2. Methods2.1. MaterialsCorn stover

2. Methods
2.1. Materials

Corn stover was harvested from Lianyungang of Jiangsu province in China. After air-dried and crushed at Biochemistry Institute of Nanjing Forestry University, the corn stover was sieved to achieve the fraction between 20 and 80 mesh for avoiding the interference because of ash. The prepared biomass was stored at room temperature until use. Two commercial enzyme solutions, Celluclast 1.5 L (Cat C2730) and Novozyme 188 (Cat C6105) from Sigma–Aldrich were used for enzymatic hydrolysis. Sulfur dioxide solution (ACS reagent, ⩾6%) was purchased from Sigma–Aldrich. Anhydrous sodium sulfite and magnesium chloride were purchased from Nanjing Chemical Reagent Co., LTD.

2.2. Magnesium bisulfite solution preparation

Magnesium bisulfite solution was prepared by mixing solid magnesium sulfite with sulfur dioxide solution in a mole ratio of 1:1 (pH approximately 5.2). The mixture was stirred until insoluble magnesium sulfite particle disappeared. The above mentioned solid magnesium sulfite was prepared by mixing sodium sulfite with magnesium chloride in a mole ratio of 1:1. And then, the residual soluble reactants were eluted three times with water. Afterward, magnesium sulfite was dried by lyophilization.

2.3. Microorganism and cultivation

Saccharomyces cerevisiae AQ was provided by Anqi Company, China, and grown at the medium for inoculation contained (g/L): glucose, 20; peptone, 20; yeast extract, 10 at natural pH (YPD). The seed culture was prepared as follows: a loop of cells from the fully grown slant was inoculated into 100 ml of the above medium in 250 ml Erlenmeyer flasks and incubated for 24 h at 30 °C with 150 rpm. Then, the seed cells were harvested, washed and inoculated into Erlenmeyer flasks or bioreactors for ethanol production.

2.4. Pretreatment

This laboratory scale pretreatment was carried out in an electrically heated oil bath. A total of 3 g of biomass sample and 18 mL pretreated solution was placed in a 30 mL sealed stainless steel tank at a solid/liquid ratio of 1:6 (w/v) for pretreatment. In pretreatment process, magnesium bisulfite dose, pretreatment temperature and pretreatment time have been optimized respectively for investigating their effects. After pretreatment, the reactor was immediately cooled down in a water bath. The pretreated substrate was collected by filtration, washed with warm water for at least three times and stored at 4 °C. Solid loss was determined from the measure wet weight and moisture content of the solid. The spent liquor was stored in −20 °C for further analysis. All the experiments were carried out in two replicates.

2.5. Enzymatic hydrolysis

Enzymatic hydrolysis was performed at 3% cellulose in 30 mL citrate buffer (pH 4.8, 50 mM), at 50 °C and 150 rpm on a shaker incubator for 48 h. A mixture of Celluclast 1.5 L at 15 FPU/g cellulose and Novozyme 188 at 30 CBU/g cellulose was used for enzymatic hydrolysis. After hydrolysis, the samples were withdrawn and centrifuged to remove the insoluble materials. The supernatants were subsequently filtered through a 0.22 μm syringe filter (Millipore, Co., LTD) and used for subsequent HPLC analysis. All experiments were performed in replicates and each data point was the average of two replicates.

2.6. Fermentation

Fermentation was carried out in 250 mL Erlenmeyer flask at 30 °C and 150 rpm for 24 h with 50 mL of enzymatic hydrolysate adding 6 g/L yeast extract, 10 g/L peptone, 5 g/L (NH4)2SO4, 10 g/L KH2PO4, 0.5 g/L MgSO4⋅7H2O and 0.15 g/L CaCl2⋅H2O. Each flask was equipped with a needle-pierced silicone stopper to allow removal of the produced CO2 during fermentation. The initial yeast inoculum was OD 10 (600 nm) and initial pH was controlled in 4.8. At the end of fermentation, samples of the broth were centrifuged at 5000g for 10 min for sugar and ethanol analysis. Reported data is the average of duplicates.

2.7. Analytical methods

The chemical compositions of the original and pretreated corn stover were determined according to the National Renewable Energy Laboratory (NREL, Golden) analytical methods for biomass (Sluiter et al., 2011). The free fermentable sugars (glucose, cellobiose, and xylose), several known inhibitors (formic acid, acetic acid, levulinic acid, furfural, 5-hydroxymethylfurfural (HMF)) and ethanol were directly quantified using a HPLC system (1200 series, Agilent) equipped with a Bio-Rad Aminex HPX-87H column (300 × 7.8 mm). 5 mM H2SO4 as mobile phase was controlled at a flow rate of 0.6 mL/min at 55 °C, analysis signal was detected by a refractive index detector (Ouyang et al., 2013). As for the analysis of xylooligosaccharide (XOS), 1 mL sample was mixed with 1 mL of 5 N H2SO4 and hydrolyzed at 120 °C for 45 min to convert XOS to their constitutive monomers and analyzed by HPLC to quantify the total amount of XOS (Nabarlatz et al., 2007).

The removal of each composition (%) was calculated according to the following equation:

equation(1)
View the MathML source
Turn MathJax on

where mini was the mass of composition (cellulose, hemicellulose or lignin) in raw material; mtre was the mass of composition (cellulose, hemicellulose or lignin) in pretreated material. The units of measurement were g.
The cellulose hydrolysis yield was calculated according to the following equation:

equation(2)
View the MathML source
Turn MathJax on

where Cglu was the concentration of glucose in enzymatic hydrolysate; Cbiose was the concentration of cellobiose in enzymatic hydrolysate; CCel was the initial concentration of cellulose. The units of measurement were g/L.
The ethanol yield was calculated according to the following equation:

equation(3)
View the MathML source
Turn MathJax on

where Ceth was the concentration of ethanol; ΔCglu was the consumption of glucose in fermentation process; 0.51 was the transformation factor from glucose to ethanol. The units of measurement were g/L.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. วิธี2.1. วัสดุStover ข้าวโพดเก็บเกี่ยวจากเหลียนยุนกังของมณฑลในประเทศจีน หลังจาก air-dried และบดชีวเคมีสถาบันของจิงวนศาสตร์มหาวิทยาลัย stover ข้าวโพดถูก sieved เพื่อให้เศษระหว่าง 20 และ 80 ตาข่ายสำหรับการหลีกเลี่ยงการรบกวนเนื่องจากเถ้า ชีวมวลที่เตรียมไว้ถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิห้องจนกว่าจะใช้ ใช้วิธีเอนไซม์ทางการค้า 2, Celluclast 1.5 L (แค C2730) และ Novozyme 188 (Cat C6105) จากซิก-Aldrich สำหรับไฮโตรไลซ์เอนไซม์ในระบบ โซลูชั่นของซัลเฟอร์ไดออกไซด์ (รีเอเจนต์ ACS, ⩾6%) ถูกซื้อจากซิก-Aldrich ไดโซเดียมซัลไฟต์และแมกนีเซียมคลอไรด์ซื้อจากจิงรีเอเจนต์เคมี Co., ltd2.2. แมกนีเซียม bisulfite โซลูชันเตรียมโซลูชั่น bisulfite แมกนีเซียมถูกเตรียม โดยผสมแมกนีเซียมแข็งซัลไฟต์ด้วยโซลูชั่นของซัลเฟอร์ไดออกไซด์ในอัตราส่วน 1:1 (pH ประมาณ 5.2) เป็นโมล ส่วนผสมที่กวนจนละลายแมกนีเซียมซัลไฟต์อนุภาคหาย ข้างต้นกล่าวถึงแข็งแมกนีเซียมซัลไฟต์ถูกเตรียม โดยผสมโซเดียมซัลไฟต์กับแมกนีเซียมคลอไรด์โมลอัตราส่วน 1:1 แล้ว reactants ละลายเหลือได้ eluted สามครั้งน้ำ หลังจากนั้น แมกนีเซียมซัลไฟต์ที่แห้ง โดย lyophilization2.3. จุลินทรีย์และการเพาะปลูกSaccharomyces cerevisiae โดย บริษัท Anqi จีน AQ และปลูกที่กลางสำหรับ inoculation อยู่ (g/L): น้ำตาลกลูโคส 20 peptone, 20 สารสกัดจากยีสต์ 10 ที่ธรรมชาติ pH (YPD) มีเตรียมเมล็ดวัฒนธรรมดัง: วนของเซลล์จากเอียงปลูกเต็ม inoculated ใน 100 ml ของกลางข้างในน้ำ 250 ml Erlenmeyer และ incubated ใน 24 ชมที่ 30 ° C มี 150 rpm เซลล์เมล็ดเก็บเกี่ยว ล้าง แล้ว inoculated น้ำ Erlenmeyer หรือ bioreactors สำหรับการผลิตเอทานอล2.4 การ pretreatmentPretreatment ระดับห้องปฏิบัติการนี้ถูกดำเนินในการอาบน้ำอุ่นนวดน้ำมัน ผลรวมของ 3 ตัวอย่างชีวมวลและโซลูชั่น 18 mL pretreated ถูกวางในถังสเตนเลสปิดผนึก 30 mL ที่อัตราส่วน 1:6 (w/v) สำหรับ pretreatment เป็นของแข็ง/ของเหลว ในกระบวนการ pretreatment แมกนีเซียม bisulfite ยา pretreatment อุณหภูมิ และเวลา pretreatment มีได้เหมาะตามลำดับผลการตรวจสอบ หลังจาก pretreatment ปล่อยได้ทันทีระบายความร้อนด้วยลงในอ่างน้ำ พื้นผิว pretreated ถูกรวบรวม โดยเครื่องกรอง ล้าง ด้วยน้ำอุ่นน้อย 3 ครั้ง และเก็บไว้ที่ 4 องศาเซลเซียส ขาดทุนที่เป็นของแข็งที่ถูกกำหนดจากการวัดน้ำหนักเปียกและชื้นของของแข็ง เหล้าใช้จ่ายถูกเก็บไว้ใน −20 ° C สำหรับการวิเคราะห์เพิ่มเติม ทดลองทั้งหมดได้ดำเนินการเหมือนกับสอง2.5 ไฮโตรไลซ์เอนไซม์ในระบบไฮโตรไลซ์เอนไซม์ในระบบที่ดำเนินการใน 3% เซลลูโลสใน 30 mL ซิเตรตบัฟเฟอร์ (pH 4.8, 50 มม.), 150 rpm ใน incubator เชคเกอร์สำหรับ 48 h และ 50 ° C ใช้ส่วนผสมของ Celluclast 1.5 L ที่เซลลูโลส FPU/g และ Novozyme 188 15 ที่เซลลูโลส CBU/g 30 สำหรับไฮโตรไลซ์เอนไซม์ในระบบ หลังจากไฮโตรไลซ์ ตัวอย่างการถูกถอน แล้ว centrifuged เอาวัสดุไม่ละลายน้ำ Supernatants ถูกต่อมามีกรองผ่านตัวกรองเข็ม 0.22 μm (มาก Co., LTD) และใช้สำหรับวิเคราะห์ HPLC ภายหลัง ดำเนินการทดลองทั้งหมดในการคัดลอกตัวเอง และแต่ละจุดข้อมูลคือ ค่าเฉลี่ยของทั้งสองเหมือนกับ2.6 การหมักหมักทำออกใน 250 mL Erlenmeyer หนาวที่ 30 ° C และสารสกัด จาก 150 rpm ใน 24 ชมกับ 50 mL ของเอนไซม์ในระบบด้วยการเพิ่มยีสต์ 6 g/L, peptone 10 g/L, 5 g/L (NH4) 2SO4, KH2PO4 10 g/L, MgSO4⋅7H2O 0.5 g/L และ 0.15 g/L CaCl2⋅H2O หนาวแต่ละถูกพร้อมจุกซิลิโคน pierced เข็มให้กำจัด CO2 ผลิตในระหว่างการหมัก Inoculum ยีสต์เริ่มต้น OD 10 (600 nm) และมีควบคุม pH เริ่มต้นใน 4.8 ในตอนท้ายของหมัก ของซุปถูก centrifuged ที่ 5000g สำหรับ 10 นาทีสำหรับการวิเคราะห์น้ำตาลและเอทานอล ข้อมูลรายงานเป็นค่าเฉลี่ยของข้อมูลซ้ำ2.7 การวิเคราะห์วิธีจนเคมีของ stover ข้าวโพดเดิม และ pretreated ได้กำหนดตามวิธีวิเคราะห์ชาติทดแทนพลังงานปฏิบัติ (NREL โกลเด้น) สำหรับชีวมวล (Sluiter et al., 2011) ฟรี fermentable น้ำตาล (กลูโคส cellobiose และ xylose) หลายรู้จัก inhibitors (กรด กรดอะซิติก กรด levulinic, furfural, 5-hydroxymethylfurfural (HMF)) และเอทานอลถูก quantified โดยใช้ระบบ HPLC (1200 ชุด Agilent) พร้อมคอลัมน์ไบ-Rad Aminex HPX - 87H (300 × 7.8 มิลลิเมตร) โดยตรง มม. 5 กำมะถันเป็นเฟสเคลื่อนที่ควบคุมอัตราการไหลของ 0.6 mL/นาที ที่ 55 ° C วิเคราะห์สัญญาณพบจับดรรชนี (Ouyang et al., 2013) สำหรับการวิเคราะห์ของ xylooligosaccharide (XOS), ตัวอย่าง 1 mL ผสมกับ mL 1 5 N กำมะถัน และ hydrolyzed ที่ 120 ° C สำหรับ 45 นาทีเพื่อแปลง XOS monomers ของพวกเขาขึ้น และวิเคราะห์ ด้วย HPLC จำนวน XOS (Nabarlatz et al., 2007) การวัดปริมาณเอาของแต่ละองค์ประกอบ (%) มีคำนวณตามสมการต่อไปนี้:equation(1)ดูต้น MathMLเปิด MathJaxซึ่ง mini เป็นมวลขององค์ประกอบ (เซลลูโลส hemicellulose หรือ lignin) ในวัตถุดิบ mtre มีมวลขององค์ประกอบ (เซลลูโลส hemicellulose หรือ lignin) ในวัสดุ pretreated หน่วยวัดมี gผลผลิตไฮโตรไลซ์เซลลูโลสมีคำนวณตามสมการต่อไปนี้:equation(2)ดูต้น MathMLเปิด MathJaxที่ Cglu มีความเข้มข้นของกลูโคสในด้วยเอนไซม์ในระบบ Cbiose ความเข้มข้นของ cellobiose ด้วยเอนไซม์ในระบบ ความเข้มข้นเริ่มต้นของเซลลูโลส CCel ได้ หน่วยวัด g/lมีคำนวณผลผลิตเอทานอลตามสมการต่อไปนี้:equation(3)ดูต้น MathMLเปิด MathJaxที่ Ceth มีความเข้มข้นของเอทานอล ΔCglu คือ ปริมาณการใช้น้ำตาลกลูโคสในกระบวนการหมัก 0.51 มีตัวแปลงจากกลูโคสกับเอทานอล หน่วยวัด g/l

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วิธีการ
2.1 วัสดุข้าวโพดซังเก็บเกี่ยวจาก Lianyungang ของมณฑลเจียงซูในประเทศจีน หลังจากที่อากาศแห้งและบดที่สถาบันชีวเคมีมหาวิทยาลัยหนานจิงป่าไม้ซังข้าวโพดที่ถูกร่อนเพื่อให้บรรลุส่วนระหว่าง 20 และ 80 ตาข่ายสำหรับการหลีกเลี่ยงการรบกวนเพราะเถ้า ชีวมวลที่เตรียมไว้ถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิห้องจนการใช้งาน สองโซลูชั่นเอนไซม์เชิงพาณิชย์ Celluclast 1.5 ลิตร (Cat C2730) และ Novozyme 188 (Cat C6105) จาก Sigma-Aldrich ถูกนำมาใช้สำหรับการย่อยของเอนไซม์ วิธีการแก้ปัญหาก๊าซซัลเฟอร์ไดออกไซด์ (สารเอซีเอส, ⩾6%) ซื้อมาจาก Sigma-Aldrich โซเดียมไฮดรัสซัลไฟต์และแมกนีเซียมคลอไรด์ที่ซื้อมาจากหนานจิงสารเคมี, LTD. 2.2 แมกนีเซียมเตรียมการแก้ปัญหา bisulfite แมกนีเซียมแก้ปัญหา bisulfite ถูกจัดทำขึ้นโดยการผสมแมกนีเซียมซัลไฟต์เป็นของแข็งที่มีวิธีการแก้ปัญหาก๊าซซัลเฟอร์ไดออกไซด์ในอัตราส่วน 1: 1 (pH ประมาณ 5.2) ส่วนผสมที่ถูกกวนจนอนุภาคแมกนีเซียมซัลไฟต์ที่ไม่ละลายหายไป ดังกล่าวข้างต้นแมกนีเซียมซัลไฟต์เป็นของแข็งถูกจัดทำขึ้นโดยการผสมโซเดียมซัลไฟต์ที่มีแมกนีเซียมคลอไรด์ในอัตราส่วน 1: 1 และแล้วที่ละลายน้ำได้สารตั้งต้นที่เหลือถูกชะสามครั้งด้วยน้ำ ต่อจากนั้นซัลไฟต์แมกนีเซียมแห้งโดย lyophilization. 2.3 จุลินทรีย์และการเพาะปลูกSaccharomyces cerevisiae AQ ถูกจัดให้โดย Anqi บริษัท จีนและการเติบโตในระดับปานกลางสำหรับการฉีดวัคซีนที่มีอยู่ (g / L): กลูโคส 20; เปปโตน 20; สารสกัดจากยีสต์ 10 ที่ pH ธรรมชาติ (YPD) วัฒนธรรมเมล็ดถูกจัดทำขึ้นดังนี้ห่วงของเซลล์จากเอียงโตเต็มที่ได้รับเชื้อเป็น 100 มล. ของกลางดังกล่าวข้างต้นใน 250 มล. ขวด Erlenmeyer และบ่มเป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสมี 150 รอบต่อนาที จากนั้นเซลล์เมล็ดพันธุ์ที่ถูกเก็บเกี่ยวล้างและเชื้อเข้าไปในขวดหรือถังหมัก Erlenmeyer สำหรับการผลิตเอทานอล. 2.4 การปรับสภาพปรับสภาพห้องปฏิบัติการนี้ได้รับการดำเนินการในอ่างน้ำมันอุ่นไฟฟ้า รวม 3 กรัมของตัวอย่างชีวมวลและ 18 มิลลิลิตรโซลูชั่นที่ปรับสภาพถูกวางไว้ใน 30 มิลลิลิตรปิดผนึกถังสแตนเลสที่เป็นของแข็ง / ของเหลวอัตราส่วน 1: 6 (w / v) สำหรับการปรับสภาพ ในขั้นตอนการปรับสภาพแมกนีเซียมปริมาณ bisulfite อุณหภูมิและเวลาการปรับสภาพปรับสภาพได้รับการปรับปรุงตามลำดับในการตรวจสอบผลกระทบของพวกเขา หลังจากปรับสภาพเครื่องปฏิกรณ์เย็นลงทันทีในอ่างน้ำ ปรับสภาพพื้นผิวที่ถูกเก็บรวบรวมโดยการกรองล้างด้วยน้ำอุ่นอย่างน้อยสามครั้งและเก็บไว้ที่ 4 องศาเซลเซียส การสูญเสียที่เป็นของแข็งถูกกำหนดจากน้ำหนักเปียกวัดและปริมาณความชื้นของของแข็ง สุราการใช้จ่ายที่ถูกเก็บไว้ใน -20 ° C สำหรับการวิเคราะห์ต่อ การทดลองทั้งหมดถูกดำเนินการในสองซ้ำ. 2.5 เอนไซม์ย่อยสลายการย่อยด้วยเอนไซม์เป็นที่เซลลูโลส 3% ใน 30 มิลลิลิตรซิเตรทบัฟเฟอร์ (pH 4.8 มิลลิ 50) ที่ 50 ° C และ 150 รอบต่อนาทีในตู้อบเครื่องปั่นเป็นเวลา 48 ชั่วโมง ส่วนผสมของ Celluclast 1.5 ลิตรที่ 15 FPU / g เซลลูโลสและ Novozyme 188 วันที่ 30 CBU / g เซลลูโลสที่ใช้สำหรับการย่อยของเอนไซม์ หลังจากการย่อยสลายตัวอย่างที่ถูกถอนออกและหมุนเหวี่ยงเพื่อเอาวัสดุที่ไม่ละลายน้ำ supernatants ถูกกรองต่อมาผ่านตัวกรองเข็มฉีดยา 0.22 ไมครอน (ค จำกัด ) และใช้ในการวิเคราะห์ HPLC ที่ตามมา การทดลองทั้งหมดได้รับการดำเนินการในการทำซ้ำและแต่ละจุดข้อมูลเป็นค่าเฉลี่ยของสองซ้ำได้. 2.6 การหมักการหมักได้ดำเนินการใน 250 มิลลิลิตรขวด Erlenmeyer ที่ 30 ° C และ 150 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 24 ชั่วโมง 50 มิลลิลิตรไฮโดรไลเอนไซม์เพิ่ม 6 กรัม / ลิตรสารสกัดจากยีสต์ 10 กรัม / ลิตรเปปโตน, 5 กรัม / ลิตร (NH4) 2SO4 10 กรัม / ลิตร KH2PO4 0.5 กรัม / ลิตรMgSO4⋅7H2Oและ 0.15 กรัม / ลิตรCaCl2⋅H2O ขวดแต่ละคนพร้อมกับจุกซิลิโคนเข็มเจาะจะอนุญาตให้มีการกำจัดของ CO2 ที่ผลิตในระหว่างการหมัก เชื้อยีสต์เริ่มต้นถูก OD 10 (600 นาโนเมตร) และ pH เริ่มต้นที่ถูกควบคุมใน 4.8 ในตอนท้ายของการหมักตัวอย่างของน้ำซุปที่ถูกหมุนเหวี่ยงที่ 5000g เป็นเวลา 10 นาทีสำหรับการวิเคราะห์น้ำตาลและเอทานอล รายงานข้อมูลที่เป็นค่าเฉลี่ยของรายการที่ซ้ำกัน. 2.7 วิธีการวิเคราะห์องค์ประกอบทางเคมีของต้นฉบับและซังข้าวโพดปรับสภาพได้รับการพิจารณาเป็นไปตามพลังงานทดแทนแห่งชาติทดลอง (NREL โกลเด้น) วิธีการวิเคราะห์สำหรับพลังงานชีวมวล (Sluiter et al., 2011) น้ำตาลที่ย่อยฟรี (กลูโคส cellobiose และไซโลส) หลายสารยับยั้งที่รู้จักกัน (กรด, กรดอะซิติกกรด levulinic, เฟอร์ฟูรัล 5 hydroxymethylfurfural (HMF)) และเอทานอลได้รับการวัดโดยตรงโดยใช้ระบบ HPLC (ที่ 1200 ชุด Agilent) พร้อมกับ Bio-Rad คอลัมน์ Aminex HPX-87H (300 × 7.8 มิลลิเมตร) 5 มิลลิ H2SO4 เป็นเฟสเคลื่อนที่ถูกควบคุมในอัตราการไหล 0.6 มิลลิลิตร / นาทีที่ 55 ° C สัญญาณการวิเคราะห์ถูกตรวจพบโดยการตรวจจับดัชนีหักเห (โอวหยาง et al., 2013) ในฐานะที่เป็นสำหรับการวิเคราะห์ของ xylooligosaccharide (XOS) 1 ตัวอย่างมิลลิลิตรผสมกับ 1 มิลลิลิตร 5 N H2SO4 และไฮโดรไลซ์ที่ 120 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 45 นาทีในการแปลง XOS เพื่อโมโนเมอร์ที่เป็นส่วนประกอบของพวกเขาและวิเคราะห์โดยวิธี HPLC ปริมาณจำนวนของ XOS ( .. Nabarlatz et al, 2007) การกำจัดของแต่ละองค์ประกอบ (%) ที่คำนวณได้ตามสมการต่อไปนี้: สมการ (1) ดูแหล่งที่มา MathML เปิด MathJax ในที่มินิเป็นมวลขององค์ประกอบ(เซลลูโลสเฮมิเซลลูโลสหรือลิกนิน) ใน วัตถุดิบ; mtre เป็นมวลขององค์ประกอบ (เซลลูโลสเฮมิเซลลูโลสหรือลิกนิน) ในวัสดุก่อนได้รับรังสี หน่วยของการวัดที่ถูกก. อัตราผลตอบแทนการย่อยสลายเซลลูโลสที่คำนวณได้ตามสมการต่อไปนี้: สมการ (2) ดูแหล่งที่มา MathML เปิด MathJax ในที่Cglu เป็นความเข้มข้นของกลูโคสในไฮโดรไลเอนไซม์; Cbiose เป็นความเข้มข้นของไฮโดรไล cellobiose ในเอนไซม์; CCEL เป็นความเข้มข้นเริ่มต้นของเซลลูโลส หน่วยของการวัดมีกรัม / ลิตร. ผลผลิตเอทานอลที่ได้รับการคำนวณตามสมการต่อไปนี้: สมการ (3) ดูแหล่งที่มา MathML เปิด MathJax ในที่Ceth เป็นความเข้มข้นของเอทานอล; ΔCgluคือการบริโภคของน้ำตาลกลูโคสในกระบวนการหมัก 0.51 เป็นปัจจัยเปลี่ยนแปลงจากกลูโคสเอทานอล หน่วยการวัดเป็นกรัม / ลิตร

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . 2.1 วิธีการ
. วัสดุ

ส่วนข้าวโพดเก็บเกี่ยวจาก Lianyungang Jiangsu จังหวัดในประเทศจีน หลังจากอากาศแห้งและบดที่สถาบันชีวเคมีของวนศาสตร์มหาวิทยาลัยนานกิง ข้าวโพดฝักนั้นอีกครั้งเพื่อให้บรรลุสัดส่วนระหว่าง 20 และ 80 ตาข่ายเพื่อหลีกเลี่ยงการรบกวน เพราะขี้เถ้า เตรียมชีวมวลถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิห้องจนกว่าจะใช้2 เอนไซม์ทางการค้า โซลูชั่น celluclast 1.5 ลิตร ( แมว c2730 ) และ novozyme 188 ( แมว c6105 ) จากซิกม่า Aldrich และใช้เป็นเอนไซม์ . โซลูชั่นก๊าซกำมะถัน ( ACS รีเอเจนต์ ⩾ 6 % ) ซื้อจากซิกม่า – อัลดริช แอนไฮดรัสโซเดียมซัลไฟต์ และ แมกนีเซียมคลอไรด์ ซื้อสารเคมีจาก Nanjing Co . , Ltd .

. . การเตรียมสารละลายแมกนีเซียมไบ

โซลูชั่นไบซัลไฟต์แมกนีเซียมแมกนีเซียมถูกเตรียมโดยการผสมด้วยสารละลายของแข็งก๊าซซัลเฟอร์ไดออกไซด์ในอัตราส่วนโมล 1 : 1 ( pH ประมาณ 5.2 ) ส่วนผสมที่ถูกกวนจนละลายแมกนีเซียม sulfite อนุภาคหายไป ที่กล่าวถึงข้างต้นแข็งแมกนีเซียมซัลไฟต์ เตรียมโดยการผสมโซเดียมซัลไฟต์ กับแมกนีเซียมคลอไรด์ในอัตราส่วนโมล 1 : 1 . จากนั้นที่เหลือ ละลายสารตั้งต้นคือตัวอย่างสามครั้งด้วยน้ำ หลังจากนั้น แมกนีเซียม sulfite แห้งได้โดยเอนไซม์

2.3 จุลินทรีย์และการเพาะปลูก

Saccharomyces cerevisiae AQ คือให้โดย บริษัท anqi ประเทศจีนและโตที่กลางสำหรับการบรรจุ ( กรัม / ลิตร ) = 20 ; 20 ; extract สารสกัดจากยีสต์ , 10 ที่ pH ธรรมชาติ ( ypd ) การเพาะเมล็ดได้เตรียมการดังนี้วงเซลล์จากโตเต็มเอียงเป็นเชื้อ 100 มิลลิลิตรของอาหารข้างบน หมักในฟลาสก์ขนาด 250 มิลลิลิตร ขวด บ่มเป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 30 องศา C 150 รอบต่อนาที แล้วเซลล์เมล็ดพันธุ์การเก็บเกี่ยว , ล้างและเชื้อจุลินทรีย์เออร์เลนเมเยอร์หรือเครื่องปฏิกรณ์ชีวภาพสำหรับการผลิตเอทานอล .

2.4 . โดย

นี้ปฏิบัติการการกระทำในน้ำมันอุ่นไฟฟ้า