Proliferation of hADSCs in the scaf

Proliferation of hADSCs in the scaffold
Cell viability and proliferation during 14 days of culture in the
scaffolds were determined by MTT [3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-
2,5-diphenyl tetrazolium bromide] assay. The scaffolds seeded with
cells were carefully transferred into new 24-well plate and 1 ml
of fresh culture medium was added. After adding 100 l of MTT
solution (5 mg/ml in Dulbecco’s PBS) to each well, the scaffolds
were incubated for 3 h at 37 ◦C in a 5% CO2 incubator. In order to
quantitatively determine the cell proliferation, the MTT formazan
crystals were dissolved with 1.0 ml of DMSO. Plates were shaken
for 20 min, and then 100 l of each solution was transferred to a
96-well plate. Absorbance was read at 490 nm using the EMax precision
microplate reader (Molecular Devices, Sunnyvale, CA, USA).
Scaffold without cells was used as the control group. At least three
scaffolds were analyzed for each condition and at each time point.
Cell proliferation during the culture in the scaffolds was
also determined by DNA quantification. After 1, 7 and 14 days
of culture, each sample was harvested to quantify the total
amount of DNA. Total DNA content and purity were determined
spectrophotometrically at a wavelength of 280 nm using a
NanoDrop spectrophotometer

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ของ hADSCs ในการนั่งร้านชีวิตและการแพร่หลายในระหว่างวันที่ 14 ของวัฒนธรรมในเซลล์scaffolds ถูกกำหนด โดย MTT [3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-ฟีนิลได tetrazolium โบรไมด์] วิเคราะห์ Scaffolds seeded ด้วยเซลล์ได้อย่างซื้อใหม่ดี 24 แผ่นและ 1 mlของสดกลางวัฒนธรรมมีเพิ่ม หลังจากเพิ่ม l 100 ของ MTTแก้ไข (5 mg/ml ใน PBS ของดุลเบกโก) แต่ละดี scaffoldsมี incubated สำหรับ h 3 ที่ 37 ◦C ใน incubator 5% CO2 ในอันที่จะกำหนดขยายเซลล์ MTT formazan quantitativelyผลึกมีส่วนยุบกับ 1.0 ml ของ DMSO แผ่นถูกเขย่าสำหรับ 20 นาที และ l 100 ของแต่ละถูกโอนย้ายไปแผ่น 96-ดี Absorbance มีอ่านที่ 490 nm ใช้ความแม่นยำ EMaxmicroplate reader (อุปกรณ์โมเลกุล Sunnyvale, CA, USA)นั่งร้าน โดยเซลล์ที่ใช้เป็นกลุ่มควบคุม อย่างน้อยสามscaffolds ถูกวิเคราะห์ สำหรับแต่ละเงื่อนไข และจุดแต่ละครั้งขยายเซลล์ระหว่างวัฒนธรรมใน scaffolds ถูกยัง ถูกกำหนด โดยดีเอ็นเอนับ หลังจากวันที่ 1, 7 และ 14วัฒนธรรม แต่ละตัวอย่างถูกเก็บเกี่ยวเพื่อกำหนดปริมาณรวมจำนวนดีเอ็นเอ กำหนดเนื้อหาดีเอ็นเอทั้งหมดและความบริสุทธิ์spectrophotometrically ที่ความยาวคลื่น 280 nm ใช้เป็นเครื่องทดสอบกรดด่าง NanoDrop

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การแพร่กระจายของ hADSCs
ในนั่งร้านมีชีวิตเซลล์และการขยายในช่วง14
วันของวัฒนธรรมในโครงถูกกำหนดโดยMTT [3 (4,5-dimethylthiazol-2-YL) -
2,5-diphenyl tetrazolium โบรไมด์] ทดสอบ โครงเมล็ดกับเซลล์ถูกย้ายอย่างระมัดระวังลงในแผ่น 24 หลุมใหม่และ 1 มิลลิลิตรของกลางวัฒนธรรมสดถูกบันทึก หลังจากเพิ่ม 100 ลิตร MTT การแก้ปัญหา (5 mg / ml ใน Dulbecco พีบีเอส) เพื่อละกันที่โครงถูกบ่มเป็นเวลา3 ชั่วโมง 37 ◦Cในศูนย์บ่มเพาะ CO2 5% เพื่อให้ปริมาณตรวจสอบการเพิ่มจำนวนเซลล์ที่ MTT formazan ผลึกละลาย 1.0 มิลลิลิตร DMSO แผ่นถูกเขย่าเป็นเวลา 20 นาทีแล้ว 100 ลิตรของแต่ละวิธีการแก้ปัญหาที่ถูกย้ายไปยังแผ่น96 หลุม การดูดกลืนแสงได้อ่านที่ 490 นาโนเมตรโดยใช้ความแม่นยำ Emax อ่าน microplate (โมเลกุลอุปกรณ์ซันนีเวล, CA, USA). นั่งร้านเซลล์โดยไม่ต้องถูกใช้เป็นกลุ่มควบคุม อย่างน้อยสามโครงวิเคราะห์สำหรับแต่ละสภาพและจุดแต่ละครั้ง. การแพร่กระจายของเซลล์ในระหว่างวัฒนธรรมในโครงที่ถูกกำหนดโดยปริมาณดีเอ็นเอ หลังวันที่ 1, 7 และ 14 วันของวัฒนธรรมแต่ละตัวอย่างเก็บเกี่ยวที่จะหาจำนวนรวมปริมาณของดีเอ็นเอ ปริมาณดีเอ็นเอรวมและความบริสุทธิ์ได้รับการพิจารณาspectrophotometrically ที่ความยาวคลื่น 280 นาโนเมตรของโดยใช้spectrophotometer NanoDrop

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การ hadscs ในนั่งร้าน
เซลล์และการแบ่งตัวในช่วง 14 วัน ของวัฒนธรรมใน
นั่งร้านถูกกำหนดโดย MTT [ 3 - ( 4,5-dimethylthiazol-2-yl ) -
2,5-diphenyl tetrazolium โบรไมด์ ] ตามลำดับ โครง seeded กับ
cells อย่างระมัดระวังโอนเข้าใหม่ 24 ดีจาน 1 ml
อาหารเลี้ยงเชื้อใหม่ถูกเพิ่มเข้ามา หลังจากเพิ่ม 100  MTT
l ของโซลูชั่น ( 5 mg / ml ในดัลเบโค่ของ PBS ) แต่ละดี นั่งร้าน
ถูกบ่มที่ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 3 ชั่วโมงในตู้อบ◦คาร์บอนไดออกไซด์ 5 เปอร์เซ็นต์ เพื่อใช้ตรวจสอบเซลล์ proliferation

รัตนากร , MTT ปฏิบัติการละลายกับ 1.0 มล. DMSO . แผ่นสั่นสะเทือน
20 นาที และ 100  L ของแต่ละโซลูชั่นถูกส่งไป
96 ครับจานการดูดกลืนแสงก็อ่านที่ 490 nm ใช้ emax ความแม่นยำ
อ่านพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทย ( อุปกรณ์โมเลกุล , Sunnyvale , CA , USA ) .
นั่งร้านไม่มีเซลล์ที่ใช้ในกลุ่มควบคุม อย่างน้อยสาม
นั่งร้านวิเคราะห์แต่ละภาพในแต่ละจุดเวลา
เซลล์วัฒนธรรมในการสื่อสารระหว่างนั่งร้านถูก
ถูกกําหนดโดยปริมาณดีเอ็นเอ หลังจาก 1 , 7 และ 14 วัน
กระทรวงวัฒนธรรมแต่ละตัวอย่างถูกเก็บเกี่ยวที่มียอดรวม
ของดีเอ็นเอ ปริมาณดีเอ็นเอทั้งหมดและความบริสุทธิ์เป็น
นี้ที่ความยาวคลื่น 280 nm ใช้
nanodrop เตอร์