An extracellular acid phytase was purified to homogeneity from the culture supernatant of the Saccharomyces cerevisiae CY strain by ultrafiltration, DEAE-Sepharose column chromatography, and Sephacryl S-300 gel filtration. The molecular weight of the purified enzyme was estimated to be 630 kDa by gel filtration. Removing the sugar chain by endoglycosidase H digestion revealed that the molecular mass of the protein decreased to 446 kDa by gel filtration and gave a band of 55 kDa by SDS-PAGE. The purified enzyme was most active at pH 3.6 and 40 °C and was fairly stable from pH 2.5 to 5.0. The phytase displayed broad substrate specificity and had a Km value of 0.66 mM (sodium phytate, pH 3.6, 40 °C). The phytase activity was completely inhibited by Fe3+ and Hg2+, and strongly inhibited (maximum of 91%) by Ba2+, Co2+, Cu+, Cu2+, Fe2+, Mg2+, and Sn2+ at 5 mM concentrations.
คุณสมบัติเป็นกรด extracellular ที่บริสุทธิ์เพื่อ homogeneity จาก supernatant วัฒนธรรมของ Saccharomyces cerevisiae ต้องใช้ CY โดย ultrafiltration, DEAE Sepharose คอลัมน์ chromatography กรองเจ Sephacryl S-300 น้ำหนักโมเลกุลของเอนไซม์บริสุทธิ์ถูกประเมินเป็น 630 kDa ด้วยเจลอาบน้ำ เอาโซ่น้ำตาล โดยย่อยอาหาร endoglycosidase H เปิดเผยว่า มวลโมเลกุลของโปรตีนลดการ 446 kDa กรองเจ และให้วงของ kDa 55 โดย SDS-หน้า เอนไซม์บริสุทธิ์ถูกใช้งานมากที่สุดที่ pH 3.6 และ 40 ° C และมีเสถียรภาพค่อนข้างจากค่า pH 2.5-5.0 คุณสมบัติที่แสดงพื้นผิวที่กว้าง specificity และมีค่า Km 0.66 มม. (phytate โซเดียม ค่า pH 3.6, 40 ° C) กิจกรรมคุณสมบัติทั้งหมดถูกห้าม โดย Fe3 และ Hg2 และขอห้าม (จำนวน 91%) โดย Ba2, Co2, Cu, Cu2, Fe2, Mg2 และรายการ Sn2 ที่ความเข้มข้น 5 มม.
การแปล กรุณารอสักครู่..

การใช้กรดบริสุทธิ์และวิธีการจากวัฒนธรรมที่นำของสายพันธุ์ Saccharomyces cerevisiae ไซโดยกรอง , การทำเกี่ยวข้องคอลัมน์โครมาโทกราฟี และ sephacryl s-300 เจลการกรอง น้ำหนักโมเลกุลของเอนไซม์ประมาณจะ 630 กิโลดาลตันโดยเจลฟิลเตร .เอาน้ำตาลโซ่ endoglycosidase H การย่อย พบว่า มวล โมเลกุลของโปรตีนลดลง 446 เชื้อโดยการกรองและเจลให้วง 55 กิโลดาลตันถูก . เอนไซม์ที่ถูกใช้งานมากที่สุดที่ pH 3.6 และ 40 ° C และค่อนข้างคงที่จาก pH 2.5 - 5.0 . ที่ใช้แสดงความจำเพาะและมีพื้นผิวกว้าง กม. มูลค่า 0.66 มม. ( โซเดียมไฟเตต pH 3.6 40 ° C )การใช้กิจกรรมถูกยับยั้งได้โดย fe3 และ hg2 และขอยับยั้ง ( สูงสุด 91% ) โดย ba2 , CO2 , Cu , CU2 fe2 mg2 , , , และ sn2 ที่ความเข้มข้น 5 มิลลิเมตร
การแปล กรุณารอสักครู่..
