2.6. Chromatographic analysis
An ACQUITY Ultra Performance LC™ system (Waters, Milford,
MA, USA) linked to a PDA 2996 photodiode array detector (Waters)
was used for ultra high-performance liquid chromatography (UPLC)
analyses. Empower software was used to control the instruments
and for data acquisition and processing.
The extracts and the standards (previously dissolved in methanol)
were filtered (0.45 mm, Waters, Milford, MA, USA) before
analysis. Analyses were performed at 30 C using a reversed phase
column (BEH C18, 1.7 mm, 2.1 $ 100 mm, Waters) following the
method of Fratianni et al. (2011). The mobile phase consisted of
solvent A (7.5 mM acetic acid) and solvent B (acetonitrile) at a flow
rate of 250 mL min1. Gradient elution was employed, starting with
5% B for 0.8 min, then 5e20% B over 5.2 min, isocratic 20% B for
0.5 min, 20e30% B for 1 min, isocratic 30% B for 0.2 min, 30e50% B
over 2.3 min, 50e100% B over 1 min, isocratic 100% B for 1 min and,
finally, 100e5% B over 0.5 min. At the end of this sequence, the
column was equilibrated under the initial conditions for 2.5 min.
The pressure ranged from 41.37 to 55.16 MPa during the chromatographic
run. The effluent was introduced into an LC detector
(scanning range: 210e400 nm, resolution: 1.2 nm). The injection
volume was 5 mL.
2.6 การวิเคราะห์สาร
อัลตร้าสมรรถนะของระบบ Acquity LC ™ (Waters, ฟอร์ด,
MA, USA) เชื่อมโยงกับ PDA 2996 โฟโตไดโอดอาร์เรย์เครื่องตรวจจับ (น้ำ)
ใช้สำหรับอัลตร้าที่มีประสิทธิภาพสูงของเหลว chromatography (UPLC)
วิเคราะห์ ซอฟแวร์ช่วยให้ถูกใช้ในการควบคุมเครื่องมือ
และสำหรับการเก็บข้อมูลและการประมวลผล.
สารสกัดและมาตรฐาน (ละลายก่อนหน้านี้ในเมทานอล)
ถูกกรอง (0.45 มมวอเตอร์ฟอร์ด, MA, USA) ก่อนที่จะ
วิเคราะห์ วิเคราะห์ได้ดำเนินการวันที่ 30 องศาเซลเซียสโดยใช้ขั้นตอนการกลับรายการ
คอลัมน์ (BEH C18 1.7 มิลลิเมตร 2.1 $ 100 มิลลิเมตรน้ำ) ดังต่อไปนี้
วิธีการ Fratianni et al, (2011) เฟสเคลื่อนที่ประกอบด้วย
ตัวทำละลาย (7.5 มิลลิกรดอะซิติก) และตัวทำละลาย B (acetonitrile) ที่ไหล
อัตรา 250 มิลลิลิตรนาที? 1 ชะไล่โทนสีถูกจ้างเริ่มต้นด้วย
5% B ที่ 0.8 นาทีแล้ว 5e20% B มากกว่า 5.2 นาที, isocratic 20% B ที่
0.5 นาที, 20e30% B เป็นเวลา 1 นาที, isocratic 30% B 0.2 นาที, 30e50% B
มากกว่า 2.3 นาที 50e100% B มากกว่า 1 นาที isocratic 100% B เป็นเวลา 1 นาทีและ
ในที่สุด 100e5% B มากกว่า 0.5 นาที ในตอนท้ายของลำดับนี้ที่
คอลัมน์นี้ถูก equilibrated ภายใต้เงื่อนไขเริ่มต้น 2.5 นาที.
ความดันอยู่ในช่วง 41.37-55.16 MPa ระหว่างโครมา
วิ่ง น้ำทิ้งถูกนำเข้าสู่เครื่องตรวจจับ LC
(ช่วงสแกน: 210e400 นาโนเมตรความละเอียด: 1.2 นาโนเมตร) ฉีด
ปริมาณ 5 มิลลิลิตร
การแปล กรุณารอสักครู่..
2.6 การวิเคราะห์ทางโครมาโตกราฟีการ acquity อัลตร้าประสิทธิภาพ LC ™ระบบ ( น้ำ , Milford ,MA , USA ) เชื่อมโยงกับ PDA 1 โฟโตไดโอดเรย์ตรวจจับ ( น้ำ )ใช้ ultra high-performance liquid chromatography ( uplc )วิเคราะห์ข้อมูล ช่วยให้ซอฟต์แวร์ที่ใช้ควบคุมเครื่องมือและสำหรับบันทึกข้อมูลและประมวลผลสารสกัดและมาตรฐาน ( ก่อนหน้านี้ละลายในเมทานอล )ถูกกรอง ( 0.45 มม. น้ำ มิลฟอร์ด , MA , USA ) ก่อนการวิเคราะห์ การวิเคราะห์การใช้เฟสที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียส .คอลัมน์ ( ดู c18 , 1.7 mm , 2.1 $ 100 มม. น้ำ ) ดังต่อไปนี้วิธี fratianni et al . ( 2011 ) เฟสเคลื่อนที่ประกอบด้วยตัวทำละลาย ( 7.5 มิลลิเมตร กรด ) และตัวทำละลาย B ( ไน ) ที่ไหลอัตรา min1 250 ml . การไล่ระดับสีได้มาว่าจ้าง เริ่มต้นด้วย5 % B 1 นาที แล้ว 5e20 % B มากกว่า 5.2 มิน Isocratic 20 % B สำหรับ0.5 นาที 20e30 % B 1 นาที Isocratic 30% B 0.2 นาที 30e50 % Bน้ำมิน 50e100 % B มากกว่า 1 นาที Isocratic 100% B 1 นาทีและในที่สุด 100e5 % B มากกว่า 0.5 นาทีที่ส่วนท้ายของลำดับนี้คอลัมน์ equilibrated ภายใต้เงื่อนไขเบื้องต้นสำหรับ 2.5 นาทีความดันระหว่าง 41.37 เพื่อ 55.16 MPa ในโครมาโตกราฟีวิ่ง น้ำที่ใช้ในเครื่องตรวจจับ LC( สแกนช่วง : 210e400 nm , ความละเอียด 1.2 nm ) ที่ฉีดปริมาณ 5 มิลลิลิตร
การแปล กรุณารอสักครู่..