2.3. Purification of phenolic compounds
The DCM fraction was further purified because it showed high
antioxidant and anticoagulant activity. For column chromatography,
the DCM fraction (100 mg/mL) was placed on the
column. The column was prepared by mixing 100 g of silica
(60–200 lm mesh size) and chloroform, and the mixture was
stirred until it became less viscous. The reaction was exothermic
in nature, with the initially thick mixture loosening up
after stirring, producing a slurry.
The amount of silica was determined as at least 10% of the
extract weight i.e. as the extract was approximately 0.1 g, 100 g
of silica was used but then extra silica was added to increase
the length of the column (5.0 cm diameter · 61 cm length).
The mixture was then carefully poured into the column, which
was agitated using rubber tubing to help expel air bubbles
within the column and to facilitate the elution of compounds
more evenly. The extract previously dissolved in the reaction
mixture was then placed on top of the prepared column and
leveled off. More chloroform was used to help hydrate the
dried silica and to produce an even, thin band of the extract.
Then the fractions were eluted by starting with chloroform/
methanol in the following ratios successively: 99:1, 95:5, 90:10,
80:20 and 50:50. Each fraction was then collected in pre-labeled
test tubes. A total of 45 fractions were collected and they
were combined by TLC. Finally, TLC led to the production of
7 subfractions. Solvents in each subfraction were removed by
using a rotary evaporator and the biological activity of the residue
in each subfraction was determined
2.3 การฟอกม่อฮ่อม
DCM เศษส่วนเพิ่มเติมที่บริสุทธิ์เนื่องจากพบว่าสูง
anticoagulant และสารต้านอนุมูลอิสระ สำหรับคอลัมน์ chromatography,
DCM เศษ (100 mg/mL) ถูกวางบน
คอลัมน์ คอลัมน์ถูกเตรียม โดยผสม 100 กรัมของซิลิก้า
(60–200 lm ตาข่ายขนาด) และคลอโรฟอร์ม และส่วนผสม
กวนจนกลายเป็นความหนืดน้อย ปฏิกิริยา exothermic
ในธรรมชาติ ด้วยส่วนผสมหนาเริ่มคลายค่า
หลังจากกวน ผลิตสารละลาย
กำหนดปริมาณซิลิกาน้อยกว่า 10% ของ
แยกน้ำหนักเช่นเป็นการดึงข้อมูล ประมาณ 0.1 g, 100 g
ของใช้ซิลิกา แต่แล้ว เพิ่มซิลิก้าเสริมเพื่อเพิ่ม
ความยาวของคอลัมน์ (5.0 ซม.เส้นผ่าศูนย์กลาง· 61 ซม.ยาว) .
ผสมถูกแล้วอย่าง poured ลงในคอลัมน์, ซึ่ง
นั้นกระตุ้นที่ทำใช้ท่อยางเพื่อช่วยขับไล่ฟองอากาศ
ภาย ในคอลัมน์ และ elution ของสารประกอบเพื่อ
ขึ้นเท่า ๆ กัน การดึงข้อมูลก่อนหน้านี้ละลายในปฏิกิริยา
ผสมถูกวางลงบนคอลัมน์เตรียมไว้ และ
ผ่านออก ใช้เพื่อช่วยเพิ่มเติมคลอโรฟอร์มผับ/เลาจน์
แห้งซิลิก้า และสร้างวงการแม้ บางแยก
แล้วเศษได้ eluted โดยเริ่มต้นด้วยคลอโรฟอร์ม /
เมทานอลในอัตราส่วนต่อไปนี้ติด ๆ กัน: 99:1, 95:5, 90:10,
80:20 และคนละครึ่ง ทุกฝ่ายแล้วรวบรวมไว้ในป้ายก่อน
หลอดทดสอบ ผลรวมของเศษที่ 45 ถูกเก็บรวบรวมก็
ถูกรวม โดย TLC สุดท้าย TLC นำไปสู่การผลิต
7 subfractions หรือสารทำละลายในแต่ละ subfraction ถูกลบโดย
ใช้ evaporator โรตารี่และกิจกรรมทางชีวภาพของสารตกค้าง
ในแต่ละ subfraction ได้กำหนด
การแปล กรุณารอสักครู่..
