Polymerase chain reaction PCR was s

Polymerase chain reaction
PCR was set up in 5Opl volume as described in a thermal cycler . The temperature profile for the amplification of the two rRNA gene fragments was 95°C for 30 s, 40°C for 1 min and 72°C for 1 min for ten cycles followed by twenty-five cycles of 95°C for 30 s, 50°C for 1 min and 72°C for 1 min. For the amplification of the NADH dehydrogenase and the COI gene fragments, the temperature profile was 95°C for 30 s, 45°C for 1 min and 72°C for 1 min for thirty-five cycles. For both temperature profiles, an initial denaturation step of 95°C for 3 min and a final extension step of 72°C for 7
min were added. After amplification, the products were electro phoresed on 1 Yo agarose gels containing 50,d per litre of 10 mglml ethidium bromide. No contamination was detected in negative
controls.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ห่วงโซ่โพลีเมอปฏิกิริยา
PCR ถูกจัดตั้งขึ้นในปริมาณ 5Opl ตามที่อธิบายไว้ใน Cycler ความร้อน อุณหภูมิสำหรับการขยายของทั้งสองชิ้นส่วน rRNA ยีนเป็น 95 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 วินาที, 40 ° C เป็นเวลา 1 นาทีและ 72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1 นาทีสิบรอบตามด้วยยี่สิบห้ารอบ 95 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 วินาที, 50 ° C เป็นเวลา 1 นาทีและ 72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1 นาที สำหรับการขยายของ NADH dehydrogenase และชิ้นส่วนของยีน COI ที่อุณหภูมิ 95 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 วินาที, 45 ° C เป็นเวลา 1 นาทีและ 72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1 นาทีสำหรับสามสิบห้ารอบ สำหรับส่วนกำหนดค่าอุณหภูมิทั้งสองขั้นตอนแรกของการสูญเสียสภาพธรรมชาติ 95 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 3 นาทีและขั้นตอนสุดท้ายของการขยาย 72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 7
นาทีถูกเพิ่ม หลังจากที่ขยายผลิตภัณฑ์ได้ phoresed ไฟฟ้าเมื่อวันที่ 1 เจล agarose Yo มี 50, D ต่อลิตรของโบรไมด์ 10 mglml ethidium การปนเปื้อนไม่ถูกตรวจพบในเชิงลบ
การควบคุม

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การใช้ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส
PCR ตั้งขึ้นในหมวด 5opl ตามที่อธิบายไว้ในวงจรความร้อน โปรไฟล์อุณหภูมิสำหรับการเพิ่มปริมาณของยีนสอง rRNA เศษ 95 องศา C 30 , 40 ° C เป็นเวลา 1 นาที 72 ° C เป็นเวลา 1 นาที ตามด้วยรอบสิบยี่สิบห้ารอบ 95 องศา C 30 , 50 ° C เป็นเวลา 1 นาที 72 ° C เป็นเวลา 1 นาที เพื่อเพิ่มจำนวน ของ NADH dehydrogenase และผมยีนการกระจายตัวอุณหภูมิ 95 องศา C เป็นเวลา 30 , 45 ° C เป็นเวลา 1 นาที 72 ° C เป็นเวลา 1 นาทีสามสิบห้ารอบ ทั้งรูปแบบของอุณหภูมิ การเริ่มต้น ( ขั้นตอนที่ 95 องศา C เป็นเวลา 3 นาที และสุดท้ายการก้าวของ 72 ° C
7 นาทีเพิ่ม หลังจากขยายผลิตภัณฑ์ในโรง phoresed 1 โย่ , เจลที่มี 50 D ต่อลิตร 10 โบรไมด์คู่ mglml .ไม่มีการปนเปื้อนที่ตรวจพบในการควบคุมค่า