Protein content was measured spectr

Protein content was measured spectrophotometrically according
to Bradford [25] and bovine serum albumin was used as a standard.
All measurements were performed in triplicate. The enzyme
activity was estimated according to modifications of the method
described by Kunitz [26] and Walter [27], as follows: 2% casein
(w/v) in 0.1 M phosphate buffer (pH 7.5) was used as a substrate.
Aliquots of 50 lL of the samples were added to a centrifuge tube
containing 0.625 mL of buffered solution of casein. The mixture
was maintained for 10 min in a water bath at 37 C. Subsequently,
1.25 mL of a solution of trichloroacetic acid (TCA) was added and
after 10 min at room temperature (25 C), the mixture was centrifuged
at 4000g for 20 min. The absorbance of the supernatant was
determined at 280 nm using a UV/visible spectrophotometer
(Beckman DU 640, USA).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ปริมาณโปรตีนโดยวัดตาม spectrophotometricallyแบรดฟอร์ด [25] และวัว serum albumin ถูกใช้เป็นมาตรฐานการประเมินทั้งหมดถูกดำเนินการในลข้อ เอนไซม์นี้ประเมินกิจกรรมตามการปรับเปลี่ยนวิธีการอธิบาย โดย Kunitz [26] และวอลเตอร์ [27], เป็นดังนี้: เคซีน 2%(w/v) ใน 0.1 M ฟอสเฟต บัฟเฟอร์ (pH 7.5) ถูกใช้เป็นพื้นผิวแบบนี้Aliquots 50 lL ตัวอย่างเพิ่มหลอดหมุนเหวี่ยงประกอบด้วยมล. 0.625 โซลูชันบัฟเฟอร์ของเคซีน ส่วนผสมได้รับการรักษา 10 นาทีในอ่างน้ำที่ 37 c ต่อมาเพิ่ม 1.25 mL ของสารละลายกรด trichloroacetic (TCA) และผลิตภัณฑ์ส่วนผสมหลังจาก 10 นาทีที่อุณหภูมิห้อง (25 C),ที่ g 4000 20 นาที แก้ไขค่าของ supernatantกำหนดที่ 280 nm ใช้สเปคยูวีปรากฏ(Beckman DU 640 สหรัฐอเมริกา)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ปริมาณโปรตีนวัด spectrophotometrically ตาม
การแบรดฟอ [25] และเซรั่มอัลบูมิวัวถูกนำมาใช้เป็นมาตรฐาน
วัดทั้งหมดถูกดำเนินการในเพิ่มขึ้นสามเท่า เอนไซม์
กิจกรรมเป็นที่คาดตามการปรับเปลี่ยนวิธีการ
อธิบายโดย Kunitz [26] และวอลเตอร์ [27] ดังนี้เคซีน 2%
(w / v) ใน 0.1 M ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 7.5) ถูกใช้เป็นสารตั้งต้น
aliquots 50 LL ของกลุ่มตัวอย่างถูกเพิ่มเข้าไปในหลอดหมุนเหวี่ยง
ที่มี 0.625 มิลลิลิตรของสารละลายบัฟเฟอร์ของ casein ส่วนผสมที่
ถูกเก็บรักษาไว้เป็นเวลา 10 นาทีในอ่างน้ำที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส ต่อมา
1.25 มิลลิลิตรของการแก้ปัญหาของกรดไตรคลอโร (TCA) ได้เพิ่มและ
หลังจาก 10 นาทีที่อุณหภูมิห้อง (25 องศาเซลเซียส) ส่วนผสมที่ถูกหมุนเหวี่ยง
ที่ 4000g สำหรับ 20 นาที ค่าการดูดกลืนของสารละลายที่ถูก
กำหนดที่ 280 นาโนเมตรโดยใช้รังสียูวี / spectrophotometer มองเห็น
(Beckman DU 640, สหรัฐอเมริกา)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วัดนี้ตามปริมาณโปรตีนกับ Bradford [ 25 ] และอัลบูมินถูกใช้เป็นมาตรฐานวัดทั้งหมดมีการปฏิบัติทั้งสามใบ เอนไซม์กิจกรรม ประเมินตามการปรับเปลี่ยนของวิธีอธิบายโดย kunitz [ 26 ] และ [ 27 ] วอลเตอร์ ดังนี้ : % 2 ,( w / v ) ใน 0.1 M phosphate buffer pH 7.5 ) ถูกใช้เป็นสารเฉยๆของ 50 จะจำนวนเพิ่มเป็นเครื่องหลอดบรรจุ 0.625 กรัมสารละลายบัฟเฟอร์ของเคซีน . ผสมคือการรักษาสำหรับ 10 นาทีในน้ำอาบน้ำที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส ต่อมา1.25 มิลลิลิตรของสารละลาย กรดไตรคลอโรอะซิติก ( TCA ) คือการเพิ่มและหลังจาก 10 นาทีที่อุณหภูมิห้อง ( 25 C ) ผสมอยู่ที่ระดับที่ 4000g 20 นาที มีการดูดกลืนแสงของน่านคือมุ่งมั่นที่ 280 nm ใช้ UV / มองเห็นวัสดุ( แบคแมนดู 640 , USA )