The biochemical tests used for bact

The biochemical tests used for bacterial identification
and enumeration in classical culture methods are
generally based on metabolic reactions. For this reason,
they are not fully specific, and many additional
tests are sometimes required to obtain precise confirmation.
The use of microbial enzyme profiles to detect
indicator bacteria is an attractive alternative to classical
methods. Enzymatic reactions can be group-, genus- or
species-specific, depending on the enzyme targeted.
Moreover, reactions are rapid and sensitive. Thus, the
possibility of detecting and enumerating coliforms
through specific enzymatic activities has been under
investigation for many years now.
b-D-glucuronidase is an enzyme which catalyzes
the hydrolysis of b-D-glucopyranosiduronic derivatives
into their corresponding aglycons and D-glucuronic
acid. Although this bacterial enzyme was discovered first in E. coli, its relative specificity for
identifying this microorganism was not apparent until
Kilian and Bulow (1976) surveyed the Enterobacteriaceae
and reported that glucuronidase activity was
mostly limited to E. coli. The prevalence of this
enzyme and its utility in the detection of E. coli in
water were later reviewed by Hartman (1989). b-Dglucuronidase-
positive reactions were observed in
94–96% of the E. coli isolates tested (Kilian and
Bulow, 1976; Feng and Hartman, 1982; Edberg and
Kontnick, 1986; Kaspar et al., 1987), while Chang et
al. (1989) found a higher proportion of b-D-glucuronidase-
negative E. coli (a median of 15% from E. coli
isolated from human fecal samples). In contrast, b-Dglucuronidase
activity is less common in other Enterobacteriaceae
genus, such as Shigella (44 to 58%),
Salmonella (20 to 29%) and Yersinia strains and in
Flavobacteria (Kilian and Bulow, 1976; Massanti et
al., 1981; Feng and Hartman, 1982; Frampton and
Restaino, 1993). b-D-galactosidase, catalyzes the
breakdown of lactose into galactose and glucose and
has been used mostly for enumerating the coliform
group within the Enterobacteriaceae family. The use
of the b-D-glucuronidase and b-D-galactosidase activities
for the detection and enumeration of E. coli and
TC, respectively, are reviewed here.
Chromogenic and fluorogenic substrates produce
color and fluorescence, respectively upon cleavage by
a specific enzyme. These substrates have been used to
detect the presence or the activity of specific enzymes
in aquatic systems (Chro¨ st, 1991). Several authors
have reviewed fluorogenic and chromogenic substrates
used for bacterial diagnostics (Bascomb,
1987; Manafi et al., 1991). They noted that the use
of these substrates has led to improved accuracy and
faster detection. Methods for detection or enumeration
may be performed in a single medium, thus bypassing
the need for a time-consuming isolation
procedure prior to identification. To detect the presence
of b-D-glucuronidase in E. coli, the following
chromogenic substrates were used: indoxyl-b-D-glucuronide
(IBDG) (Brenner et al., 1993), the phenolphthalein-
mono-b-D-glucuronide complex (Bu¨ tle and
Reuter, 1989) and 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-b-Dglucuronide
(X-Glu) (Watkins et al., 1988). Most
frequently, the fluorogenic substrate 4-methylumbelliferyl-
b-D-glucuronide (MUGlu) was used (Dahlen and
Linde, 1973; Feng and Hartman, 1982). Chromogenic substrates such as o-nitrophenyl-b-D-galactopyranoside
(ONPG), p-nitrophenyl-b-D-galactopyranoside
(PNPG), 6-bromo-2-naphtyl-b-D-galactopyranoside
(Bu¨rger, 1967) and 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-b-Dgalactopyranoside
(X-Gal) (Ley et al., 1993) were
used to detect the presence of b-D-galactosidase produced
by coliforms, as well as the fluorogenic substrate
4-methylumbelliferyl-b-D-galactopyranoside
(MUGal).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การทดสอบชีวเคมีที่ใช้สำหรับการระบุเชื้อแบคทีเรียและแจงนับในวิธีวัฒนธรรมคลาสสิกโดยทั่วไปตามปฏิกิริยาเผาผลาญ ด้วยเหตุนี้พวกเขาจะไม่เต็มเฉพาะ และหลายเพิ่มเติมบางครั้งการทดสอบจะต้องได้รับการยืนยันชัดเจนการใช้จุลินทรีย์เอนไซม์โพรไฟล์เพื่อตรวจสอบแบคทีเรียตัวบ่งชี้จะเป็นทางเลือกที่สวยงามคลาสสิกวิธี สามารถตอบสนองต่อเอนไซม์ในระบบกลุ่ม- สกุล หรือspecies-specific ขึ้นอยู่กับเอนไซม์เป้าหมายนอกจากนี้ ปฏิกิริยาได้อย่างรวดเร็ว และที่สำคัญ ดังนั้น การสามารถตรวจจับ และกำจัดการแจงนับโดยเฉพาะกิจกรรมเอนไซม์ในระบบได้ภายใต้ตรวจสอบเป็นเวลาหลายปีb-D-glucuronidase เป็นเอนไซม์ที่สามารถ catalyzesไฮโตรไลซ์ของอนุพันธ์ b-D-glucopyranosiduronicความสอดคล้อง aglycons และ D-glucuronicกรด แม้ว่าเอนไซม์นี้แบคทีเรียถูกค้นพบครั้งแรกใน E. coli, specificity ความสัมพันธ์สำหรับระบุนี้ยังไม่ชัดเจนจนสถาปัตยกรรมและ Bulow (1976) Enterobacteriaceae ที่สำรวจและรายงานกิจกรรม glucuronidase ไม่ส่วนใหญ่จำกัด E. coli ความชุกของเอนไซม์และเป็นโปรแกรมอรรถประโยชน์ในการตรวจพบ E. coli ในน้ำได้ในภายหลังได้รับการตรวจทาน โดย Hartman (1989) b-Dglucuronidase -ปฏิกิริยาบวกสุภัค94-96% ของ E. coli ที่แยกได้ทดสอบ (สถาปัตยกรรม และBulow, 1976 เฟิงและ Hartman, 1982 Edberg และKontnick, 1986 Kaspar et al., 1987), ในขณะที่ช้างร้อยเอ็ดal. (1989) พบสัดส่วนสูงของ b-D-glucuronidase -ลบ E. coli (เป็นค่ามัธยฐานของ 15% จาก E. coliแยกต่างหากจากตัวอย่าง fecal มนุษย์) ในทางตรงกันข้าม Dglucuronidase บีกิจกรรมเป็นน้อยใน Enterobacteriaceae อื่น ๆสกุล เช่น Shigella (44-58%),สาย (20-29%) และสายพันธุ์ Yersinia และในFlavobacteria (สถาปัตยกรรมและ Bulow, 1976 Massanti ร้อยเอ็ดal., 1981 เฟิงและ Hartman, 1982 Frampton และRestaino, 1993) b-D-galactosidase, catalyzesแบ่งย่อยแลคโตสเป็นกลูโคสและกาแล็กโทส และใช้สำหรับการตรวจโคลิฟอร์มส่วนใหญ่กลุ่มภายในครอบครัว Enterobacteriaceae การใช้งานกิจกรรม b-D-glucuronidase และ b-D-galactosidaseตรวจสอบและการแจงนับของ E. coli และTC ตามลำดับ เป็นทานที่นี่ผลิตได้ Chromogenic และ fluorogenicสีและ fluorescence ตามแนวแตกเรียบตามลำดับเอนไซม์ที่เฉพาะเจาะจง มีการใช้พื้นผิวเหล่านี้ตรวจสอบสถานะหรือกิจกรรมของเอนไซม์เฉพาะในระบบน้ำ (Chro¨ st, 1991) ผู้เขียนหลายได้ตรวจทาน fluorogenic และ chromogenic ได้ใช้สำหรับการวินิจฉัยแบคทีเรีย (Bascomb1987 Manafi et al., 1991) พวกเขาตั้งข้อสังเกตที่ใช้ของพื้นผิวเหล่านี้ได้นำไปปรับปรุงความถูกต้อง และตรวจเร็วขึ้น วิธีการตรวจสอบหรือการแจงนับอาจดำเนินการในสื่อเดียว จึง เลี่ยงต้องแยกเวลาขั้นตอนก่อนที่จะระบุ การตรวจหาของ b-D-glucuronidase ใน E. coli ต่อไปนี้ใช้พื้นผิว chromogenic: indoxyl-b-D-glucuronide(IBDG) (Brenner et al., 1993), phenolphthalein -ขาวดำ-b-D-glucuronide คอมเพล็กซ์ (Bu¨ tle และReuter, 1989) และ 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-b-Dglucuronide(X-Glu) (เอมส์มิชชั้น et al., 1988) มากที่สุดบ่อย fluorogenic พื้นผิว 4-methylumbelliferyl -ใช้ b-D-glucuronide (MUGlu) (Dahlen และLinde, 1973 เฟิงและ Hartman, 1982) Chromogenic พื้นผิวเช่น o-nitrophenyl-b-D-galactopyranoside(ONPG), p-nitrophenyl-b-D-galactopyranoside(PNPG), 6-bromo-2-naphtyl-b-D-galactopyranoside(Bu¨rger, 1967) และ 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-b-Dgalactopyranoside(X-Gal) (Ley et al., 1993) ได้ใช้ตรวจหา b-D-galactosidase ผลิตโดยกำจัด ตลอดจนพื้นผิว fluorogenic4-methylumbelliferyl-b-D-galactopyranoside(MUGal)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การทดสอบทางชีวเคมีที่ใช้สำหรับการระบุเชื้อแบคทีเรียและการแจงนับในวิธีการวัฒนธรรมคลาสสิกจะขึ้นอยู่ทั่วไปในปฏิกิริยาการเผาผลาญอาหาร ด้วยเหตุนี้พวกเขาจะไม่ได้เฉพาะเจาะจงอย่างเต็มที่และอีกมากมายการทดสอบจะต้องบางครั้งที่จะได้รับการยืนยันการได้อย่างแม่นยำ. การใช้รูปแบบการทำงานของเอนไซม์จุลินทรีย์เพื่อตรวจหาเชื้อแบคทีเรียตัวบ่งชี้เป็นทางเลือกที่น่าสนใจให้กับคลาสสิกวิธีการ ปฏิกิริยาเอนไซม์สามารถ Group-, genus- หรือสายพันธุ์ที่เฉพาะเจาะจงขึ้นอยู่กับเอนไซม์เป้าหมาย. นอกจากนี้ยังมีปฏิกิริยาอย่างรวดเร็วและมีความสำคัญ ดังนั้นเป็นไปได้ของการตรวจสอบและแจงโคลิฟอร์มผ่านกิจกรรมของเอนไซม์ที่เฉพาะเจาะจงได้รับภายใต้การตรวจสอบหลายปีแล้ว. BD-glucuronidase เป็นเอนไซม์ที่กระตุ้นการย่อยสลายของสัญญาซื้อขายล่วงหน้าBD-glucopyranosiduronic เข้า aglycons ที่สอดคล้องกันของพวกเขาและ D-glucuronic กรด แม้ว่าเอนไซม์ของแบคทีเรียนี้ถูกค้นพบครั้งแรกในเชื้อ E. coli จำเพาะญาติสำหรับการระบุจุลินทรีย์นี้ไม่ชัดเจนจนกว่าKilian และ Bulow (1976) สำรวจ Enterobacteriaceae และรายงานกิจกรรม glucuronidase ที่ได้รับส่วนใหญ่จำกัด ให้เชื้อ E. coli ความชุกของนี้เอนไซม์และยูทิลิตี้ในการตรวจสอบของเชื้อ E. coli ในน้ำการตรวจสอบในภายหลังโดยฮาร์ทแมน(1989) B-Dglucuronidase- ปฏิกิริยาบวกพบใน94-96% ของแยกเชื้อ E. coli การทดสอบ (Kilian และBulow 1976; ฮและฮาร์ทแมน, 1982; เอ็ดเบิร์กและKontnick 1986. คาสปาร์ et al, 1987) ในขณะที่ช้างและอัล (1989) พบว่ามีสัดส่วนที่สูงขึ้นของ BD-glucuronidase- เชิงลบเชื้อ E. coli (เฉลี่ย 15% จากเชื้อ E. coli ที่แยกได้จากตัวอย่างอุจจาระมนุษย์) ในทางตรงกันข้ามข Dglucuronidase กิจกรรมร่วมกันน้อยลงอื่น ๆ Enterobacteriaceae ประเภทเช่น Shigella (44-58%) Salmonella (20-29%) และสายพันธุ์ Yersinia และFlavobacteria (Kilian และ Bulow 1976; Massanti et al,. 1981; ฮและฮาร์ทแมน, 1982; Frampton และRestaino, 1993) BD-galactosidase, กระตุ้นการสลายของแลคโตสลงในกาแลคโตและกลูโคสและถูกนำมาใช้ส่วนใหญ่แจงโคลิฟอร์มกลุ่มภายในครอบครัวEnterobacteriaceae การใช้งานของ BD-glucuronidase และกิจกรรม BD-galactosidase สำหรับการตรวจสอบและการแจงนับของเชื้อ E. coli และTC ตามลำดับจะมีการทบทวนที่นี่. สีและให้พื้นผิวการแจงการผลิตสีและการเรืองแสงตามลำดับเมื่อความแตกแยกโดยเอนไซม์ที่เฉพาะเจาะจง พื้นผิวเหล่านี้ได้ถูกนำมาใช้เพื่อตรวจสอบสถานะหรือกิจกรรมของเอนไซม์ที่เฉพาะเจาะจงในระบบน้ำ(CHRO เซนต์, 1991) นักเขียนหลายคนได้ตรวจสอบพื้นผิวและการแจง chromogenic ใช้สำหรับการวินิจฉัยแบคทีเรีย (Bascomb, 1987. Manafi, et al, 1991) พวกเขาตั้งข้อสังเกตว่าการใช้งานของพื้นผิวเหล่านี้ได้นำไปสู่ความถูกต้องที่ดีขึ้นและการตรวจสอบได้เร็วขึ้น วิธีการสำหรับการตรวจสอบการแจงนับอาจจะดำเนินการในกลางเดียวจึงผ่านความจำเป็นในการแยกใช้เวลานานขั้นตอนก่อนที่จะมีการระบุ เพื่อตรวจสอบสถานะของ BD-glucuronidase ในเชื้อ E. coli ต่อไปนี้พื้นผิวที่ถูกนำมาใช้chromogenic: indoxyl-BD-glucuronide (. เบรนเนอร์, et al, 1993) (IBDG) ที่ phenolphthalein- เดียว BD-glucuronide ซับซ้อน (TLE BU และรอยเตอร์, 1989) และ 5 โบรโม-4-chloro-3-indolyl-B-Dglucuronide (X-Glu) (วัตคินส์ et al., 1988) ส่วนใหญ่มักจะให้การแจงพื้นผิว 4 methylumbelliferyl- BD-glucuronide (MUGlu) ถูกนำมาใช้ (Dahlen และLinde, 1973; ฮและฮาร์ทแมน, 1982) พื้นผิวให้สีเช่น o-Nitrophenyl-BD-galactopyranoside (ONPG), p-Nitrophenyl-BD-galactopyranoside (PNPG) 6-Bromo-2-naphtyl-BD-galactopyranoside (เบอร์เกอร์, 1967) และ 5 โบรโม-4 -chloro-3-indolyl-B-Dgalactopyranoside (X-Gal) (เล et al., 1993) ถูกนำมาใช้เพื่อตรวจสอบสถานะของBD-galactosidase ที่ผลิตโดยโคลิฟอร์มเช่นเดียวกับพื้นผิวการแจง4 Methylumbelliferyl-BD-galactopyranoside (MUGal)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การทดสอบทางชีวเคมีและการใช้แบคทีเรียในการ

เลี้ยงแบบคลาสสิก เป็นโดยทั่วไปขึ้นอยู่กับปฏิกิริยาเผาผลาญ ด้วยเหตุนี้
พวกเขาจะไม่เฉพาะอย่างเต็มที่ และการทดสอบเพิ่มเติม
มากบางครั้งต้องได้รับการยืนยันที่ชัดเจน การใช้เอนไซม์จากจุลินทรีย์โปรไฟล์

ตัวบ่งชี้เพื่อตรวจหาแบคทีเรีย เป็นทางเลือกที่น่าสนใจวิธีการคลาสสิก

ปฏิกิริยาของเอนไซม์สามารถกลุ่ม - สกุล -
เผ่าพันธุ์ - เฉพาะขึ้นอยู่กับเอนไซม์เป้าหมาย
นอกจากนี้ ปฏิกิริยาอย่างรวดเร็ว และที่สําคัญ ดังนั้น ความเป็นไปได้ของการตรวจหาปริมาณโคลิฟอร์ม และ enumerating

ผ่านกิจกรรมเอนไซม์ที่เฉพาะเจาะจงได้รับภายใต้การสอบสวนเป็นเวลาหลายปีตอนนี้
.
b-d-glucuronidase เป็นเอนไซม์ที่กระตุ้นการย่อยสลายของ b-d-glucopyranosiduronic อนุพันธ์

เป็น aglycons ที่สอดคล้องกันของพวกเขาและ d-glucuronic
กรด แม้ว่าเอนไซม์ที่แบคทีเรียนี้ถูกค้นพบครั้งแรกใน E . coli , อู่ของญาติ
ระบุจุลินทรีย์นี้ไม่ได้ปรากฏจนกระทั่ง
เลี่ยน และ บูโลว์ ( 1976 ) สำรวจและรายงานว่า กิจกรรมที่มีอวัยวะผิดเพี้ยน

ส่วนใหญ่ จำกัด คือ เชื้อ อีโคไล ความชุกของโรคนี้
เอนไซม์และยูทิลิตี้ในการตรวจหาเชื้อ E . coli ในน้ำภายหลัง
สุดท้ายโดยฮาร์ทแมน ( 1989 ) b-dglucuronidase -
บวกปฏิกิริยาที่พบใน
94 - 96 ของ E . coli สายพันธุ์ทดสอบ ( เลี่ยนและ
บูโลว์ , 1976 ; ฟงกับฮาร์ทแมน , 1982 ; เอดเบิร์กและ
kontnick , 1986 ; แคสเปอร์ et al . , 1987 ) ในขณะที่ชาง et
อัล ( 1989 ) พบว่าสัดส่วนที่สูงของ b-d-glucuronidase -
ลบ .โคไล ( ค่ามัธยฐานของ 15 % จาก E . coli ที่แยกได้จากตัวอย่างอุจจาระมนุษย์
) ในทางตรงกันข้าม กิจกรรม b-dglucuronidase
โดยทั่วไปน้อยกว่าในจีนัสผิดเพี้ยน
อื่น ๆเช่น ชิเกลลา ( 44 ถึง 58 เปอร์เซ็นต์ ) ,
Salmonella ( 20 ถึง 30 % ) และ เยอซิเนีย สายพันธุ์ และใน flavobacteria
( เลี่ยน และ บูโลว์ , 1976 ; massanti et
al . , 1981 ; ฟงกับฮาร์ทแมน , 1982 ;
แฟรมตั้นและ restaino , 1993 ) b-d-galactosidase และ
แลคโตส กาแลกโตสและกลูโคสเข้าสลายและถูกใช้ส่วนใหญ่สำหรับ

enumerating กลุ่มโคลิฟอร์มภายในครอบครัวผิดเพี้ยน . ใช้ของ b-d-glucuronidase และกิจกรรม b-d-galactosidase

สำหรับการตรวจจับและการแจงนับของ E . coli และ
TC , ตามลำดับ , ดูที่นี่ fluorogenic พื้นผิวผลิต

การสนทนาผ่านข้อความโต้ตอบแบบทันที และสีและเรืองแสงบนแนวแตกเรียบโดย
ตามลำดับเป็นเอนไซม์ที่เฉพาะเจาะจง พื้นผิวเหล่านี้จะถูกใช้เพื่อ
ตรวจสอบสถานะหรือกิจกรรมของเอนไซม์ที่เฉพาะเจาะจงในระบบน้ำ
( โครตั้ง St , 1991 ) ผู้เขียนหลาย

fluorogenic ตรวจทานและพื้นผิวที่ใช้สำหรับการสนทนาผ่านข้อความโต้ตอบแบบทันทีของการวินิจฉัย ( bascomb
, 1987 ; มานาฟี่ et al . , 1991 ) พวกเขาตั้งข้อสังเกตว่า การใช้วัสดุเหล่านี้ได้นำไปสู่

ตรวจสอบความถูกต้องดีขึ้นและเร็วขึ้น