4.2.2. Cytotoxicity assayThe cytoto

4.2.2. Cytotoxicity assay
The cytotoxic activity of the extractswas determined by theMTT colorimetric assay [64]. Briefly, exponentially growing cells were plated in 96-well tissue plates at a density of 5  103 cells/well (HepG2, MDA-MB-468 and S17) or 1  104 cells/well (THP1, U937,EL4, RAW 264.7 and N9). Adherent cell lines were previously incubated for 24 h to ensure adhesion to the wells. Extracts were applied at various concentrations (ranging between 0.078 and 200 mM) and control cells were treated with DMSO at the highest concentration used in test wells (0.5%). Cell viability was determined after 72 h of incubation with the extracts/DMSO. 2 1h prior to the end of the incubation period, 20 mL of MTT (5 mg/mL in PBS) were added to each well and further incubated at 37 C. 150 mLof DMSO were afterwards added to each well in order to dissolve the formazan crystals and absorbance was measured at 590 nm (Biotek Synergy 4). Results were expressed in half maximal inhibitory concentration (IC50, mM). The selectivity of the extracts was estimated using the following equation: Selectivity ¼ IC50 NT/IC50 VT,where VNT and VT indicate IC50 modulated by the compound on non-tumour and tumour cells, respectively.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

4.2.2. cytotoxicity วิเคราะห์กิจกรรม cytotoxic ของ extractswas ที่ถูกกำหนด โดยวิเคราะห์เทียบเคียง theMTT [64] Briefly เซลล์การเจริญเติบโตเป็นทวีคูณเมื่อได้ชุบใน 96-ด้วยเยื่อแผ่นที่ความหนาแน่นของ 5 103 เซลล์/ดี (HepG2, MDA-MB-468 และ S17) หรือ 1 104 เซลล์/ดี (THP1, U937, EL4, RAW 264.7 และ N9) นฤมลเซลล์บรรทัดถูกก่อนหน้านี้ incubated ใน 24 ชมเพื่อให้การยึดเกาะบ่อ ใช้สารสกัดที่ความเข้มข้นต่าง ๆ (ตั้งแต่ระหว่าง 0.078 และ 200 mM) และควบคุมเซลล์ได้รับการรักษา ด้วย DMSO ที่ความเข้มข้นสูงสุดที่ใช้ในการทดสอบบ่อ (0.5%) เซลล์ชีวิตที่ถูกกำหนดหลัง h 72 ของคณะทันตแพทยศาสตร์ด้วย สารสกัด/DMSO 2 1 h ก่อนสิ้นระยะเวลาบ่ม ปริมาณ 20 mL ของ MTT (5 mg/mL ใน PBS) เพิ่มไปด้วย และเพิ่มเติม incubated ที่ 37 C. 150 mLof DMSO ถูกเพิ่มเข้ามาหลังจากนั้นแต่ละดีเพื่อละลายผลึก formazan และถูกวัด absorbance ที่ 590 nm (Biotek Synergy 4) ผลลัพธ์ถูกแสดงในครึ่งสูงสุดลิปกลอสไขความเข้มข้น (IC50, mM) วิธีของสารสกัดได้ประมาณการใช้สมการต่อไปนี้: VT NT/IC50 IC50 ใว¼ ที่ VNT และ VT ระบุ IC50 สันทัด โดยสารประกอบในเซลล์ที่ไม่ใช่เนื้องอกและเนื้องอก ตามลำดับ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

4.2.2 การทดสอบความเป็นพิษ
ของกิจกรรมพิษ extractswas ที่กำหนดโดยการทดสอบสี theMTT [64] Brie ชั้นปี, การเจริญเติบโตของเซลล์ชี้แจงถูกชุบในแผ่นเนื้อเยื่อ 96 หลุมที่มีความหนาแน่น 5? 103 เซลล์ / ดี (HepG2, MDA-MB-468 และ S17) หรือ 1? 104 เซลล์ / ดี (THP1, U937, EL4, RAW 264.7 และ N9) เซลล์สานุศิษย์ถูกบ่มก่อนหน้านี้เป็นเวลา 24 ชั่วโมงเพื่อให้แน่ใจว่าการยึดเกาะหลุม สารสกัดถูกนำไปใช้ที่ความเข้มข้นต่างๆ (ระหว่าง 0.078 และ 200 มิลลิเมตร) และการควบคุมเซลล์ได้รับการรักษาด้วย DMSO ที่ความเข้มข้นสูงสุดที่ใช้ในการทดสอบหลุม (0.5%) มีชีวิตเซลล์ถูกกำหนดหลังจาก 72 ชั่วโมงของการบ่มด้วยสารสกัด / DMSO 2 1 ชั่วโมงก่อนที่จะสิ้นสุดระยะเวลาการบ่ม 20 มิลลิลิตร MTT (5 มิลลิกรัม / มิลลิลิตรในพีบีเอส) ถูกเพิ่มเข้าไปในแต่ละดีและบ่มเพิ่มเติมได้ที่ 37 องศาเซลเซียส 150 mLof DMSO ถูกเพิ่มหลังจากนั้นก็จะละกันเพื่อละลายผลึก formazan และการดูดกลืนแสงวัดที่ 590 นาโนเมตร (Biotek Synergy 4) ผลลัพธ์ที่ได้แสดงออกในความเข้มข้นที่ยับยั้งครึ่งสูงสุด (IC50, มิลลิ) การเลือกของสารสกัดเป็นที่คาดกันโดยใช้สมการดังต่อไปนี้: หัวกะทิ¼ IC50 NT / IC50 VT ที่ VNT และ VT บ่งชี้ IC50 ปรับโดยสารประกอบไม่ใช่เนื้องอกและเซลล์มะเร็งตามลำดับ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

4.2.2 . เซลล์การทดสอบ
พิษต่อเซลล์มะเร็งของ extractswas กำหนดโดย themtt Colorimetric วิเคราะห์ [ 64 ] บรี fl Y , ชี้แจงการเติบโตเซลล์ถูกชุบ 96 ด้วยแผ่นเนื้อเยื่อที่ความหนาแน่น 5  103 เซลล์ / ดี ( มะเร็งตับและ mda-mb-468 , s17 ) หรือ 1  104 เซลล์ / ดี ( thp1 u937 el4 , , , และวัตถุดิบ 264.7 N9 ) พลพรรคเซลล์เคยบ่มเป็นเวลา 24 ชั่วโมง เพื่อให้ยึดติดกับหลุมสารสกัดที่ใช้ที่ความเข้มข้นต่างๆ ( ช่วงระหว่าง 0.078 และ 200 มม. ) และเซลล์ควบคุมที่ได้รับ DMSO ที่ความเข้มข้นสูงสุดที่ใช้ในบ่อทดสอบ ( 0.5% ) เซลล์ถูกกำหนดหลังจาก 72 ชั่วโมงของการบ่มด้วยสารสกัด / DMSO . 2 1 ชั่วโมงก่อนสิ้นสุดระยะเวลา 20 ml ของ MTT ( 5 mg / ml ใน PBS ) เพิ่มกันอีก  และบ่มที่ 37 องศาเซลเซียส150 mlof DMSO เพิ่มภายหลัง กันเพื่อละลายเหลือเชื่อและค่าวัดที่ 590 nm ( biotek ( 4 ) ผลลัพธ์ที่ได้แสดงออกในช่วงความเข้มข้นสูงสุดของสาร ( ic50 , mm ) การเลือกเกิดสารสกัดถูกประเมินโดยใช้สมการต่อไปนี้ : การ¼ ic50 NT / ic50 VT ,ที่บริษัท ic50 VT แสดงและปรับโดยสารในเซลล์มะเร็งและเนื้องอกไม่ตามลำดับ