The ELISA has been used as a diagno

The ELISA has been used as a diagnostic tool in medicine and plant pathology, as well as a quality-control check in various industries.

Antigens from the sample are attached to a surface. Then, a further specific antibody is applied over the surface so it can bind to the antigen. This antibody is linked to an enzyme, and, in the final step, a substance containing the enzyme's substrate is added. The subsequent reaction produces a detectable signal, most commonly a color change in the substrate.

Performing an ELISA involves at least one antibody with specificity for a particular antigen. The sample with an unknown amount of antigen is immobilized on a solid support (usually a polystyrene microtiter plate) either non-specifically (via adsorption to the surface) or specifically (via capture by another antibody specific to the same antigen, in a "sandwich" ELISA). After the antigen is immobilized, the detection antibody is added, forming a complex with the antigen. The detection antibody can be covalently linked to an enzyme, or can itself be detected by a secondary antibody that is linked to an enzyme through bioconjugation. Between each step, the plate is typically washed with a mild detergent solution to remove any proteins or antibodies that are non-specifically bound. After the final wash step, the plate is developed by adding an enzymatic substrate to produce a visible signal, which indicates the quantity of antigen in the sample.

Of note, ELISA can perform other forms of ligand binding assays instead of strictly "immuno" assays, though the name carried the original "immuno" because of the common use and history of development of this method. The technique essentially requires any ligating reagent that can be immobilized on the solid phase along with a detection reagent that will bind specifically and use an enzyme to generate a signal that can be properly quantified. In between the washes, only the ligand and its specific binding counterparts remain specifically bound or "immunosorbed" by antigen-antibody interactions to the solid phase, while the nonspecific or unbound components are washed away. Unlike other spectrophotometric wet lab assay formats where the same reaction well (e.g. a cuvette) can be reused after washing, the ELISA plates have the reaction products immunosorbed on the solid phase which is p

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วิธี ELISA ได้ถูกใช้เป็นเครื่องมือในการวินิจฉัยในการแพทย์และโรคพืชเช่นเดียวกับการตรวจสอบการควบคุมคุณภาพในอุตสาหกรรมต่างๆ. แอนติเจนจากตัวอย่างที่แนบมากับพื้นผิว จากนั้นแอนติบอดี้ที่เฉพาะเจาะจงต่อไปจะนำไปใช้บนพื้นผิวเพื่อที่จะสามารถจับกับแอนติเจน แอนติบอดีนี้จะเชื่อมโยงกับเอนไซม์และในขั้นตอนสุดท้ายซึ่งเป็นสารตั้งต้นที่มีเอนไซม์ที่ถูกเพิ่ม ปฏิกิริยาที่ตามมาผลิตเป็นสัญญาณที่ตรวจพบมากที่สุดมีการเปลี่ยนแปลงสีในพื้นผิว. การดำเนินการที่เกี่ยวข้องกับวิธี ELISA อย่างน้อยหนึ่งแอนติบอดีที่มีความจำเพาะสำหรับแอนติเจนโดยเฉพาะอย่างยิ่ง กลุ่มตัวอย่างมีจำนวนไม่รู้จักแอนติเจนที่ถูกตรึงบนการสนับสนุนที่แข็งแกร่ง (โดยปกติสไตรีนแผ่นไมโครก) อย่างใดอย่างหนึ่งที่ไม่เฉพาะ (ผ่านการดูดซับไปยังพื้นผิว) หรือเฉพาะ (ผ่านการจับภาพโดยแอนติบอดีอื่นที่เฉพาะเจาะจงกับแอนติเจนเดียวกันใน "แซนวิช "วิธี ELISA) หลังจากแอนติเจนจะตรึงแอนติบอดีการตรวจสอบจะมีการเพิ่มขึ้นรูปที่ซับซ้อนที่มีแอนติเจนที่ แอนติบอดีการตรวจสอบสามารถเชื่อมโยง covalently เอนไซม์หรือตัวเองสามารถตรวจพบโดยแอนติบอดีรองที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ผ่าน bioconjugation ระหว่างแต่ละขั้นตอนแผ่นจะถูกชะล้างโดยปกติจะมีวิธีการแก้ปัญหาผงซักฟอกอ่อนที่จะเอาโปรตีนหรือแอนติบอดีที่มีความผูกพันที่ไม่ได้โดยเฉพาะ หลังจากขั้นตอนการล้างสุดท้ายแผ่นได้รับการพัฒนาโดยการเพิ่มสารตั้งต้นของเอนไซม์ในการผลิตสัญญาณที่มองเห็นได้ซึ่งบ่งชี้ปริมาณของสารในตัวอย่าง. โน้ต ELISA สามารถดำเนินการในรูปแบบอื่น ๆ ของการตรวจแกนด์ผูกพันแทนอย่างเคร่งครัด "ภูมิคุ้มกัน" การตรวจ แม้ว่าชื่อดำเนินต้นฉบับ "ภูมิคุ้มกัน" เพราะการใช้งานร่วมกันและประวัติศาสตร์ของการพัฒนาของวิธีการนี้ เทคนิคเป็นหลักต้องใช้สารใด ๆ Ligating ที่สามารถตรึงบนของแข็งพร้อมกับการตรวจสอบสารที่จะผูกพันเฉพาะและใช้เอนไซม์ในการสร้างสัญญาณที่สามารถวัดอย่างถูกต้อง ในระหว่างที่ล้างเพียงแกนด์และคู่ที่มีผลผูกพันเฉพาะของมันยังคงอยู่ที่ถูกผูกไว้โดยเฉพาะหรือ "immunosorbed" โดยการมีปฏิสัมพันธ์แอนติเจนและแอนติบอดีกับของแข็งในขณะที่ส่วนประกอบเชิญชมหรือไม่ได้ผูกไว้จะล้างออกไป ซึ่งแตกต่างจากรูปแบบอื่น ๆ สเปกการทดสอบในห้องปฏิบัติการที่เปียกปฏิกิริยาเดียวกันดี (เช่น cuvette ก) สามารถนำกลับมาหลังจากล้างจาน ELISA มีผลิตภัณฑ์ปฏิกิริยา immunosorbed ในเฟสของแข็งซึ่งเป็นพี

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

) ได้ถูกใช้เป็นเครื่องมือในการวินิจฉัยในการรักษาด้วยยา และโรคพืช ตลอดจนการควบคุมคุณภาพการตรวจสอบในอุตสาหกรรมต่าง ๆ .

แอนติเจนจากตัวอย่างที่แนบกับพื้นผิว แล้วต่อเฉพาะแอนติบอดีที่ใช้ผ่านพื้นผิวจึงสามารถจับกับแอนติเจน แอนติบอดีนี้เชื่อมโยงกับเอนไซม์ และในขั้นตอนสุดท้ายสารผสมของเอนไซม์ตั้งต้นคือเพิ่ม ปฏิกิริยาที่ตามมาสร้างสัญญาณที่ตรวจพบ ส่วนใหญ่มักเปลี่ยนสีในค่า

แสดงอีไลเกี่ยวข้องกับอย่างน้อยหนึ่งที่มีความจำเพาะสำหรับแอนติเจนแอนติบอดีที่เฉพาะเจาะจงตัวอย่างที่มีปริมาณที่ไม่รู้จักของแอนติเจนที่ถูกตรึงในการสนับสนุนที่แข็งแกร่ง ( มักจะเป็นสไตรีนไมโครจาน ) ให้ไม่เฉพาะ ( ผ่านการดูดซับที่พื้นผิว ) หรือโดยเฉพาะ ( ผ่านการจับภาพโดยอื่นแอนติบอดีต่อแอนติเจนเดียวกันใน " แซนด์วิช " ( ) หลังจากวินิจฉัยถูก การตรวจหาแอนติบอดีเป็นรูปที่ซับซ้อนกับแอนติเจนการตรวจหาแอนติบอดีสามารถ covalently เชื่อมโยงกับเอนไซม์ หรือตัวเองถูกตรวจพบโดยการรองที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ที่ผ่าน bioconjugation . ระหว่างแต่ละขั้นตอน จานก็มักจะล้างด้วยสารละลายผงซักฟอกอ่อนเพื่อลบใด ๆที่ไม่เจาะจงต่อโปรตีนหรือผูกพัน หลังจากขั้นตอนล้างสุดท้ายจานถูกพัฒนาขึ้น โดยการเพิ่มสารเอนไซม์เพื่อผลิตเป็นสัญญาณที่มองเห็นได้ ซึ่งบ่งชี้ว่า ปริมาณแอนติเจนในตัวอย่าง

หมายเหตุ , ELISA สามารถแสดงรูปแบบอื่น ๆของลิแกนด์ผูกพัน ) แทนอย่างเคร่งครัด " มมูโน " ) แม้ว่าชื่ออุ้มต้นฉบับ " มมูโน " เพราะโดยทั่วไปใช้และประวัติศาสตร์ การพัฒนาวิธีการนี้ .เทคนิคเป็นหลักใด ๆ ligating รีเอเจนต์ที่สามารถตรึงบนของแข็งเฟสพร้อมกับการกระทำตรวจจับที่จะผูกเฉพาะและการใช้เอนไซม์เพื่อสร้างสัญญาณจะถูกวัดได้ ระหว่างทำความสะอาดเท่านั้น ) และเฉพาะการจับคู่ยังคงอยู่โดยเฉพาะมัดหรือ " immunosorbed " แอนติเจนแอนติบอดีโดยปฏิสัมพันธ์กับเฟสของแข็ง ในขณะที่การติดเชื้อหรือคลายส่วนประกอบจะถูกล้างออกไป ซึ่งแตกต่างจากอื่น ๆในรูปแบบไหน ) แล็บเปียกเหมือนกันปฏิกิริยาดี ( เช่นคิวเวต ) สามารถใช้หลังการซักในแผ่นมี 3 ผลิตภัณฑ์ปฏิกิริยา immunosorbed บนของแข็งเฟสซึ่งเป็น p