ABSTRACT: 1,3-Butadiene (BD) is a h

ABSTRACT: 1,3-Butadiene (BD) is a high volume industrial
chemical commonly used in polymer and rubber production. It is
also present in cigarette smoke, automobile exhaust, and urban air,
leading to widespread exposure of human populations. Upon
entering the body, BD is metabolized to electrophilic epoxides, 3,4-
epoxy-1-butene (EB), diepoxybutane (DEB), and 3,4-epoxy-1,2-diol
(EBD), which can alkylate DNA nucleobases. The most abundant
BD epoxide, EBD, modifies the N7-guanine positions in DNA to
form N7-(2, 3, 4-trihydroxybut-1-yl) guanine (N7-THBG) adducts,
which can be useful as biomarkers of BD exposure and metabolic
activation to DNA-reactive epoxides. In the present work, a capillary HPLC-high resolution ESI+-MS/MS (HPLC-ESI+-HRMS/
MS) methodology was developed for accurate, sensitive, and reproducible quantification of N7-THBG in cell culture and in
human white blood cells. In our approach, DNA is subjected to neutral thermal hydrolysis to release N7-guanine adducts from
the DNA backbone, followed by ultrafiltration, solid-phase extraction, and isotope dilution HPLC-ESI+-HRMS/MS analysis on
an Orbitrap Velos mass spectrometer. Following method validation, N7-THBG was quantified in human fibrosarcoma (HT1080)
cells treated with micromolar concentrations of DEB and in DNA isolated from blood of smokers, nonsmokers, individuals
participating in a smoking cessation program, and occupationally exposed workers. N7-THBG concentrations increased linearly
from 31.4 ± 4.84 to 966.55 ± 128.05 adducts per 109 nucleotides in HT1080 cells treated with 1−100 μM DEB. N7-THBG
amounts in leukocyte DNA of nonsmokers, smokers, and occupationally exposed workers were 7.08 ± 5.29, 8.20 ± 5.12, and
9.72 ± 3.80 adducts per 109 nucleotides, respectively, suggesting the presence of an endogenous or environmental source for this
adduct. The availability of sensitive HPLC-ESI+-HRMS/MS methodology for BD-induced DNA adducts in humans will enable
future population studies of interindividual and ethnic differences in BD bioactivation to DNA-reactive epoxides.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

นามธรรม: 1,3-Butadiene (bd) เป็นปริมาณสูงอุตสาหกรรม
สารเคมีที่ใช้กันโดยทั่วไปในลิเมอร์และยางผลิต มันเป็น
ยังอยู่ในควันบุหรี่ไอเสียรถยนต์และทางอากาศในเมือง
ที่นำไปสู่​​การเปิดรับอย่างกว้างขวางของประชากรมนุษย์
เมื่อเข้าสู่ร่างกายแล้วจะถูกเผาผลาญ bd จะ epoxides electrophilic, 3,4 -
อีพ็อกซี่-1-butene (EB) diepoxybutane (deb) และ 3,4-อีพ็อกซี่-1 ,2-
ไดออล (EBD)ซึ่งสามารถ alkylate nucleobases dna มากที่สุด
bd อิพอกไซด์, EBD, ปรับเปลี่ยนตำแหน่ง n7-guanine ใน dna ไป
n7 รูปแบบ (2, 3, 4 trihydroxybut-1-YL) guanine (n7-thbg) adducts
ซึ่งจะเป็นประโยชน์ในขณะที่ไบโอมาร์คเกอร์ ของการเปิดรับ bd และการเผาผลาญอาหารที่จะเปิดใช้งานได้
epoxides dna ปฏิกิริยา ในการทำงานปัจจุบันฝอย hplc สูงความละเอียด -ms/ms esi (HPLC-esi-HRMS /
มิลลิวินาที) วิธีการรับการพัฒนาสำหรับปริมาณที่ถูกต้องมีความสำคัญและทำซ้ำของ n7-thbg ในเซลล์เพาะเลี้ยงและใน
มนุษย์เซลล์เม็ดเลือดขาว ในแนวทางของเรา dna อยู่ภายใต้การย่อยสลายความร้อนที่เป็นกลางที่จะปล่อย adducts n7-guanine
จากกระดูกสันหลัง dna ตามกรองสกัดเฟสของแข็งและไอโซโทปเจือจาง HPLC-esi -hrms/ms วิเคราะห์
สเปกโตรมิเตอร์มวล orbitrap Velos ต่อไปนี้การตรวจสอบวิธีการ n7-thbg ถูกวัดใน fibrosarcoma มนุษย์ (ht1080)
เซลล์รับการรักษาด้วยความเข้มข้นของไมโครโม deb และดีเอ็นเอที่แยกได้จากเลือดของผู้สูบบุหรี่สูบบุหรี่บุคคล
เข้าร่วมในโปรแกรมการเลิกสูบบุหรี่และคนงานที่สัมผัสโครเมียม ความเข้มข้น n7-thbg เพิ่มขึ้นเป็นเส้นตรง
จาก 31.4 ± 4.84-966.55 ± 12805 adducts ต่อ 109 นิวคลีโอในเซลล์ ht1080 รับการรักษาด้วย 1-100 ไมโครเมตร deb n7-thbg
ปริมาณเม็ดเลือดขาวในดีเอ็นเอของบุหรี่สูบบุหรี่และคนงานที่สัมผัสโครเมียมเป็น 7.08 ± 5.29, 8.20 ± 5.12 และ 9.72 ±
3.80 adducts ต่อ 109 นิวคลีโอตามลำดับแสดงให้เห็นการแสดงตนของแหล่งภายนอกหรือสิ่งแวดล้อมนี้
ดึงเข้าหากันความพร้อมของ HPLC-esi -hrms/ms วิธีการที่มีความสำคัญในการเหนี่ยวนำให้เกิด bd adducts ดีเอ็นเอในมนุษย์จะช่วยให้
ศึกษาประชากรในอนาคตของ interindividual และความแตกต่างทางชาติพันธุ์ในการกระตุ้นฤทธิ์ bd จะ epoxides dna ปฏิกิริยา.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

บทคัดย่อ: 1,3-Butadiene (BD) เป็นปริมาณสูงอุตสาหกรรม
เคมีที่ใช้ในการผลิตพอลิเมอร์และยาง เป็น
ยัง มีในไอเสียรถยนต์ ควันบุหรี่ และอากาศเมือง,
นำไปเปิดเผยแพร่ประชากรมนุษย์ เมื่อ
ใส่ตัว BD เป็น metabolized เพื่อ electrophilic epoxides, 3, 4-
อีพ๊อกซี่-1-butene (EB), diepoxybutane (DEB), และ 3,4-epoxy-1,2-diol
(EBD) ซึ่งสามารถ alkylate nucleobases ดีเอ็นเอ อุดมสมบูรณ์มากที่สุด
BD epoxide, EBD ปรับเปลี่ยนตำแหน่ง N7 guanine ในดีเอ็นเอเพื่อ
แบบ N7- (2, 3, 4-trihydroxybut-1-yl) guanine (N7-THBG) adducts,
ซึ่งสามารถเผาผลาญ และประโยชน์เป็น biomarkers ของ BD แสง
เปิดใช้งานการดีเอ็นเอคที epoxides ในงานนำเสนอ ความละเอียดสูง HPLC รูพรุน ESI -MS/MS (HPLC ESI - สาขา /
วิธี MS) ถูกพัฒนาขึ้นเพื่อความถูกต้อง สำคัญ และจำลองนับของ N7 THBG ในงานเพาะเลี้ยงเซลล์ และใน
เม็ดเลือดขาวมนุษย์ ในวิธีการของเรา ดีเอ็นเอขึ้นอยู่กับความร้อนกลาง adducts ไฮโตรไลซ์เพื่อปล่อย N7 guanine จาก
แกนหลัก ดีเอ็นเอตาม ultrafiltration เฟสของแข็งสกัด และไอโซโทปเจือจาง HPLC ESI - สาขา/MS วิเคราะห์บน
สเปกโตเป็น Orbitrap Velos มวลรมิเตอร์ ต่อไปนี้ตรวจสอบวิธี N7 THBG ถูก quantified ใน fibrosarcoma มนุษย์ (HT1080)
เซลล์ถือว่า มีความเข้มข้น micromolar DEB และดีเอ็นเอแยกต่างหากจากเลือดของผู้สูบบุหรี่ สูบบุหรี่ บุคคล
เข้าร่วม ในโปรแกรมยุติการสูบบุหรี่ และ occupationally สัมผัสแรง N7 THBG ความเข้มข้นเพิ่มขึ้นเชิงเส้น
จาก 31.4 ±± 4.84-966.55 12805 adducts ต่อ 109 นิวคลีโอไทด์ในเซลล์ HT1080 รับ 1−100 μM DEB. N7 THBG
ยอดใน leukocyte ดีเอ็นเอของการสูบบุหรี่ ผู้สูบบุหรี่ และผู้ปฏิบัติงานสัมผัส occupationally ได้ 7.08 ± 5.29, ± 8.20 5.12 และ
9.72 ± 3.80 adducts ต่อ 109 นิวคลีโอไทด์ ตามลำดับ การแนะนำของ endogenous หรือสิ่งแวดล้อมเป็นแหล่งนี้
adduct การ ความสำคัญ HPLC ESI - สาขา/MS วิธีสำหรับ DNA เกิด BD adducts ในมนุษย์จะทำ
ประชากรในอนาคตการศึกษาของ interindividual และชนเผ่าต่างใน BD bioactivation กับดีเอ็นเอคที epoxides

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

นามธรรม 1,3 - butadiene ( BD )อยู่ในเกณฑ์สูงระดับอุตสาหกรรม
สารเคมีที่ใช้ในการผลิตยางและโพลิเมอร์. เป็น
ยังอยู่ในควันบุหรี่อากาศเสียรถยนต์และอากาศในเมือง
นำไปสู่ความเสี่ยงของประชากรของมนุษย์ เมื่อ
ซึ่งจะช่วยเข้าสู่ร่างกาย BD มี metabolized เพื่อ electrophilic epoxides 3.4 -
อีพ็อกซีเรซิน - 1 - butene ( EB ) diepoxybutane (หญิงเริ่มเป็นสาว)และ 3.4 - อีพ็อกซี เรซิน -1,2 - diol
( EBD )ซึ่งสามารถ alkylate nucleobases ดีเอ็นเอ ที่อุดมสมบูรณ์ที่สุด
ซึ่งจะช่วย BD epoxide , EBD ,แก้ไข N 7 - guanine ตำแหน่งในดีเอ็นเอเพื่อ
รูปแบบ N 7 - ( 2 , 3 , 4 - trihydroxybut - 1 - YL ) guanine ( N 7 - thbg ) adducts ,
ซึ่งจะเป็นประโยชน์มากเป็น biomarkers ของ BD ความเสี่ยงและกว้างขวาง
การเปิดใช้ดีเอ็นเอ - คอยตามแก้ปัญหา epoxides . ในงานนี้ซึ่งมีรูเล็กที่ hplc - ความละเอียดสูงซอฟท์แวร์กลุ่ม ESI - MS /มิลลิวินาที( hplc - ซอฟท์แวร์กลุ่ม ESI - hrms /
มิลลิวินาที)วิธีการพัฒนาขึ้นสำหรับจึงจำเป็นต้องมีเกิดขึ้นซ้ำเดิมได้และที่สำคัญได้อย่างแม่นยำ N 7 - thbg ในวัฒนธรรมเซลล์และใน
เซลล์เม็ดเลือดขาวของมนุษย์ ในแนวทางของเราดีเอ็นเอต้องมีการระบายความร้อนหลักด้วยเป็นกลางเพื่อปลดล็อค N 7 - guanine adducts จากหัวใจดีเอ็นเอ
ตามด้วยการขุด solid - ขั้นตอนการวิเคราะห์ Ultrafiltration Membrane และไอโซโทป MS - hrms / hplc - ซอฟท์แวร์กลุ่ม ESI เจือจางใน
orbitrap velos ที่ควอดรูเปิลแมสสเปคโตจำนวนมาก. วิธีการต่อไปนี้การตรวจสอบ, N 7 - thbg ได้คำนวณออกมาเป็นรูปธรรมได้หรือในมนุษย์ fibrosarcoma ( HT 1080 )
เซลล์ได้รับการปฏิบัติอย่างมี micromolar ความเข้มข้นของหญิงเริ่มเป็นสาวและอยู่ในดีเอ็นเอถูกแยกออกจากเลือดของผู้ที่ไม่สูบบุหรี่และไม่สูบบุหรี่,ผู้ใช้บริการแบบเฉพาะราย
เข้าร่วมในแบบปลอดบุหรี่การหยุดโปรแกรม,และ occupationally เผยคนงาน. N 7 - thbg ความเข้มข้นเพิ่มขึ้นลำดับอย่างต่อเนื่อง
จาก 31.4 ± 4.84 ถึง 966.55 ± 12805 adducts ต่อ 109 กว้างขวางในเซลล์ 1080 HT ได้รับการปฏิบัติอย่างมีหญิงเริ่มเป็นสาว 1-100 μm. จำนวน 7 - thbg
N ในดีเอ็นเอของคนงาน occupationally เม็ดโลหิตขาวเปิดเผยและผู้ที่ไม่สูบบุหรี่ไม่สูบบุหรี่อยู่ 7.08 ± 5.29 8.20 ± 5.12 นิ้วและ
9.72 ± 3.80 adducts ต่อ 109 กว้างขวางตามลำดับที่แนะนำการมีอยู่ของแหล่งที่มาเองในระยะยาวหรือด้านสิ่งแวดล้อมสำหรับ
adduct นี้ความพร้อมใช้งานของที่สำคัญ hplc - ซอฟท์แวร์กลุ่ม ESI - hrms / MS วิธีการสำหรับ BD - ก่อ adducts ดีเอ็นเอในมนุษย์จะเปิดใช้งาน
ซึ่งจะช่วยการศึกษาในอนาคตจำนวนประชากรของ interindividual และชาติพันธุ์ความแตกต่างใน BD bioactivation ในดีเอ็นเอ - คอยตามแก้ปัญหา epoxides .