2.3. Purification of S. platensis exudates
The culture filtrate from the previous step was passed through
glass fiber filters and 0.45 mm Millipore membranes. The filtrate
was then concentrated in a rotary evaporator at 40 C under
reduced pressure, dialyzed successively against running tap
water and distilled water in a spectra/por dialysis tube (Spectra/
Por; Spectrum Medical Industries, Los Angeles, CA) with a
molecular weight cut-off of 3500 Da, and freeze dried. Weighed
portions of lyophilized staff were suspended in deionized water
and dispersed by storage for 18 h at 4 C. After that, the solution
was purified using C18 solid-phase extraction discs (Empore,
3M, Minneapolis, MN, USA). Prior to extraction, the discs were
conditioned with methanol and water. The Spirulina filtrate was
extracted with 47 mm discs by applying vacuum to maintain a
flow rate of 0.5–5 mL/min. The C18 discs were eluted three
times with 5 mL of methanol each time which was blown down
to dryness and stored frozen. The content was dissolved in
physiological saline solution (1 mg/mL), sterilized by filtration
through a 0.22 mm filter and used for intra-peritoneal injection of
the mice. Another set of the purified exudates was dissolved in
methanol/water (65/35, v/v) and used for the gas chromatography–
mass spectrometer (GC–MS) and liquid chromatography–
mass spectrometry (LC–MS)/MS analysis.
2.3 บริสุทธิ์ของ S . platensis สารที่หลั่ง
culture filtrate จากขั้นตอนก่อนหน้านั้นผ่านแผ่นกรองใยแก้วและ 0.45 mm
มิลลิเยื่อ 148
แล้วความเข้มข้นในเครื่องโรตารี่ 40 องศาเซลเซียสภายใต้ความดันลดลงอย่างต่อเนื่องกับซิ
,
วิ่งแตะน้ำและน้ำกลั่นในหลอดไต ( Spectra Spectra / ปอ /
ปอ ; อุตสาหกรรมการแพทย์สเปกตรัมLos Angeles , CA ) กับ
ตัดโมเลกุลของ 3500 ดาและแช่แข็งแห้ง หนัก
ส่วนของพนักงานไลโอหยุดชั่วคราวในคล้ายเนื้อเยื่อประสานน้ำ
และแจกจ่ายโดยกระเป๋า 18 H ที่ 4 C หลังจากนั้นโซลูชั่น
บริสุทธิ์ใช้ c18 ส่วนการสกัดแผ่น ( empore
, 3M , Minneapolis , MN , USA ) ก่อนที่จะใช้ดิสก์ถูก
ปรับอากาศที่มีเมทานอลและน้ำส่วนสาหร่ายเป็นแผ่นกรอง
สกัด 47 มม. โดยใช้สูญญากาศ เพื่อรักษาอัตราการไหล 0.5 –
5 มล. / นาที c18 ดิสก์ถูกตัวอย่าง 3
5 มิลลิลิตรเมธาครั้งแต่ละครั้งซึ่งถูกพัดลง
dryness และเก็บแช่แข็ง เนื้อหาที่ถูกละลายใน
สรีรวิทยาน้ำเกลือ ( 1 mg / ml ) , การฆ่าเชื้อโดยผ่านการกรอง
022 มม. กรองและใช้สำหรับภายในช่องท้องฉีด
หนู อีกชุดของบริสุทธิ์ที่ละลายในสารที่หลั่ง
เมทานอลต่อน้ำ ( 65 / 35 , v / v ) และใช้สำหรับแก๊สโครมาโตกราฟีแมสสเปกโตรมิเตอร์ ( GC )
( MS ) และของเหลว chromatography - มวลสาร ( LC )
/ MS ) การวิเคราะห์ MS
การแปล กรุณารอสักครู่..