3.3. Extraction and isolation
The air-dried and powdered roots and stems of Tiandeng
tobacco (5.0 kg) were extracted four times with 70% aqueous
acetone (3 12 L) at room temperature and filtered.
The solvent was evaporated in vacuo, and the crude extract was dissolved in
H2O and partitioned with EtOAc.
The EtOAc partition (140 g) was applied to silica gel (200–300 mesh) column chromatography,
eluting with a CHCl3–(CH3)2CO gradient system (10:0, 9:1, 8:2, 7:3,
6:4, 5:5, 0:10), to give six fractions A–F.
Further separation of fraction B (9:1, 52.4 g) by silica gel column chromatography, eluted
with CHCl3–(CH3)2CO (15:1–2:1), yielded mixtures B1–B6.
Fraction B1 (15:1, 5.8 g) was subjected to silica gel column
chromatography using petroleum ether–acetone and preparative
HPLC (55% MeOH–H2O, flow rate 12 mL/min) to give 6 (1.8 mg).
Fraction B2 (10:1, 3.4 g) was subjected to silica gel column
chromatography using petroleum ether–acetone and preparative
HPLC (52% MeOH–H2O, flow rate 12 mL/min) to give 1 (5.6 mg), 2
(3.6 mg), and 3 (20.4 mg). Fraction B3 (6:1, 7.2 g) was subjected to
silica gel column chromatography using CHCl3–(CH3)2CO and
Fig. 3. Key ROESY ( ) correlation of 1.
Table 2
TMV infection inhibition activity of compounds 1–6.
Compounds Inhibition
rates (%)
Compounds Inhibition
rates (%)
1 20.6 3.1 5 21.8 2.8
2 38.8 3.3 6 23.5 3.0
3 17.4 2.5 Ningnamycin 31.5 3.0
4 15.7 2.2
All results are expressed as mean SD; n = 3 for all groups.
W. Zhao et al. / Phytochemistry Letters 12 (2015) 125–128 127
preparative HPLC (49% MeOH–H2O, flow rate 12 mL/min) to give 4
(2.2 mg) and 5 (30.5 mg).
3.3. Extraction and isolationThe air-dried and powdered roots and stems of Tiandengtobacco (5.0 kg) were extracted four times with 70% aqueousacetone (3 12 L) at room temperature and filtered. The solvent was evaporated in vacuo, and the crude extract was dissolved inH2O and partitioned with EtOAc. The EtOAc partition (140 g) was applied to silica gel (200–300 mesh) column chromatography,eluting with a CHCl3–(CH3)2CO gradient system (10:0, 9:1, 8:2, 7:3,6:4, 5:5, 0:10), to give six fractions A–F. Further separation of fraction B (9:1, 52.4 g) by silica gel column chromatography, elutedwith CHCl3–(CH3)2CO (15:1–2:1), yielded mixtures B1–B6. Fraction B1 (15:1, 5.8 g) was subjected to silica gel columnchromatography using petroleum ether–acetone and preparativeHPLC (55% MeOH–H2O, flow rate 12 mL/min) to give 6 (1.8 mg).Fraction B2 (10:1, 3.4 g) was subjected to silica gel columnchromatography using petroleum ether–acetone and preparativeHPLC (52% MeOH–H2O, flow rate 12 mL/min) to give 1 (5.6 mg), 2(3.6 mg), and 3 (20.4 mg). Fraction B3 (6:1, 7.2 g) was subjected tosilica gel column chromatography using CHCl3–(CH3)2CO andFig. 3. Key ROESY ( ) correlation of 1.Table 2TMV infection inhibition activity of compounds 1–6.Compounds Inhibitionrates (%)Compounds Inhibitionrates (%)1 20.6 3.1 5 21.8 2.82 38.8 3.3 6 23.5 3.03 17.4 2.5 Ningnamycin 31.5 3.04 15.7 2.2All results are expressed as mean SD; n = 3 for all groups.W. Zhao et al. / Phytochemistry Letters 12 (2015) 125–128 127preparative HPLC (49% MeOH–H2O, flow rate 12 mL/min) to give 4(2.2 mg) and 5 (30.5 mg).
การแปล กรุณารอสักครู่..
3.3 การสกัดและการแยกรากอากาศแห้งและผงและลำต้นของ Tiandeng ยาสูบ (5.0 กิโลกรัม) ถูกสกัดสี่ครั้งกับ 70% น้ำอะซิโตน(3 12 L) ที่อุณหภูมิห้องและกรอง. ตัวทำละลายระเหยในสุญญากาศและสารสกัดหยาบ ถูกละลายใน. H2O และแบ่งพาร์ติชันที่มี EtOAc พาร์ทิชัน EtOAc (140 กรัม) ถูกนำไปใช้ซิลิกาเจล (200-300 ตาข่าย) คอลัมน์, เคลือบด้วย CHCl3- (CH3) ระบบการไล่ระดับสี 2CO (10: 0, 9: 1, 8: 2, 7: 3, 6: 4, 5: 5, 00:10) เพื่อให้หกเศษส่วน A-F. แยกต่อไปของส่วน B (9: 1, 52.4 กรัม) โดยซิลิกาคอลัมน์เจลชะที่มี CHCl3- (CH3) 2CO (15: 1-2: 1) ผลผสม B1-B6. เศษ B1 (15: 1, 5.8 กรัม) ก็ยังถูกคอลัมน์ซิลิกาเจลโคโดยใช้อีเทอร์อะซีโตนปิโตรเลียมและเตรียมHPLC (55% เมธานอล-H2O, อัตราการไหล 12 มิลลิลิตร / นาที) เพื่อให้ 6 (1.8 มก.). เศษบี 2 (10: 1, 3.4 กรัม) ก็ยังถูกคอลัมน์ซิลิกาเจลโคโดยใช้อีเทอร์อะซีโตนปิโตรเลียมและเตรียมHPLC (52% เมธานอล-H2O อัตราการไหล 12 มิลลิลิตร / นาที) เพื่อให้ 1 (5.6 มก.) 2 (3.6 มก.) และ 3 (20.4 มก.) ส่วน B3 (6: 1, 7.2 กรัม) ก็ยังถูกคอลัมน์ซิลิกาเจลโดยใช้CHCl3- (CH3) 2CO และรูป 3. ที่สำคัญ ROESY () 1. ความสัมพันธ์ของตารางที่2 TMV ฤทธิ์ยับยั้งการติดเชื้อของสาร 1-6. สารยับยั้งอัตรา (%) สารยับยั้งอัตรา (%) 1 20.6? 3.1 5 21.8? 2.8 2 38.8? 3.3 6 23.5? 3.0 3 17.4? 2.5 Ningnamycin 31.5? 3.0 4 15.7? 2.2 ผลทั้งหมดจะแสดงเป็นค่าเฉลี่ย? SD; n = 3 ทุกกลุ่ม. ดับบลิว Zhao et al, / พฤกษเคมีตัวอักษร 12 (2015) 125-128 127 เตรียม HPLC (เมธานอล 49%-H2O, อัตราการไหล 12 มิลลิลิตร / นาที) เพื่อให้ 4 (2.2 มก.) และ 5 (30.5 มก.)
การแปล กรุณารอสักครู่..
3.3 . การสกัดและการแยก
อากาศแห้งและรากและลำต้นของ tiandeng
ผงยาสูบ ( 5.0 กิโลกรัม ) ถูกสกัดสี่ครั้งด้วยสารละลายอะซิโตน ( 70 %
3 12 ลิตร ) ที่อุณหภูมิห้อง และกรอง
ละลายอยู่ใน vacuo ระเหยและสารสกัดละลายใน
h2o และกั้นด้วย etoac .
การ etoac พาร์ทิชัน ( 140 กรัม ) ใช้ซิลิกาเจล ( 200 – 300 ตาข่าย ) คอลัมน์ chromatography ,
hexane ด้วย chcl3 – ( CH3 ) ระบบลาด 2CO ( 10:0 09 : 01 , , 8 : 2 , 7 : 3 ,
6 : 4 , 5 : 5 , 0 : 10 ) เพื่อให้ 6 เศษส่วนเป็น– F .
เพิ่มเติมการแยกเศษส่วน B ( 9 : 1 52.4 , G ) โดยซิลิกาเจลคอลัมน์ chromatography , ตัวอย่าง
กับ chcl3 – ( CH3 ) 2CO ( 15 : 1 และ 2 : 1 ) เมื่อผสม B1 ) B6
ส่วน 1 ( 15 : 1 58 g ) ภายใต้คอลัมน์โครมาโทกราฟีซิลิกาเจลโดยใช้ปิโตรเลียมอีเทอร์ (
=
) และ สูง ( 55 % ) ปริมาณ H2O , อัตราการไหล 6 มิลลิลิตรต่อนาที ) เพื่อให้ 6 ( 1.8 ลิตร )
2 ( 10 : 1 ) 3.4 g ) ภายใต้คอลัมน์โครมาโตกราฟฟีโดยใช้ปิโตรเลียมอีเทอร์
ซิลิกาเจลและอะซิโตน =
และ HPLC ( 52% ) H2O ปริมาณอัตราการไหล 6 มิลลิลิตรต่อนาที ) เพื่อให้ 1 ( 5.6 มิลลิกรัม ) 2
( 3.6 มิลลิกรัม ) และ 3 ( 20.4 มิลลิกรัม ) ส่วน B3 ( 6 : 1 , 7 .2 g ) ภายใต้
คอลัมน์โครมาโตกราฟฟีโดยใช้ซิลิกาเจล chcl3 – 2CO ( CH3 ) และ
รูปที่ 3 คีย์ roesy ( ) ความสัมพันธ์ของตาราง 1 .
2
tmv การติดเชื้อยับยั้งกิจกรรมของสารประกอบ 1 – 6
สารยับยั้งสารยับยั้งอัตรา ( % )
1 อัตรา ( % ) ว่า 3.1 5 21.8 2.8
2 38.8 3.3 6 23.5 3.0
3 2.5 ningnamycin 31.5 ขับไล่ 3.0
4
4 2.2 ผลทั้งหมดจะแสดงเป็นค่าเฉลี่ย SD ;N = 1 สำหรับทุกกลุ่ม
W . Zhao et al . / พฤกษเคมีตัวอักษร 12 ( 2015 ) 125 – 128 127
2 = ( 49% ) H2O ปริมาณอัตราการไหล 6 มิลลิลิตรต่อนาที ) เพื่อให้ 4
( 2.2 มิลลิกรัม ) และ 5 ( 30.5 มิลลิกรัม )
การแปล กรุณารอสักครู่..