Cells were prepared by growing wild

Cells were prepared by growing wild-type or CLPs mutants B. amyloliquefaciens FZB42 at 37 °C to the mid-logarithmic growth phase (OD600 = 0.7) in Luria Bertani broth. The cell samples were prepared using modified methods, as fellows ( Kohler et al., 2000 and Rashid and Kornberg, 2000). The cells were collected by centrifugation at 2500 × g for 10 min at room temperature and washed with cold (4 °C) PBS buffer. Fresh cells were used in the subsequent experiments to avoid bacteriolysis. For TEM, 300-mesh carbon-coated copper grids were floated on 50 μL cell sample solutions for 5 min at room temperature. Next, the grids were placed on 3% paraformaldehyde for 15 min at 22 °C and then washed with PBS and distilled water. The samples were examined with a FEI Tecnai G2 F30 transmission electron microscope, which was operated at 120 kV.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เซลล์วจัดทำขึ้น โดยการปลูกแบบธรรมชาติหรือ amyloliquefaciens สายพันธุ์ B. CLPs FZB42 37 ° c ระยะเติบโตกลางลอการิทึม (OD600 = 0.7) ในซุป Luria Bertani ตัวอย่างเซลล์ถูกเตรียมโดยใช้วิธีการแก้ไข เป็นเพื่อน (โคห์เลอร์ et al. 2000 และราชิด และ Kornberg, 2000) เซลล์ถูกจัดเก็บ โดยการหมุนเหวี่ยงที่ 2500 × g ที่อุณหภูมิห้อง 10 นาที และล้าง ด้วยน้ำเย็น (4 ° C) บัฟเฟอร์ PBS เซลล์สดถูกใช้ในการทดลองตามมาเพื่อหลีกเลี่ยงการ bacteriolysis สำหรับ TEM, 300-ตาข่ายเคลือบคาร์บอนทองแดงกริดถูกลอยตัวบน 50 μL เซลล์อย่างโซลูชั่นสำหรับ 5 นาทีที่อุณหภูมิห้อง ถัดไป กริดอยู่ที่ 3% paraformaldehyde 15 นาทีที่ 22 ° C และจากนั้นล้าง ด้วย PBS และกลั่นน้ำ ตัวอย่างตรวจสอบได้กับเฟย Tecnai G2 F30 กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน ซึ่งดำเนินการ 120 kV

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เซลล์ที่ถูกจัดทำขึ้นโดยการปลูกป่าหรือการกลายพันธุ์ชนิด CLPs B. amyloliquefaciens FZB42 ที่ 37 ° C ถึงระยะการเจริญเติบโตของกลางลอการิทึม (OD600 = 0.7) ใน Luria Bertani น้ำซุป กลุ่มตัวอย่างที่ใช้มือถือได้เตรียมใช้วิธีการแก้ไขเป็นเพื่อน (โคห์เลอร์ et al., 2000 และราชิดและ Kornberg, 2000) เซลล์ที่ถูกเก็บรวบรวมโดยการหมุนเหวี่ยงที่ 2,500 ×กรัมเป็นเวลา 10 นาทีที่อุณหภูมิห้องและล้างด้วยน้ำเย็น (4 ° C) บัฟเฟอร์พีบีเอส เซลล์สดถูกนำมาใช้ในการทดลองที่ตามมาเพื่อหลีกเลี่ยงการ bacteriolysis สำหรับ TEM 300 ตาข่ายคาร์บอนเคลือบกริดทองแดงลอยอยู่บน 50 ไมโครลิตรตัวอย่างการแก้ปัญหามือถือเป็นเวลา 5 นาทีที่อุณหภูมิห้อง ถัดไปกริดถูกวางไว้บน 3% paraformaldehyde 15 นาทีที่ 22 องศาเซลเซียสและจากนั้นล้างด้วยพีบีเอสและน้ำกลั่น กลุ่มตัวอย่างที่มีการตรวจสอบที่มี FEI Tecnai G2 F30 กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนซึ่งได้รับการดำเนินการใน 120 กิโลโวลต์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เซลล์เตรียมโดยการเติบโตของ clps กลายพันธุ์หรือพ. amyloliquefaciens fzb42 37 ° C เพื่อกลางระยะการเจริญเติบโตของลอการิทึม ( od600 = 0.7 ) ลุเรียแบร์ตานิซุป เซลล์ตัวอย่างเตรียมใช้วิธีแก้ไขตามที่เพื่อน ( Kohler et al . , 2000 และราชิด และ คอร์นเบิร์ก , 2000 ) เซลล์มีจำนวน 3 กรัม 2500 × 10 นาที ที่อุณหภูมิห้อง และล้างด้วยน้ำเย็น ( 4 ° C ) pbs buffer เซลล์ใหม่ถูกใช้ในการทดลองต่อมาเพื่อหลีกเลี่ยง bacteriolysis . สำหรับเต็ม 300 ตาข่ายคาร์บอนเคลือบทองแดงกริดเป็นลอยใน 50 μและโซลูชั่นตัวอย่างสำหรับ 5 นาทีที่อุณหภูมิห้อง ถัดไป , กริดไว้ 3% พาราฟอร์มาลดิไฮด์สำหรับ 15 นาทีที่ 22 ° C และจากนั้นล้างด้วย pbs และน้ำกลั่น จำนวนการตรวจสอบกับเฟย tecnai G2 F30 กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนซึ่งดำเนินการ 120 kV .