirante Cacau, Inc., farm, Itabuna, Bahia State. Seeds were removed from
the pods and peeled under sterile conditions; surface sterilized by soaking in 1% sodium hypochlorite for 5 min, then in 70% ethanol for 5 min and finally rinsed three times with sterile water. The seeds were air dried for 15 min in a sterile chamber and transferred to petri dishes containing water– agar. After 7 days of incubation at room temperature, when the radicles of the seeds were approximately 2 cm long, 50 ll of spore suspensions of the T. stromaticum isolates was deposited on the radicle of each seed. Control seeds were inoculated with 50 ll of sterile water. Petri dishes containing fungi- and/or bacteria-contaminated seeds were discarded. Bean seeds (variety Contender, Ferry-Morse Seed Co., Fulton, KY) were disinfested, incubated and treated as described for the cacao seeds, except that the incubation period was 4 days. Treated cacao and bean seeds were transferred either to sterile test tubes ( 200 ml) containing approximately 30 ml of 0.5% water–agar (sterile system) or to nonsterile 3-kg-pots filled with a mixture of sand, perlite, and potting soil (1:2:1) (nonsterile system). Pots were kept inside glass boxes and both pots and tubes were maintained under fluorescent light at 25 C in the laboratory. Plants growing in test tubes were not watered nor fertilized while the ones growing in pots were fertilized with 10 ml of Hoagland’s solution every 15 days and water was given as needed. Unless otherwise
indicated, all plants used in this study were grown as described above.
2.2 . เมล็ดพันธุ์และการรักษาแล้ว NT
การเจริญเติบโตของพืชเมล็ดพันธุ์ผสมเปิดของ Theobroma cacao หลากหลาย comum ล่าง ( Amazon amelonado ประเภท ) ถูกเก็บจากสวนที่จัดตั้งขึ้น
Almirante มาเนาส์ , อิงค์ , ฟาร์ม , ตาบูนา Bahia รัฐ เมล็ดออกจากฝักและปอกเปลือก
ภายใต้สภาพปลอดเชื้อ ; ฟอกฆ่าเชื้อ โดยแช่ในสารละลายโซเดียมไฮโปคลอไรท์ 1 % เป็นเวลา 5 นาทีแล้วในเอทานอล 70% เป็นเวลา 5 นาทีและสุดท้ายล้างสามครั้งด้วยน้ำหมัน เมล็ดให้แห้งเป็นเวลา 15 นาทีในห้องปลอดเชื้อและโอนไปยังจานเลี้ยงเชื้อที่มีวุ้นและน้ำ หลังจาก 7 วัน บ่มที่อุณหภูมิห้อง เมื่อ radicles ของเมล็ดประมาณ 2 เซนติเมตร ยาว 50 จะสร้างสปอร์แขวนลอยของ Tstromaticum แยกฝากบนรากของแต่ละเมล็ด เมล็ดพันธุ์ควบคุมเชื้อกับ 50 จะน้ำหมัน จานเลี้ยงเชื้อที่มีเชื้อรา - และ / หรือแบคทีเรียปนเปื้อนเมล็ดทิ้ง เมล็ดถั่ว ( ความหลากหลายคู่แข่ง , เรือข้ามฟากมอร์สเมล็ด Co . , ฟุลตัน , KY ) disinfested บ่มและปฎิบัติตามที่อธิบายไว้ในต้นโกโก้ , เมล็ด ยกเว้นว่า ระยะเวลา 4 วันได้รับเมล็ดโกโก้ถั่วและถูกโอนให้กับหลอดทดลองที่เป็นหมัน ( 200 ml ) ที่มีประมาณ 30 มิลลิลิตร น้ำวุ้น – 0.5% ( ระบบปลอดเชื้อ ) หรือ 3-kg-pots nonsterile เต็มไปด้วยส่วนผสมของทราย perlite และ potting ดิน ( 1:2:1 ) ( ระบบ nonsterile ) กระถางที่ถูกเก็บไว้ภายในกล่องแก้ว ทั้งหม้อ และภายใต้แสงฟลูออเรสเซนต์ หลอดถูกเก็บรักษาไว้ที่ 25 องศาเซลเซียส ในห้องปฏิบัติการพืชที่เติบโตในหลอดทดลองได้รดน้ำหรือไข่ในขณะที่คนที่ปลูกในกระถางได้ผสมกับ 10 ml ของโฮกเลินโซลูชั่นทุก 15 วัน และน้ำได้ตามต้องการ เว้นแต่
พบทั้งหมดพืชที่ใช้ในการศึกษา คือ โต
ตามที่อธิบายไว้ข้างต้น
การแปล กรุณารอสักครู่..