can be considered as the first step that aimed to know the extent of
existence and environmental distribution of C. neoformans in pigeon
droppings in Makkah that is considered as the highest populated city
in Saudi Arabia.
2. Materials and methods
2.1. Collection of samples
Total of one hundred and twelve samples of withered pigeon
droppings were collected from 12 different sites within the city
(Figure 1b), over a period of six months (July to December, 2014).
The samples were placed in sterile universal bottles and processed in
the same day of sampling.
2.2. Isolation and identification of C. neoformans and other
fungi
The method described by Xavier et al. was adapted as follows:
About 10 g of withered pigeon droppings from each site were
transferred to Erlenmeyer flasks containing a saline solution (0.9%)
with chloramphenicol (200 mg/L), achieving 1:10 dilution (w/v)
[9]. The mixture was shaken for 20 min and allowed to settle for 30
min. Aliquots of 0.5 mL supernatant were streaked on esculin agar
(Oxoid, Basingstoke, UK) for isolation of C. neoformans and on
Sabouraud dextrose agar (SDA) (Oxoid), for isolation of other fungal
species[10]. The plates were then incubated at 37 °C for 10 days.
Each inoculated plate was examined daily for yeast growth. Colonies
with a mucous appetence and those with brown pigmentation
on esculin agar (Oxoid) were selected and subcultured on SDA
slants to obtain pure cultures. For identification of C. neoformans,
morphological and biochemical tests were used. The presence of
capsule on India ink preparation was considered as one of the bases
of C. neoformans identification and confirmed by melanin synthesis
on esculin agar (Oxoid), urease production on urea agar (Oxoid), and
ability to grow at 37 °C[9,11]. The other fungal species growing on
SDA were identified microscopically.
2.3. Antifungal susceptibility testin
ถือได้ว่าเป็นขั้นตอนแรกที่มีวัตถุประสงค์เพื่อทราบขอบเขตของดำรงอยู่และการกระจายสิ่งแวดล้อมของ C. neoformans ในนกพิราบมูลในเมกกะที่ถือว่าเป็นเมืองที่มีประชากรสูงสุดในประเทศซาอุดิอาระเบีย2. วัสดุและวิธีการ2.1 การเก็บตัวอย่างจำนวนหนึ่งร้อย และสิบสองตัวอย่างของนกพิราบเหี่ยวมูลที่ถูกเก็บรวบรวมจากเว็บไซต์ต่าง ๆ 12 ภายในเมือง(รูปที่ 1b), รอบระยะเวลาหกเดือน (กรกฏาคม-ธันวาคม 2557)ตัวอย่างใส่ในขวดฆ่าเชื้อสากล และประมวลผลวันเดียวกันของการสุ่มตัวอย่าง2.2 การแยกและระบุ C. neoformans และอื่น ๆเชื้อราปรับวิธีการอธิบายโดย Xavier et al. เป็นดังนี้:ประมาณ 10 กรัมของมูลนกพิราบเหี่ยวจากแต่ละไซต์ได้โอนย้ายไป Erlenmeyer น้ำเกลือ (0.9%) ประกอบด้วยมี chloramphenicol (200 mg/L), บรรลุ 1:10 (w/v) เจือจาง[9] การผสมเขย่าสำหรับ 20 นาที และสามารถชำระสำหรับ 30Aliquots นาทีของ 0.5 mL supernatant ได้ลายบน esculin agar(Oxoid, Basingstoke, UK) สำหรับแยก ของ C. neoformans และในSabouraud ขึ้น agar (SDA) (Oxoid), การแยกเชื้อราอื่น ๆสายพันธ์ [10] แล้วแผ่นก็ incubated ที่ 37 ° C 10 วันแต่ละจาน inoculated ถูกตรวจสอบทุกวันสำหรับการเติบโตของยีสต์ อาณานิคมmucous appetence และผู้ที่ มีผิวคล้ำสีน้ำตาลesculin agar (Oxoid) ถูกเลือก และ subcultured ใน SDAslants รับวัฒนธรรมบริสุทธิ์ สำหรับรหัสของ C. neoformansสัณฐาน และชีวเคมีทดสอบใช้ สถานะของแคปซูลในการเตรียมหมึกอินเดียถูกถือว่าเป็นหนึ่งของฐานรหัส C. neoformans และยืนยัน โดยการสังเคราะห์เมลานินใน esculin agar (Oxoid), ผลิตยูใน urea agar (Oxoid), และความสามารถในการเติบโตที่ 37 ° C [9,11] พันธุ์เชื้อราอื่น ๆ ที่เติบโตในSDA ได้ระบุ microscopically2.3. อาการภูมิไวรับ testin
การแปล กรุณารอสักครู่..