Add 300 µl Buffer AL, close the lid

Add 300 µl Buffer AL, close the lid, and mix by pulse-vortexing for 10 s.
To ensure efficient lysis, it is essential that the sample and Buffer AL are thoroughly
mixed to yield a homogeneous solution.
A white precipitate may form when Buffer AL is added to Buffer ATL. The precipitate
does not interfere with the QIAamp procedure and will dissolve during incubation
in step 6.
Note: If carrier RNA is required (see page 10), add 1 µg dissolved carrier RNA
to 300 µl Buffer AL. Note that carrier RNA does not dissolve in Buffer AL. It must
first be dissolved in Buffer ATE and then added to Buffer AL.
6. Place the tube in the thermomixer or heated orbital incubator, and incubate at 70°C
with shaking at 900 rpm for 10 min.
If using a heating block or water bath, vortex the tube for 10 s every 3 min to
improve lysis.
7. Briefly centrifuge the 1.5 ml tube to remove drops from the inside of the lid.
If solid particles are still visible, centrifuge at 6000 x g (8000 rpm) for 1 min, and
carefully transfer supernatant to a new 1.5 ml microcentrifuge tube (not provided).
8. Add 150 µl ethanol (96–100%), close the lid, and mix thoroughly by pulsevortexing
for 15 s.
To ensure efficient binding in step 10, it is essential that the sample and ethanol
are thoroughly mixed to yield a homogeneous solution.
9. Briefly centrifuge the 1.5 ml tube to remove drops from the inside of the lid.
10. Carefully transfer the supernatant from step 9 to the QIAamp MinElute column (in
a 2 ml collection tube) without wetting the rim.
11. Close the lid, and centrifuge at 6000 x g (8000 rpm) for 1 min. Place the QIAamp
MinElute column in a clean 2 ml collection tube, and discard the collection tube
containing the flow-through.
If the lysate has not completely passed through the membrane after centrifugation,
centrifuge again at a higher speed until the QIAamp MinElute column is empty.
12. Carefully open the QIAamp MinElute column and add 500 µl Buffer AW1 without
wetting the rim. Close the lid and centrifuge at 6000 x g (8000 rpm) for 1 min.
Place the QIAamp MinElute Column in a clean 2 ml collection tube, and discard the
collection tube containing the flow-through.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เพิ่ม 300 µl อัลบัฟเฟอร์ ปิดฝา และผสม โดยชีพจร-vortexing 10 sเพื่อให้มีประสิทธิภาพ lysis เป็นตัวอย่างและอัลบัฟเฟอร์อย่างละเอียดผสมเพื่อให้การแก้ไขปัญหาที่เหมือนกันมีตะกอนสีขาวอาจเป็นเมื่ออัลบัฟเฟอร์เพิ่มบัฟเฟอร์ ATL. ตะกอนไม่สามารถรบกวนกระบวนการ QIAamp และจะละลายไปในระหว่างการบ่มในขั้นตอนที่ 6หมายเหตุ: ถ้าผู้ขนส่ง RNA จะต้อง (ดูหน้า 10), เพิ่ม 1 µg ละลายขนส่ง RNAการ 300 µl บัฟเฟอร์ al.หมายเหตุที่ผู้ขนส่ง RNA ไม่ละลายในบัฟเฟอร์ AL มันต้องแรกจะละลายในบัฟเฟอร์ ATE แล้ว เพิ่มบัฟเฟอร์อัล6. วางท่อใน thermomixer หรือตู้อบวงอุ่น และฟักที่อุณหภูมิ 70° Cด้วยการสั่นที่ 900 rpm 10 นาทีถ้าใช้บล็อกเครื่องทำความร้อนหรือน้ำ อาบน้ำ vortex หลอดสำหรับ 10 s ทุก 3 นาทีถึงปรับปรุงการ lysis7. สั้น ๆ เหวี่ยงหลอด 1.5 มิลลิลิตรเพื่อเอาหยดจากด้านในของฝาถ้าเป็นอนุภาคของแข็งจะยังปรากฏ เครื่องหมุนเหวี่ยงที่ 6000 x กรัม (8000 rpm) 1 นาที และระมัดระวังโอน supernatant ไปหลอดไมโคร 1.5 ml ใหม่ (ไม่ระบุ)8. เพิ่ม 150 µl เอทานอล (96-100%), ปิดฝา และผสมอย่างทั่วถึง โดย pulsevortexing15 sเพื่อให้การผูกมีประสิทธิภาพในขั้นตอนที่ 10 มันเป็นสิ่งสำคัญที่ตัวอย่างและเอทานอลมีแบบให้ผลการแก้ไขปัญหาที่เหมือนกัน9. สั้น ๆ เหวี่ยงหลอด 1.5 มิลลิลิตรเพื่อเอาหยดจากด้านในของฝา10. ระมัดระวังโอน supernatant ที่จากขั้นตอนที่ 9 ไปยังคอลัมน์ QIAamp MinElute (ในเก็บหลอด 2 มล.) โดยไม่ต้องเปียกขอบ11. ปิดฝา และเครื่องหมุนเหวี่ยงที่ 6000 x กรัม (8000 rpm) 1 นาทีสถาน QIAampคอลัมน์ MinElute ในหลอด 2 มล.ทำความสะอาด และทิ้งหลอดเก็บที่ประกอบด้วยการไหลผ่านถ้า lysate ที่ไม่สมบูรณ์ผ่านเมมเบรนหลังจากหมุนเหวี่ยงเครื่องหมุนเหวี่ยงอีกครั้งที่ความเร็วสูงจนกว่าคอลัมน์ QIAamp MinElute ว่างเปล่า12. เปิดคอลัมน์ QIAamp MinElute อย่างระมัดระวัง และเพิ่ม 500 µl AW1 บัฟเฟอร์โดยไม่เปียกริม ปิดฝาและเครื่องหมุนเหวี่ยงที่ 6000 x กรัม (8000 rpm) 1 นาทีวางคอลัมน์ MinElute QIAamp ในหลอดสะอาด 2 มล. และละทิ้งการหลอดเก็บที่ประกอบด้วยการไหลผ่าน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เพิ่ม 300 ไมโครลิตรบัฟเฟอร์ AL, ปิดฝาและผสมโดยชีพจร vortexing เวลา 10 วินาที
เพื่อให้แน่ใจว่าการสลายที่มีประสิทธิภาพเป็นสิ่งจำเป็นที่ตัวอย่างและบัฟเฟอร์ AL กำลังอย่างละเอียด
ผสมเพื่อให้ได้วิธีการแก้ปัญหาที่เป็นเนื้อเดียวกัน
ตะกอนสีขาวอาจเกิดขึ้นเมื่อ AL บัฟเฟอร์จะถูกเพิ่มบัฟเฟอร์ ATL ตะกอน
ไม่ยุ่งเกี่ยวกับขั้นตอนการ QIAamp และจะละลายในช่วงฟักตัว
ในขั้นตอนที่ 6
หมายเหตุ: หากผู้ให้บริการจะต้อง RNA (ดูหน้า 10) เพิ่ม 1 ไมโครกรัมละลายให้บริการ RNA
300 ไมโครลิตรบัฟเฟอร์ AL หมายเหตุ: ผู้ให้บริการที่ RNA ไม่ละลายในบัฟเฟอร์ AL มันจะต้อง
แรกจะละลายในบัฟเฟอร์ ATE แล้วเพิ่มไปยังบัฟเฟอร์ AL
6. สถานหลอดใน thermomixer หรืออุ่นศูนย์บ่มเพาะการโคจรและบ่มเพาะที่ 70 ° C
เขย่าที่ 900 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 10 นาที
หากมีการใช้บล็อกร้อนหรืออ่างน้ำวนหลอดเวลา 10 วินาทีทุก 3 นาทีถึง
ปรับปรุงสลาย
7. สั้น centrifuge หลอด 1.5 มล. เพื่อลบหยดจากด้านในของฝา
ถ้าอนุภาคของแข็งยังคงมองเห็น, การหมุนเหวี่ยงที่ 6000 XG (8000 รอบต่อนาที) เป็นเวลา 1 นาทีและ
ระมัดระวังในการถ่ายโอนใสไปใหม่ 1.5 มล. หลอดไมโคร (ไม่ได้ระบุ)
8. เพิ่ม 150 ไมโครลิตรเอทานอล (96-100%) ปิดฝาและผสมอย่างทั่วถึงโดย pulsevortexing
สำหรับ 15 วินาที
เพื่อให้แน่ใจว่ามีประสิทธิภาพที่มีผลผูกพันในขั้นตอนที่ 10 มันเป็นสิ่งสำคัญที่กลุ่มตัวอย่างและเอทานอล
เป็นอย่างละเอียดผสมเพื่อให้ได้วิธีการแก้ปัญหาที่เป็นเนื้อเดียวกัน
9. สั้น centrifuge หลอด 1.5 มล. เพื่อลบหยดจากด้านในของฝา
10. ระมัดระวังโอนใสจากขั้นตอนที่ 9 ไป QIAamp MinElute คอลัมน์ (ใน
หลอดคอลเลกชัน 2 มิลลิลิตร) โดยไม่เปียกขอบ
11. ปิดฝาและหมุนเหวี่ยงที่ 6000 XG (8000 รอบต่อนาที) เป็นเวลา 1 นาที วาง QIAamp
คอลัมน์ MinElute ในหลอดคอลเลกชัน 2 มิลลิลิตรสะอาดและทิ้งหลอดคอลเลกชัน
ที่มีการไหลผ่าน
หาก lysate ไม่ได้ผ่านสมบูรณ์ผ่านเมมเบรนหลังจากหมุนเหวี่ยง
หมุนเหวี่ยงอีกครั้งด้วยความเร็วสูงจนคอลัมน์ QIAamp MinElute เป็นที่ว่างเปล่า
12. ระมัดระวังเปิดคอลัมน์ QIAamp MinElute และเพิ่ม 500 ไมโครลิตรบัฟเฟอร์ AW1 โดยไม่ต้อง
เปียกขอบ ปิดฝาและหมุนเหวี่ยงที่ 6000 XG (8000 รอบต่อนาที) เป็นเวลา 1 นาที
วางคอลัมน์ QIAamp MinElute ในหลอดคอลเลกชัน 2 มิลลิลิตรสะอาดและทิ้ง
หลอดคอลเลกชันที่มีการไหลผ่าน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เพิ่ม 300 µชั้นบัฟเฟอร์อัล ปิดฝา และ ส่วนชีพจร vortexing เป็นเวลา 10 วินาทีเพื่อให้เกิดประสิทธิภาพในการสลาย มันเป็นสิ่งจำเป็นที่ตัวอย่าง และบัฟเฟอร์อัลเป็นอย่างละเอียดผสมเพื่อผลิตโซลูชั่นที่เป็นเนื้อเดียวกันเป็นตะกอนขาวอาจฟอร์มเมื่อบัฟเฟอร์ลเพิ่มบัฟเฟอร์ ATL . การตกตะกอนไม่ได้เข้าไปยุ่งกับกระบวนการ qiaamp จะละลายและศึกษาในขั้นตอนที่ 6หมายเหตุ : ถ้าต้องการใช้ RNA ( ดู หน้า 10 ) , เพิ่ม 1 µกรัมละลายผู้ให้บริการ .300 µชั้นบัฟเฟอร์อัล โปรดทราบว่าผู้ให้บริการประเภทไม่ละลายในบัฟเฟอร์ที่อัล มันต้องแรกสามารถละลายบัฟเฟอร์ที่กินแล้วเพิ่มบัฟเฟอร์อัล6 . วางท่อใน thermomixer หรือเอโคจรเร่าร้อน และบ่มเพาะที่อุณหภูมิ 70 องศาซีเขย่า ที่ 900 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 10 นาทีถ้าใช้เครื่องบล็อก หรือน้ำที่อาบ วอร์หลอด 10 S ทุก 3 นาทีการปรับปรุงคุณภาพ .7 . สั้น ๆ 1.5 ml หลอด centrifuge เพื่อลบลดลงจากด้านในของฝาถ้าอนุภาคของแข็งยังมองเห็นเครื่อง 6000 x g ( 8000 RPM ) เป็นเวลา 1 นาที และอย่างรอบคอบเพื่อโอนสูงใหม่ 1.5 ml หลอดไมโครเซนตริฟิวจ์ ( ไม่มีให้ )8 . เพิ่ม 150 µลิตรเอทานอล ( 96 ) 100 % ) ปิดฝา และผสมอย่างทั่วถึง โดย pulsevortexingเป็นเวลา 15 วินาทีเพื่อให้เกิดประสิทธิภาพในการในขั้นตอนที่ 10 , มันเป็นสิ่งจำเป็นที่ตัวอย่าง และเอทานอลให้ผสมเพื่อผลิตโซลูชั่นที่เป็นเนื้อเดียวกัน9 . สั้น ๆ 1.5 ml หลอด centrifuge เพื่อลบลดลงจากด้านในของฝา10 . อย่างระมัดระวังโอนสูงจากขั้นตอนที่ 9 กับ qiaamp minelute ( ในคอลัมน์2 ml ชุดหลอด ) ยังไม่พ้นขอบ11 . ปิดฝาและเครื่อง 6000 x g ( 8000 RPM ) เป็นเวลา 1 นาที สถานที่ qiaampminelute คอลัมน์ในสะอาด 2 ml ชุดหลอด และหลอดเก็บทิ้งที่มี flow-through .ถ้า lysate ไม่ได้มีแผ่นหลังการปั่นเหวี่ยงผ่าน ,เครื่องหมุนเหวี่ยงอีกทีที่ความเร็วสูงจน qiaamp minelute คอลัมน์ที่ว่างเปล่า12 . อย่างเปิด qiaamp minelute คอลัมน์และเพิ่ม 500 µ L aw1 โดยไม่ต้องบัฟเฟอร์น้ำขอบ ปิดฝาและเครื่อง 6000 x g ( 8000 RPM ) เป็นเวลา 1 นาทีสถานที่ qiaamp minelute คอลัมน์ในสะอาด 2 ml ชุดหลอด และทิ้งหลอดคอลเลกชันที่มี flow-through .