In our laboratory, three novel clas

In our laboratory, three novel class-IId bacteriocins produced by LAB
were isolated from Thai fermented pork sausages known as nham.
Garvieacin Q or GarQ, produced by Lactococcus garvieae BCC 42578, contains
70 amino acids in length of which 20 amino acids is N-terminal
leader sequencewhich is cleaved at the Gly-Gly site to generate themature
GarQ with molecular mass of 5339 Da, pI of 9.73 and net 2 positive
charges (Tosukhowong et al., 2012). GarQ was classified as a class-IId
bacteriocin since it did not contain any modified amino acid, no conserved
YGNGVXC motif in molecule and exhibited its antimicrobial activity
without the need of other complementary peptides. GarQ, in the
concentration range of micromolar, exhibited antibacterial spectrum
against various strains of the closely related bacteria L. garvieae, as
well as the potentially pathogenic Enterococcus faecium and Listeria
monocytogenes. However, GarQ was not active against Staphylococcus
aureus and other gram-negative meat-borne pathogens, including
Escherichia coli and Salmonella Typhimurium. GarQ retained its antimicrobial
activity over awide pH range of 2 to 8, even following heat treatment
at 100 °C for 15 min. A complete loss of its antimicrobial activity
was observed when heated at 121 °C for 15 min. Purified GarQ, up to
1 mg/mL, was not cytotoxic to Vero (African green monkey kidney),
HepG2 (human liver hepatocarcinoma), and Caco-2 (human colon adenocarcinoma)
cell lines as detected by MTT [3-(4,5-dimethyl-2-
thiazolyl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide] assay.
Apart from GarQ, the other two novel bacteriocins, Bacteriocins
7293A (Bac7293A) and B (Bac7293B), from Weissella hellenica BCC
7293 have been recently discovered (Woraprayote et al., 2015). Unlike
GarQ, these two bacteriocins inhibit broad spectrum of bacteria, including
foodborne pathogenic Listeriamonocytogenes, Staphylococcus aureus,
Salmonella Typhimurium, Escherichia coli, aswell as food-spoilage Pseudomonas
aeruginosa, and Aeromonas hydrophila. Both exhibited activity
through bactericidal mode of action against both gram-positive and
gram-negative bacteria without cell-lysis. The Bac7293A showed greater
antimicrobial activity but lower pH and thermal stability compared
with those properties of Bac7293B. The antimicrobial activity of both
bacteriocins were completely inactivated by proteolytic enzymes, i.e.
trypsin, α-chymotrypsin, pepsin and protease K, but the peptides
remained active after treated with lipase and amylase, suggesting
their proteinaceous nature. Organic solvents (ethanol, isopropanol, acetone,
acetonitrile) and surfactants (Tween 20, Tween 80 and Triton X-
100) did not affect the antimicrobial activity of these bacteriocins.
Based on electrospray ionization mass spectrometry, molecular masses
of Bac7293A and B were determined to be 6,249.302 and 6,489.716 Da,
respectively. The structures and biosynthesis of Bac7293A and Bwill require
further investigation for better understanding about their molecular
characteristics. Since the traditional method for amino acid
sequencing by Edman degradation could not provide significant amino
acid sequences of both bacteriocins, proteogenomic approach has
been used to access their primary structure. To date, amino acid sequence
of Bac7293A has been currently revealed (Tosukhowong et al.,
submitted for publication

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ในห้องปฏิบัติการ bacteriocins นวนิยายคลา-IId สามที่ผลิต โดยห้องปฏิบัติการถูกแยกจากไส้กรอกแหนมไทยเรียกว่า nhamGarvieacin Q หรือ GarQ ผลิต โดย Lactococcus garvieae BCC 42578 ประกอบด้วยกรดอะมิโน 70 ยาวซึ่งกรดอะมิโน 20 คือ N-เทอร์มินัลsequencewhich ผู้นำคือแหวกที่ไซต์ Gly Gly เพื่อสร้าง thematureGarQ กับมวลโมเลกุลของดา 5339, pI 2 9.73 และสุทธิเป็นบวกค่าธรรมเนียม (Tosukhowong et al. 2012) GarQ ถูกจัดเป็นชั้น-IIdคเทเนื่องจากมันไม่ได้ประกอบด้วยการปรับเปลี่ยนกรดอะมิโน ไม่อนุรักษ์YGNGVXC motif ในโมเลกุล และจัดแสดงกิจกรรมการต้านจุลชีพโดยไม่ต้องของเปปไทด์เสริมอื่น ๆ GarQ ในการช่วงความเข้มข้นของ micromolar แสดงสเปกตรัมต้านเชื้อแบคทีเรียกับสายพันธุ์ต่าง ๆ ของของแบคทีเรียที่เกี่ยวข้องอย่างใกล้ชิด L. garvieae เป็นตลอดจนอาจทำให้เกิดโรค Enterococcus faecium และ Listeriaสมอง อย่างไรก็ตาม GarQ ไม่ได้ใช้งานกับ Staphylococcusหมอเทศข้างลายและอื่น ๆ แกรมลบเนื้อสัตว์พาหะเชื้อโรค รวมทั้งEscherichia coli และ Salmonella Typhimurium GarQ สะสมของสารต้านจุลชีพกิจกรรมช่วง pH awide ของ 2 8 แม้ต่อความร้อนที่ 100 ° C 15 นาที การสูญเสียที่สมบูรณ์ของกิจกรรมของยาต้านจุลชีพพบว่า เมื่อความร้อนที่ 121 ° C เป็นเวลา 15 นาที GarQ บริสุทธิ์ ถึงไม่ได้ 1 มิลลิกรัม/มิลลิลิตร พิษกับแอนนา (ลิงเขียวดำไต),HepG2 (มนุษย์ตับ hepatocarcinoma), และ Caco-2 (มะเร็งลำไส้ใหญ่มนุษย์)บรรทัดของเซลล์ตรวจพบ โดย MTT [3- (4, 5-dimethyl - 2 -นไดฟีนิลได thiazolyl) - 2.5--2 H tetrazolium โบรไมด์] ทดสอบนอกจาก GarQ อื่นสองนวนิยาย bacteriocins, Bacteriocins7293A (Bac7293A) และ B (Bac7293B), จาก Weissella hellenica สำเนาลับถึง7293 ได้ถูกค้นพบเมื่อเร็ว ๆ นี้ (Woraprayote et al. 2015) ซึ่งแตกต่างจากGarQ, bacteriocins เหล่านี้สองยับยั้งแบคทีเรีย รวมหลากหลายเกิดจากอาหารทำให้เกิดโรค Listeriamonocytogenes, Staphylococcus หมอเทศข้างลายเชื้อ salmonella Typhimurium, Escherichia coli เช่นเป็น Pseudomonas อาหารเน่าเสียaeruginosa และ Aeromonas hydrophila ทั้งการจัดแสดงกิจกรรมให้เห็นว่าโหมดของการดำเนินการกับทั้งแกรมบวก และแบคทีเรียแกรมลบ โดยเซลล์ lysis Bac7293A แสดงให้เห็นมากขึ้นกิจกรรมต้านจุลชีพแต่ต่ำกว่าค่า pH และความร้อนเสถียรภาพเมื่อเทียบด้วยคุณสมบัติของ Bac7293B กิจกรรมการต้านจุลชีพของทั้งสองbacteriocins ได้อย่างสมบูรณ์ยก โดยเอนไซม์ย่อยโปรตีน เช่นทริปซิน α-chymotrypsin ธาตุเพพซิน และโปรติเอสเค แต่เปปไทด์ยังคงใช้งานอยู่หลังจากรักษา ด้วยเอนไซม์ไลเปสและอะไมเลส แนะนำโปรตีนธรรมชาติของพวกเขา ตัวทำละลายอินทรีย์ (เอทานอล isopropanol อะซิ โตนacetonitrile) และ surfactants (แต่ 20, 80 แต่ และไทรทัน X -100) ไม่มีผลต่อกิจกรรมการต้านจุลชีพของ bacteriocins เหล่านี้คะแนนเฉลียจากรเมทมิกส์ไอออไนซ์ มวลโมเลกุลBac7293A และ B ถูกกำหนดเป็น 6,249.302 และ 6,489.716 ดาตามลาดับ โครงสร้างและสังเคราะห์ Bac7293A และ Bwill ต้องการสืบสวนเพิ่มเติมเพื่อความเข้าใจอันดีเกี่ยวกับโมเลกุลของพวกเขาลักษณะ ตั้งแต่วิธีการดั้งเดิมสำหรับกรดอะมิโนได้ให้นัยสำคัญลำดับ โดยลด Edman อะมิโนลำดับกรดของ bacteriocins ทั้งสอง วิธีการ proteogenomic มีการใช้การเข้าถึงโครงสร้างหลัก วันที่ ลำดับกรดอะมิโนของ Bac7293A ได้รับในปัจจุบันเปิดเผย (Tosukhowong et al.,ส่งเพื่อเผยแพร่

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ในห้องปฏิบัติการของเรา, นวนิยายสาม bacteriocins ชั้น IID ผลิตโดย LAB
ที่แยกได้จากไส้กรอกหมูหมักไทยรู้จักกันเป็นแหนม.
Garvieacin Q หรือ GarQ ผลิตโดย Lactococcus garvieae BCC 42,578 มี
70 กรดอะมิโนที่มีความยาว 20 ซึ่งเป็นกรดอะมิโน N- สถานี
sequencewhich ผู้นำจะเกาะติดอยู่ที่เว็บไซต์ Gly-Gly เพื่อสร้าง themature
GarQ มีมวลโมเลกุล 5339 ดาว์ของ 9.73 และสุทธิ 2 บวก
ค่าใช้จ่าย (Tosukhowong et al., 2012) GarQ ถูกจัดเป็นชั้น IID
bacteriocin เพราะมันไม่ได้มีกรดอะมิโนใด ๆ แก้ไขไม่มีอนุรักษ์
แม่ลาย YGNGVXC ในโมเลกุลและมีฤทธิ์ต้านจุลชีพของมัน
โดยไม่จำเป็นต้องของเปปไทด์เสริมอื่น ๆ GarQ ใน
ช่วงความเข้มข้นของไมโครโมล, แสดงสเปกตรัมต้านเชื้อแบคทีเรีย
กับสายพันธุ์ต่างๆของเชื้อแบคทีเรียที่เกี่ยวข้องอย่างใกล้ชิดลิตร garvieae เช่น
เดียวกับ faecium Enterococcus อาจทำให้เกิดโรคและเชื้อ Listeria
monocytogenes อย่างไรก็ตาม GarQ ไม่ได้เคลื่อนไหวต่อต้านเชื้อ Staphylococcus
aureus และเชื้อโรคเนื้อสัตว์ที่มีเชื้อแกรมลบอื่น ๆ รวมทั้ง
เชื้อ Escherichia coli และ Salmonella Typhimurium GarQ สะสมต้านจุลชีพของ
กิจกรรมในช่วงค่า pH ของ awide 2-8 แม้ต่อไปนี้การรักษาความร้อน
ที่อุณหภูมิ 100 องศาเซลเซียสนาน 15 นาที การสูญเสียที่สมบูรณ์ของฤทธิ์ต้านจุลชีพของมัน
ถูกพบเมื่อถูกความร้อนที่อุณหภูมิ 121 องศาเซลเซียสนาน 15 นาที บริสุทธิ์ GarQ ถึง
1 มิลลิกรัม / มิลลิลิตรไม่ได้พิษต่อเวโร (แอฟริกันไตลิงสีเขียว)
HepG2 (hepatocarcinoma ตับมนุษย์) และ Caco-2 (มนุษย์ลำไส้ใหญ่มะเร็ง)
เซลล์เป็นที่ตรวจพบโดย MTT [3- (4, 5-dimethyl-2-
thiazolyl) -2,5-diphenyl-2H-tetrazolium โบรไมด์] ทดสอบ.
นอกเหนือจาก GarQ อีกสอง bacteriocins นวนิยาย bacteriocins
7293A (Bac7293A) และ B (Bac7293B) จาก Weissella Hellenica BCC
7293 ได้รับ เพิ่งค้นพบ (Woraprayote et al., 2015) ซึ่งแตกต่างจาก
GarQ ทั้งสอง bacteriocins ยับยั้งการออกฤทธิ์กว้างของเชื้อแบคทีเรียรวมทั้ง
ที่เกิดจากอาหารที่ทำให้เกิดโรคลิสทิเรียโมโนไซโต จิเนส , Staphylococcus aureus,
Salmonella Typhimurium, Escherichia coli, ตลอดจนอาหารที่เน่าเสีย Pseudomonas
aeruginosa และเชื้อ Aeromonas ทั้งกิจกรรมการแสดง
ผ่านโหมดการฆ่าเชื้อแบคทีเรียของการดำเนินการกับทั้งแกรมบวกและ
แบคทีเรียแกรมลบโดยไม่ต้องเซลล์สลาย Bac7293A แสดงให้เห็นมากขึ้น
ฤทธิ์ต้านจุลชีพ แต่ค่า pH ต่ำกว่าและเสถียรภาพทางความร้อนเมื่อเทียบ
กับคุณสมบัติของผู้ Bac7293B กิจกรรมต้านจุลชีพของทั้งสอง
bacteriocins ถูกใช้งานอย่างสมบูรณ์โดยเอนไซม์โปรตีนเช่น
trypsin, α-chymotrypsin, เปปซินและโปรติเอส K แต่เปปไทด์
ที่ยังคงใช้งานได้หลังจากรับการรักษาด้วยเอนไซม์ไลเปสและอะไมเลสบอก
ธรรมชาติโปรตีนของพวกเขา ตัวทำละลายอินทรีย์ (เอทานอล isopropanol อะซีโตน,
acetonitrile) และลดแรงตึงผิว (Tween 20 Tween 80 และ Triton X-
100) ไม่ได้ส่งผลกระทบต่อฤทธิ์ต้านจุลชีพของ bacteriocins เหล่านี้.
จาก electrospray ไอออนไนซ์มวลสารมวลโมเลกุล
ของ Bac7293A และ B ได้รับการพิจารณา จะเป็น 6,249.302 และ 6,489.716 ดา
ตามลำดับ โครงสร้างและการสังเคราะห์ของ Bac7293A และ Bwill จำเป็นต้องมี
การสอบสวนเพิ่มเติมเพื่อความเข้าใจที่ดีขึ้นเกี่ยวกับโมเลกุล
ลักษณะ ตั้งแต่วิธีการแบบดั้งเดิมสำหรับกรดอะมิโน
ลำดับโดยการย่อยสลาย Edman ไม่สามารถให้อะมิโนที่สำคัญ
ลำดับกรดของทั้งสอง bacteriocins วิธี proteogenomic ได้
ถูกนำมาใช้ในการเข้าถึงโครงสร้างหลักของพวกเขา ในวันที่ลำดับกรดอะมิโน
ของ Bac7293A ได้รับการเปิดเผยในขณะนี้ (Tosukhowong et al.,
ส่งสำหรับการตีพิมพ์