Effect of methotrexate on JAK/STAT

Effect of methotrexate on JAK/STAT pathway activation in myeloproliferative neoplasms.
Abstract
BACKGROUND:

The myeloproliferative neoplasms are a group of haematological malignancies characterised by pathological activation of the JAK/STAT (Janus kinase and signal transducer and activator of transcription) intracellular signalling pathway. 50-95% of patients have an acquired mutation (JAK2V617F) causing constitutive activation of JAK2. Our aim was to find new treatments for myeloproliferative neoplasms by identifying compounds that suppress JAK/STAT pathway activation.
METHODS:

We used a luciferase-based transcriptional assay in the low complexity Drosophila model system to screen a library of 2000 small molecules for modulators of JAK/STAT pathway activation. Screen hits were validated with western blotting in the HDLM-2 Hodgkin's lymphoma cell line. The HEL cell line, in which constitutive JAK/STAT pathway activation is caused by JAK2V617F, was used to determine the relevance of screen hits for treatment of myeloproliferative neoplasms.
FINDINGS:

Methotrexate and the chemically similar drug aminopterin were independently identified as strong inhibitors of the Drosophila JAK/STAT pathway, an effect conserved to human cells. Methotrexate did not affect protein phosphorylation in other intracellular signalling pathways. Methotrexate caused significant suppression of JAK/STAT activation in HEL cells at a concentration equivalent to that seen in patients taking low-dose oral methotrexate (p≤0·001).
INTERPRETATION:

Our results suggest that methotrexate is a promising treatment for myeloproliferative neoplasms that could be translated into clinical trials after assessment in primary cells. These results are particularly relevant in myelofibrosis. Inhibitors of JAK1/2 improve symptoms and prolong life in myelofibrosis, but their use is limited by cost. Other existing therapies for myelofibrosis appear no more effective than placebo. Methotrexate might bring the benefits of JAK/STAT pathway inhibition at a lower cost.
FUNDING:

Cancer Research UK, Yorkshire Cancer Research, UK Medical Research Council, Wellcome Trust, EU Framework Cancer Pathways.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

. ผลของ methotrexate ใน JAK / สถิติยืนยันการใช้งานในทางเดินเนื้องอก myeloproliferative
บทคัดย่อภูมิหลัง: เนื้องอก myeloproliferative เป็นกลุ่มของโรคมะเร็งโลหิตวิทยาที่โดดเด่นด้วยการเปิดใช้งานพยาธิวิทยาของ JAK / สถิติ (เจนัสไคเนสและตัวแปลงสัญญาณและสัญญาณกระตุ้นการถอดความ) เส้นทางการส่งสัญญาณภายในเซลล์ 50-95% ของผู้ป่วยมีการกลายพันธุ์ที่ได้มา (JAK2V617F) ก่อให้เกิดการเปิดใช้เป็นส่วนประกอบของ JAK2 จุดมุ่งหมายของเราคือการหาวิธีการรักษาใหม่สำหรับเนื้องอก myeloproliferative โดยการระบุสารที่ปราบปราม JAK / สถิติการเปิดใช้เส้นทาง. วิธีการ: เราใช้ luciferase ตามการทดสอบการถอดรหัสในความซับซ้อนต่ำแบบจำลองระบบแมลงหวี่หน้าจอห้องสมุดของปี 2000 โมเลกุลขนาดเล็กสำหรับ modulators ของ JAK / สถิติการเปิดใช้เส้นทาง ฮิตหน้าจอถูกตรวจสอบกับซับตะวันตกใน HDLM-2 สายพันธุ์ของเซลล์มะเร็งต่อมน้ำเหลืองของ สายมือถือ HEL ซึ่งในส่วนประกอบ JAK / สถิติการเปิดใช้เส้นทางที่เกิดจาก JAK2V617F ถูกใช้ในการกำหนดความเกี่ยวข้องของการเข้าชมหน้าจอสำหรับการรักษาเนื้องอก myeloproliferative. ข้อค้นพบ: Methotrexate และ aminopterin ยาเสพติดที่คล้ายกันสารเคมีที่ถูกระบุเป็นอิสระเป็นสารยับยั้งที่แข็งแกร่งของ แมลงหวี่ JAK / เดินสถิติ, ผลกระทบที่จะอนุรักษ์เซลล์ของมนุษย์ methotrexate ไม่ได้ส่งผลกระทบต่อ phosphorylation โปรตีนในเส้นทางการส่งสัญญาณภายในเซลล์อื่น ๆ methotrexate ที่เกิดจากการปราบปรามอย่างมีนัยสำคัญของ JAK / ยืนยันการใช้งานสถิติในเซลล์ที่มีความเข้มข้น HEL เทียบเท่ากับที่เห็นในผู้ป่วยที่ใช้ขนาดต่ำ methotrexate ช่องปาก (p≤0· 001). การตีความ: ผลของเราแสดงให้เห็นว่า methotrexate คือการรักษาที่มีแนวโน้มสำหรับเนื้องอก myeloproliferative ว่า จะได้รับการแปลเป็นการทดลองทางคลินิกหลังจากการประเมินในเซลล์หลัก ผลลัพธ์เหล่านี้โดยเฉพาะอย่างยิ่งที่เกี่ยวข้องใน myelofibrosis สารยับยั้งของ JAK1 / 2 อาการดีขึ้นและยืดอายุใน myelofibrosis แต่การใช้ของพวกเขาถูก จำกัด ด้วยค่าใช้จ่าย การรักษาที่มีอยู่อื่น ๆ สำหรับ myelofibrosis ปรากฏไม่มีประสิทธิภาพมากขึ้นกว่ายาหลอก methotrexate อาจนำประโยชน์ของ JAK / สถิติการยับยั้งทางเดินที่มีต้นทุนที่ต่ำกว่า. เงินทุน: การวิจัยโรคมะเร็งแห่งสหราชอาณาจักร, ยอร์คการวิจัยโรคมะเร็งสหราชอาณาจักรสภาวิจัยทางการแพทย์ Wellcome ไว้ใจสหภาพยุโรปกรอบมะเร็งเตรียมความพร้อม

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ผลของยา methotrexate ในจักร / stat ทางเดินที่ใช้ myeloproliferative เนื้องอก .
นามธรรม
:

myeloproliferative เนื้องอกมีกลุ่มก่อนโดยการกระตุ้นมะเร็งลักษณะพยาธิสภาพของจั๊ก / stat ( เจนัส ไคเนส และสร้างเครื่อง สัญญาณ และ กิจกรรมของบัณฑิตยสถาน ) การส่งสัญญาณทาง50-95 % ของผู้ป่วยจะมีการกลายพันธุ์ ( ได้มา jak2v617f ) ก่อให้เกิดการกระตุ้นพฤติกรรมของ jak2 . เป้าหมายของเราคือการค้นหาการรักษาใหม่สำหรับ myeloproliferative เนื้องอกโดยระบุสารประกอบที่ยับยั้งจัก / stat )
:

วิธีการเปิดใช้งานเราใช้เอนไซม์ลูซิเฟอเรส ( ใช้ particle ในความซับซ้อนต่ำ บ้านแบบระบบหน้าจอห้องสมุด 2 , 000 โมเลกุลขนาดเล็กสำหรับ modulators ของจั๊ก / stat ทางเดินกระตุ้น ฮิตหน้าจอตรวจสอบความตรงกับ Western blotting ใน hdlm-2 มะเร็งต่อมน้ำเหลืองชนิดฮอดจ์กินเซลล์ที่บรรทัด นรกในเซลล์ไลน์ ซึ่งรธน. จั๊ก / stat ) เกิดจาก jak2v617f thailand ,ถูกใช้เพื่อตรวจสอบความเกี่ยวข้องของฮิตหน้าจอสำหรับการรักษาเนื้องอก myeloproliferative .
:

ใช้ methotrexate และเคมีคล้ายกับยาเร่งรีบเป็นอิสระระบุแข็งแรงยับยั้งของแมลงหวี่จั๊ก / stat ทางเดิน , ผลเพื่อให้เซลล์ของมนุษย์ เมโธเทรกเซทไม่มีผลต่อปฏิกิริยาฟอสโฟรีเลชันโปรตีนในเซลล์อื่น ๆสัญญาณทาง .สาเหตุสำคัญของการปราบปรามยา methotrexate จักร / stat กระตุ้นเซลล์เฮลที่ความเข้มข้นเทียบเท่ากับที่พบในผู้ป่วยที่สละขนาดยาต่ำ methotrexate ช่องปาก ( P ≤ 0 ด้วย 001 )
:

ผลการตีความของเราแนะนำให้ methotrexate คือการรักษาสัญญาที่ myeloproliferative เนื้องอกที่สามารถแปลเป็นคลินิก หลังจากประเมินในเซลล์หลักผลลัพธ์เหล่านี้เกี่ยวข้องโดยเฉพาะอย่างยิ่งในขี้เต่า . น jak1 / 2 ปรับปรุงอาการและยืดอายุในขี้เต่า แต่ใช้ของพวกเขาจะถูก จำกัด โดยต้นทุน อื่น ๆที่มีอยู่การขี้เต่าปรากฏมีประสิทธิภาพมากกว่ายาหลอก เมโธเทรกเซทอาจจะนำประโยชน์ของจักร / stat เพื่อยับยั้งที่ต้นทุนต่ำ .
:

เงินทุนการวิจัยโรคมะเร็ง UK , การวิจัยโรคมะเร็งยอร์ค ,UK สภาวิจัยทางการแพทย์ Wellcome Trust , วิถี , มะเร็งอียูกรอบ