2.3. Chitosanextractionandcharacterization
After the growth of C. elegans, fungal mycelia were harvested by filtration through Whatman filter paper No. 2, dried and weighted. The chitosan extraction was performed according to Tayel et al. [12]. Briefly, fungal mycelia were deproteinized by homogenizing with 1 M NaOH at 90 ◦ C for 2 h. The alkali-insoluble materials were separated by centrifugation (at 4000 × g for 15 min). The precip- itate was repeatedly washed and centrifuged until reaching to a pH of 7 ± 0.2. Residues were then extracted for 6 h at 60 ◦ C using 10% v/v acetic acid on a rotary shaking water bath, then the slurry was recentrifuged, and acid insoluble material was discarded. The supernatant fluids pH was adjusted to pH 9.0 using 4M NaOH solution, then solution was centrifuged and the precipitated chi- tosan was washed with deionized water, 95% ethanol and acetone, respectively, then dried until reaching to a constant weight.
The molecular weight of fungal chitosan was determined by gel permeation chromatography (GPC) with the following specifica- tions:
GPC, a laser light scattering device PN-3000 (15 ◦ C and 90 ◦ C) together with a refractive index detector PN-1000, were from Post- nova analytics, Eresing, Germany. Columns Nucleogel GFC 1000-8, (Macherey-Nagel GmbH & Co. KG, Düren, Germany) as well as Gral 300 by (Polymer Standards Service GmbH, Mainz, Germany).
Standard pullulans (with molecular weight of 11,800, 47,300, 112,000, and 780,000) were used for calibration.
The deacetylation degree of chitosan (DD) was determined according to Niamsa and Baimark [23], from their infra-red spectra
2.3. Chitosanextractionandcharacterizationหลังจากการเติบโตของ C. elegans เชื้อรา mycelia เก็บเกี่ยว โดยการกรองผ่าน Whatman กระดาษกรองหมายเลข 2 แห้ง และถ่วงน้ำหนัก การสกัดไคโตซานได้ดำเนินการตาม Tayel et al. [12] สั้น ๆ mycelia เชื้อราได้ deproteinized โดย homogenizing กับ 1 M NaOH ที่ 90 โรค C สำหรับ 2 ชม วัสดุละลายด่างถูกแยกออก โดยการหมุนเหวี่ยง (ที่ 4000 × g 15 นาที) Precip-itate ล้างซ้ำ ๆ และผลิตภัณฑ์จนกว่าจะถึงการค่า pH 7 ± 0.2 ตกค้างที่ถูกสกัดแล้วสำหรับ 6 h ที่ 60 โรค C ใช้ 10% v/v กรดบนอ่างน้ำสั่นหมุน แล้วละลายคือ recentrifuged และกรดละลายวัสดุถูกละทิ้ง ของเหลว supernatant ที่ปรับปรุงค่า pH ค่า pH 9.0 ใช้โซลูชัน NaOH 4 เมตร แล้วโซลูชันแก้ไขผลิตภัณฑ์และโฮจิมินห์-tosan precipitated ถูกล้าง ด้วยจุ 95% เอทานอล และอะซี โตน ตามลำดับ อบแห้งจนกว่าจะถึงน้ำหนักคงน้ำหนักโมเลกุลของไคโตซานราดโดยเจลซึมผ่าน chromatography (GPC) ด้วยคุณสมบัติที่มีอยู่ทุกระดับต่อไปนี้:GPC อุปกรณ์กระจายแสงเลเซอร์ PN-3000 (โรค 15 C และ 90 โรค C) พร้อมกับจับตัวดรรชนี PN-1000 มาวิเคราะห์หลังโนวา Eresing เยอรมนี คอลัมน์ Nucleogel GFC 1000-8, (Macherey Nagel GmbH & Co. KG, Düren เยอรมนี) รวมทั้งงบ 300 โดย (พอลิเมอร์มาตรฐานบริการ GmbH ไมนซ์ เยอรมนี)มาตรฐาน pullulans (ที่ มีน้ำหนักโมเลกุล 11,800, 47,300, 112,000 และ 780,000) ใช้สำหรับการสอบเทียบระดับ deacetylation ของไคโตซาน (DD) กำหนดตาม Niamsa และ Baimark [23], จากอินฟราเรดสเปกตรัมของพวกเขา
การแปล กรุณารอสักครู่..
2.3 Chitosanextractionandcharacterization
หลังจากการเจริญเติบโตของ C. elegans ที่เส้นใยเชื้อราเก็บเกี่ยวโดยการกรองผ่านกระดาษกรอง Whatman ฉบับที่ 2 แห้งและถ่วงน้ำหนัก การสกัดไคโตซานที่ได้ดำเนินการตาม Tayel et al, [12] สั้น ๆ , เส้นใยเชื้อราได้รับโปรตีนต่ำโดยการผสมยางกับ 1 M NaOH ที่ 90 ◦ C เป็นเวลา 2 ชั่วโมง วัสดุที่ไม่ละลายน้ำด่างที่ถูกแยกจากกันโดยการหมุนเหวี่ยง (4000 ×กรัมเป็นเวลา 15 นาที) itate precip- ถูกล้างซ้ำ ๆ และปั่นจนกว่าจะถึงค่าพีเอช 7 ± 0.2 การตกค้างของสารสกัดจากนั้นเวลา 6 ชั่วโมงที่ 60 ◦ C โดยใช้ 10% v / V กรดอะซิติกในแบบหมุนสั่นอ่างน้ำแล้วสารละลายถูก recentrifuged และกรดวัสดุที่ไม่ละลายน้ำทิ้ง ค่า pH ของเหลวใสปรับค่า pH 9.0 ใช้วิธี 4M NaOH แล้วแก้ปัญหาที่ถูกปั่นและ tosan chi- ตกตะกอนถูกล้างด้วยน้ำกลั่นเอทานอล 95% และอะซีโตนตามลำดับแห้งแล้วจนกว่าจะถึงกับน้ำหนักคงที่.
น้ำหนักโมเลกุล ของไคโตซานเชื้อราถูกกำหนดโดยเจลซึมผ่าน Chromatography (GPC) กับข้อต่อไปนี้กำหนดและ:
GPC เลเซอร์อุปกรณ์การกระเจิงของแสง PN-3000 (15 ◦ C และ 90 ◦ C) ร่วมกับการหักเหของแสงตรวจจับดัชนี PN-1000 มาจาก การวิเคราะห์หลังโนวา Eresing เยอรมนี คอลัมน์ Nucleogel GFC 1000-8 (Macherey-Nagel GmbH & Co. KG, Dürenเยอรมนี) เช่นเดียวกับ Gral 300 (มาตรฐานพอลิเมอ Service GmbH, ไมนซ์เยอรมนี).
pullulans มาตรฐาน (มีน้ำหนักโมเลกุล 11,800, 47,300, 112,000 และ 780,000) ถูกนำมาใช้สำหรับการสอบเทียบ.
ระดับสิกของไคโตซาน (DD) ถูกกำหนดตาม Niamsa และ Baimark [23] จากสเปกตรัมอินฟาเรดของพวกเขา
การแปล กรุณารอสักครู่..
2.3 chitosanextractionandcharacterizationหลังจากการเติบโตของ ถิ่น ราเส้นใยเก็บเกี่ยวโดยกรองผ่านกระดาษกรอง whatman 2 แห้งและหนัก . ไคโตซานสกัดได้ปฏิบัติตาม tayel et al . [ 12 ] สั้น ๆ , เชื้อราเส้นใย deproteinized โดยการเติม 1 M NaOH ที่ 90 ◦ C 2 H , ด่างละลายวัสดุแยกจากกันโดยการเหวี่ยงแยก ( 4 × G 15 นาที ) การ precip - itate ซ้ําถูกล้าง และจนถึงระดับ pH 7 ± 0.2 ดินแยก 6 H ที่ 60 ◦ C ใช้ % v / v กรดบนหมุนสั่นนํ้า 10 แล้ว น้ำก็ recentrifuged และวัสดุที่ไม่ละลายในกรด ถูกทิ้ง ของเหลวที่นำ pH ค่า pH 9.0 ใช้สารละลาย NaOH 4M , โซลูชั่น แล้วมีไฟฟ้าและตกตะกอน ชิ - tosan ถูกล้างด้วยคล้ายเนื้อเยื่อประสานน้ำ 95% เอทานอล และอะซิโตน ตามลำดับ แล้ว แห้งจนถึงน้ำหนักคงที่น้ำหนักโมเลกุลของไคโตซานถูกกำหนดโดยโครมาโตกราฟี ราเจลซึม ( GPC ) ต่อไปนี้ด้วยระบบ - ใช้งาน :GPC , เลเซอร์แสงกระจาย pn-3000 อุปกรณ์ ( 15 ◦องศาเซลเซียสและ 90 ◦ C ) ร่วมกับ pn-1000 ตรวจวัดดัชนีการหักเหของแสง จากกระทู้โนวา - Analytics eresing , เยอรมนี คอลัมน์ nucleogel GFC 1000-8 ( macherey นาเกล GmbH & Co . KG , D üเรน , เยอรมนี ) รวมทั้งประเทศ 300 ( พอลิเมอร์มาตรฐานบริการ GmbH , ไมนซ์ , เยอรมนี )pullulans มาตรฐาน ( ที่มีน้ำหนักโมเลกุล 11800 47300 , 112 , 000 , และ , 780 , 000 ) ที่ใช้สำหรับการสอบเทียบโดย : เลชันของไคโตซาน ( DD ) และถูกกำหนดตาม niamsa baimark [ 23 ] ของอินฟราเรดสเปกตรัม
การแปล กรุณารอสักครู่..