Next we looked at the effect that t

Next we looked at the effect that the presence of monocot
introns might have on GUS expression levels since the Ubi1 and
Act1 promoter-containing fragments used here also contain an
intron in their untranslated leader region (Fig. 1). It is well
established that addition of an intron such as the first introns from
the maize Adh1 and rice Act1 genes to the primary transcript can
dramatically increase gene expression levels in transformed monocots
(McElroy et al., 1991). For example, GUS expression in
transformed maize cells increased 6- and 60-fold when the Act1
and Adh1 first introns, respectively, were added to a 35S- gusA
chimeric gene. In contrast to maize, GUS expression was reduced
1.25- and 3-fold in Gladiolus when the Adh1 and Act1 first introns,
respectively, were added to a 35S- gusA chimeric gene (data not
shown). Results similar to those with Gladiolus were found when
petunia was bombarded with the exact same intron-containing
plasmids (data not shown). These results clearly indicated that
GUS expression was not stimulated in Gladiolus cells with the
addition of monocot introns to the gusA transcript. This observation
suggested that splicing of monocot introns may be relatively
inefficient in Gladiolus, a nongraminaceous monocot, as it is in
dicots such as petunia. Alternatively, stimulation in gene expression
by introns may be a feature that is generally limited to
graminaceous monocots like maize and rice.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ต่อไปเรามองไปที่ผลกระทบที่การปรากฏตัวของใบเลี้ยงเดี่ยว
introns อาจมีระดับการแสดงออก GUS ตั้งแต่ Ubi1 และ
Act1 เศษโปรโมเตอร์ที่มีใช้ที่นี่ยังประกอบด้วย
intron ในภูมิภาคผู้นำของพวกเขาไม่ได้แปล (รูปที่ 1). มันเป็นอย่างดี
เป็นที่ยอมรับว่านอกเหนือจาก intron เช่น introns แรกจาก
ข้าวโพดยีน Adh1 และข้าว Act1 กับหลักฐานหลักสามารถ
เพิ่มขึ้นอย่างมากในระดับการแสดงออกของยีนในพืชใบเลี้ยงเดี่ยวเปลี่ยน
(McElroy et al., 1991) ยกตัวอย่างเช่นการแสดงออก GUS ใน
เซลล์ข้าวโพดเปลี่ยนเพิ่มขึ้น 6 และ 60 เท่าเมื่อ Act1
และ Adh1 introns แรกตามลำดับได้เพิ่มให้กับ 35S- gusA
ยีนลูกผสม ในทางตรงกันข้ามกับข้าวโพดแสดงออก GUS ลดลง
1.25- และ 3 เท่าในจำพวกเมื่อ Adh1 และ Act1 introns แรก
ตามลำดับถูกเพิ่มเข้าไปในยีนลูกผสม 35S- gusA (ข้อมูลไม่
แสดง) ผลที่คล้ายกันกับผู้ที่มีพืชไม้ดอกถูกพบเมื่อ
พิทูเนียถูกถล่มด้วยเหมือนกัน intron ที่มี
พลาสมิด (ไม่ได้แสดงข้อมูล) ผลการศึกษานี้แสดงให้เห็นอย่างชัดเจนว่า
การแสดงออกกัสไม่ได้ถูกกระตุ้นในเซลล์พืชไม้ดอกที่มี
การเพิ่มของ introns ใบเลี้ยงเดี่ยวกับหลักฐาน gusA ข้อสังเกตนี้
ชี้ให้เห็นว่าประกบของ introns ใบเลี้ยงเดี่ยวอาจจะค่อนข้าง
ไม่มีประสิทธิภาพในจำพวกเป็นใบเลี้ยงเดี่ยว nongraminaceous ตามที่มันเป็นใน
dicots เช่นพิทูเนีย อีกวิธีหนึ่งคือการกระตุ้นในการแสดงออกของยีน
โดย introns อาจจะเป็นคุณลักษณะที่มี จำกัด ให้เป็น
พืชใบเลี้ยงเดี่ยว graminaceous เช่นข้าวโพดและข้าว

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ต่อไปเราจะดูที่ผลว่า การปรากฏตัวของพืชใบเลี้ยงเดี่ยวintrons อาจมีในระดับการแสดงออกกัสตั้งแต่ ubi1 และact1 เศษที่มีการใช้ที่นี่ก็มีในเขตของหัวหน้า iNtRON นี่ ( รูปที่ 1 ) มันเป็นอย่างดีก่อตั้งขึ้นที่ 1 ของ iNtRON เช่นแรก introns จากข้าวโพดและข้าว act1 adh1 ยีนที่จะสำเนาหลักสามารถเพิ่มระดับการแสดงออกของยีนในพืชใบเลี้ยงเดี่ยว แปลง( McElroy et al . , 1991 ) ตัวอย่างเช่น กัส การแสดงออกในแปลงข้าวโพดเซลล์เพิ่มขึ้น 6 - 60 เท่าเมื่อ act1และ adh1 แรก introns ตามลำดับเพิ่มเพื่อ 35s - gusaที่จีน ในทางตรงกันข้ามกับการแสดงออกกัสทำให้ข้าวโพด1.25 - 3-fold ในแกลดิโอลัสเมื่อ adh1 act1 introns และครั้งแรก ,ตามลำดับ มีเพิ่มเป็น 35s - gusa ยีนที่ไม่เป็นจริง ( ข้อมูลไม่แสดง ) ผลที่คล้ายกันที่มีดอกแกลดิโอลัส พบเมื่อพิทูเนีย ถูกระดม iNtRON ที่มีเดียวกันแน่นอนพลาสมิด ( ข้อมูลไม่แสดง ) ผลลัพธ์เหล่านี้ชี้ให้เห็นว่าการแสดงออกของกัสไม่กระตุ้นในแกลดิโอลัสเซลล์กับเพิ่มของพืชใบเลี้ยงเดี่ยว introns กับ gusa ใบรับรองผลการศึกษา การสำรวจครั้งนี้แนะนำว่า splicing ของพืชใบเลี้ยงเดี่ยว introns อาจจะค่อนข้างไม่มีประสิทธิภาพใน แกลดิโอลัส เป็นพืชใบเลี้ยงเดี่ยว nongraminaceous ตามที่มันเป็นในเป็น เช่น เพ็ตทูเนีย อีกวิธีหนึ่งคือ การกระตุ้นการแสดงออกของยีนในโดย introns อาจจะเป็นคุณลักษณะที่มักจะ จำกัดgraminaceous พืชใบเลี้ยงเดี่ยวเช่น ข้าวโพดเลี้ยงสัตว์ และข้าว