2.6. Amino acid analysesFor amino a

2.6. Amino acid analyses
For amino acid determination, the samples were prepared
using 6 N hydrochloric acid as described previously
(Velu & Munuswamy, 2003). The peptides with N-terminal
primary amines were derivatized using O-phthaldialdehyde
(OPA) reagent (Hewlett–Packard, Palo Alto, CA, USA)
(Lee & Drescher, 1978) and the resulting diastereomerswere separated by ion exchange chromatography. Based on
the positive charge and ionic strength of amino acids, they
bind to the sulphonic group or to the silica matrix. The
entire amino acids move through the column at different
rate, based on their pK values, but also in part on their
adsorption or solubility in the silica particle. The amino
acid levels were determined using a reverse-phase high-performance
liquid chromatography system (Hewlett–Packard
model 1100 series, Hewlett–Packard, Palo Alto, CA, USA)
equipped with a Hypersil AA-ODS silica based C18 column
(200 mm · 2.1 mm) (Hewlett–Packard, Palo Alto,
CA, USA). Sodium acetate buffer (20 mM) with tetrahydrofuran
(3 ml L1) was prepared and adjusted to a pH
of 7.2 with 1% acetic acid and to this mixture triethylamine
(180 ml L1) was added and the pH was rechecked (mobile
phase A). Sodium acetate buffer (20 mM) was prepared
and adjusted to a pH 7.2, and methanol (400 ml L1)
and acetonitrile (400 ml L1) was added (mobile phase
B). The separation was achieved using a gradient program
by utilizing the two mobile phases according to the procedure
described by the manufacturer (Hewlett–Packard,
Palo Alto, CA, USA). Individual amino acids were identified
by comparing their retention times with those of amino
acid standards (HP 5062–2478, Hewlett–Packard, Palo
Alto, CA, USA) run under identical conditions and
expressed as percentage of total amino acids.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.6 วิเคราะห์กรดอะมิโนได้เตรียมตัวอย่างสำหรับการกำหนดกรดอะมิโนใช้ 6 N กรดไฮโดรคลอริกตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้(เวฬุ & Munuswamy, 2003) เปปไทด์กับเทอร์มินัล Namines หลักได้ derivatized ใช้ O-phthaldialdehydeรีเอเจนต์ (OPA) (Hewlett – Packard ดัลลัส CA, USA)(Lee และ Drescher, 1978) และ diastereomerswere ได้ที่คั่น ด้วย chromatography แลกเปลี่ยนไอออน ขึ้นอยู่กับค่าบวกและ ionic ความแรงของกรดอะมิโน พวกเขาผูกกลุ่ม sulphonic หรือเมทริกซ์ซิลิก้า ที่กรดอะมิโนทั้งหมดเลื่อนคอลัมน์ที่แตกต่างกันอัตรา ตามค่า pK แต่ยังเป็นบางส่วนของพวกเขาดูดซับหรือละลายในอนุภาคซิลิกา อะมิโนระดับกรดถูกกำหนดใช้การย้อนกลับขั้นตอนมีประสิทธิภาพสูงระบบของเหลว chromatography (Hewlett – Packardรุ่น 1100 ชุด Hewlett – Packard ดัลลัส CA, USA)พร้อมกับการ Hypersil AA-ODS นส่วนตามคอลัมน์ C18(200 mm · 2.1 mm) (Hewlett – Packard ดัลลัสCA, USA) โซเดียม acetate บัฟเฟอร์ (20 mM) กับ tetrahydrofuranเตรียม และปรับค่า pH (3 ml L 1)ของ 7.2 ด้วยกรดอะซิติก 1% และ triethylamine ส่วนผสมนี้เข้ามา (180 ml L 1) และ pH ได้น้อย ๆ (โทรศัพท์มือถือระยะ A) มีเตรียมบัฟเฟอร์ acetate โซเดียม (20 mM)และปรับปรุงค่า pH 7.2 และเมทานอล (400 ml L 1)และเพิ่ม acetonitrile (400 ml L 1) (ระยะเคลื่อนข. แยกสำเร็จโดยใช้โปรแกรมไล่ระดับโดยใช้เฟสเคลื่อนที่สองตามขั้นตอนโดยผู้ผลิต (Hewlett – Packardดัลลัส CA สหรัฐอเมริกา) กรดอะมิโนแต่ละที่ระบุโดยการเปรียบเทียบเวลาเก็บรักษาของพวกเขากับอะมิโนกรดมาตรฐาน (HP 5062-2478, Hewlett – Packard, Paloอัลโต้ CA, USA) ทำงานภายใต้เงื่อนไขที่เหมือนกัน และแสดงเป็นเปอร์เซ็นต์ของกรดอะมิโนทั้งหมด

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.6 วิเคราะห์กรดอะมิโน
สำหรับความมุ่งมั่นของกรดอะมิโนตัวอย่างที่ถูกจัดทำขึ้น
โดยใช้ 6 N กรดไฮโดรคลอตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้
(Velu & Munuswamy 2003) เปปไทด์ที่มี n- ขั้ว
เอมีนหลักถูก derivatized ใช้ O-phthaldialdehyde
(OPA) สาร (Hewlett-Packard, พาโลอัลโต, สหรัฐอเมริกา)
(Lee & Drescher, 1978) และ diastereomerswere ผลแยกจากกันโดยโคแลกเปลี่ยนไอออน ขึ้นอยู่กับ
ประจุบวกและความแข็งแรงของอิออนของกรดอะมิโนที่พวกเขา
ผูกกับกลุ่ม sulphonic หรือเมทริกซ์ซิลิกา
กรดอะมิโนทั้งย้ายผ่านคอลัมน์ที่แตกต่างกัน
อัตราขึ้นอยู่กับค่าเภสัชจลนศาสตร์ของพวกเขา แต่ยังอยู่ในส่วนที่เกี่ยวกับของพวกเขา
ดูดซับหรือละลายในอนุภาคซิลิกา อะมิโน
ระดับกรดได้รับการพิจารณาโดยใช้เฟสย้อนกลับที่มีประสิทธิภาพสูง
ระบบของเหลว chromatography (Hewlett-Packard
รุ่น 1100 ซีรีส์, Hewlett-Packard, Palo Alto, CA, USA)
พร้อมกับ Hypersil ซิลิกา AA-ODS คอลัมน์ตาม C18
(200 มิลลิเมตร · 2.1 มิลลิเมตร) (Hewlett-Packard, Palo Alto,
CA, USA) โซเดียมอะซิเตตบัฟเฟอร์ (20 มิลลิเมตร) ที่มี tetrahydrofuran
(3 มล. L? 1) จัดทำและปรับค่าพีเอช
7.2 1% กรดอะซิติกและ triethylamine ส่วนผสมนี้
(180 มล L? 1) ได้รับการเพิ่มและค่า pH ที่ถูก rechecked ( โทรศัพท์มือถือ
ขั้นตอน) โซเดียมอะซิเตตบัฟเฟอร์ (20 มิลลิเมตร) ถูกจัดทำขึ้น
และปรับให้มีค่า pH 7.2 และเมทานอล (400 มล. L? 1)
และ acetonitrile (400 มล. L? 1) ถูกบันทึก (เฟสเคลื่อนที่
B) แยกก็ประสบความสำเร็จโดยใช้โปรแกรมการไล่ระดับสี
โดยใช้โทรศัพท์มือถือสองขั้นตอนตามขั้นตอน
ที่อธิบายไว้โดยผู้ผลิต (Hewlett-Packard,
Palo Alto, CA, USA) กรดอะมิโนส่วนบุคคลที่ถูกระบุ
โดยการเปรียบเทียบเวลาการเก็บรักษาของพวกเขากับพวกอะมิโน
กรดมาตรฐาน (HP 5062-2478, Hewlett-Packard, Palo
Alto, CA, USA) ทำงานภายใต้เงื่อนไขที่เหมือนกันและ
แสดงเป็นร้อยละของกรดอะมิโนรวม

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.6 การวิเคราะห์กรดอะมิโนกรดอะมิโน
สำหรับการคำนวณจำนวนเตรียม
6 N ใช้กรดเกลือตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้
( velu & munuswamy , 2003 ) และ เปปไทด์ กรดอะมิโนกับเอมีนปฐมภูมิ คือการ o-phthaldialdehyde derivatized

( OPA ) Reagent ( Hewlett - Packard , พาโลอัลโต , แคลิฟอร์เนีย , สหรัฐอเมริกา )
( & Drescher ลี ,2521 ) และผล diastereomerswere แยกโดยโครมาโตกราฟีแลกเปลี่ยนไอออน ขึ้นอยู่กับความแรงของไอออนประจุบวก
และกรดอะมิโน พวกเขา
ผูกกับกลุ่ม sulphonic หรือซิลิกาเมทริกซ์
ทั้งหมดกรดอะมิโนที่ย้ายผ่านคอลัมน์ในอัตราที่แตกต่างกัน
, ตามค่า PK ของพวกเขา แต่ยังเป็นส่วนหนึ่งในการดูดซับหรือการละลายของพวกเขา
ในส่วนของอนุภาค อะมิโน
ระดับกรดถูกกำหนดใช้ขั้นตอนย้อนกลับที่มีประสิทธิภาพสูง
liquid chromatography ( Hewlett - Packard ระบบ
รุ่น 1100 ชุด , Hewlett - Packard , พาโลอัลโต , แคลิฟอร์เนีย , สหรัฐอเมริกา )
พร้อมขน aa-ods ซิลิกาคอลัมน์ ( c18
ตามด้วย 200 มม. 2.1 มม. ) ( Hewlett - Packard , Palo Alto ,
CA , USA ) . โซเดียมอะซิเตทบัฟเฟอร์ ( 20 มม. ) กับเตตระไฮโดรฟแรน
( 3 ml ผม  1 ) ถูกเตรียมและปรับ pH
7 .2 กับ 1% กรดอะซิติกและส่วนผสมนี้ไตรเอตทิลามีน
( 180 มล. ล.  1 ) คือการเพิ่มและ pH rechecked ( มือถือ
เฟส ) โซเดียมอะซิเตทบัฟเฟอร์ ( 20 มม. ) เพื่อเตรียม
และปรับ pH 7.2 และเมทานอล ( 400 ml ผม  1 )
( L  400 มิลลิลิตร และไนเพิ่ม ( 1 ) เป็นเฟสเคลื่อนที่
b ) การใช้โปรแกรมทำสีโดยการใช้ 2 มือถือ

ขั้นตอนตามขั้นตอนบรรยายโดยผู้ผลิต ( Hewlett - Packard ,
พาโลอัลโต แคลิฟอร์เนีย สหรัฐอเมริกา ) แต่ละกรดอะมิโนถูกระบุโดยการเปรียบเทียบความคงทนของ
ครั้งด้วยมาตรฐานกรดอะมิโน
( HP ( Hewlett - Packard 2478 5062 , พาโลอัลโต ,
, CA , USA ) ทำงานภายใต้เงื่อนไขที่เหมือนกันและ
แสดงเป็นเปอร์เซ็นต์ของผลรวมกรดอะมิโน