2.2. Antimicrobial susceptibility testing: disk diffusion method and
MIC values
Antimicrobial susceptibility testing of Listeria was performed by
the disc diffusion method as recommended by the European
Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing (EUCAST, 2012).
Mueller-Hinton agar plates were used (Oxoid, Hampshire, UK) with
incubation at 35 C for 24 h. The inoculum was standardized by
spectrophotometry (Spectronic 20, Bausch&Lomb, Rochester, N.Y.,
USA) inoculating the plates with a concentration of approximately
108 cfu/ml using a cotton swab.
The following 20 antimicrobials (and disk load), including those
used to treat human listeriosis, were tested: amoxicillin-clavulanic
acid (30 mg; AMC), ampicillin (10 mg; AMP), ciprofloxacin (5 mg; CIP),
clindamycin (2 mg; DA), clarithromycin (15 mg; CLR), chloramphenicol
(30 mg; C), gentamicin (10 mg; CN), imipenem (10 mg; IPM),
levofloxacin (5 mg; LEV), linezolid (30 mg; LZD), meropenem (10 mg;
MEM), moxifloxacin (5 mg; MXF), oxacillin (1 mg; OX), penicillin G
(10 mg; P), rifampicin (30 mg; RD), trimethoprimesulfamethoxazole
[1.5 mg-23.5 mg; SXT], teicoplanin (30 mg; TEC), tetracycline (30 mg;
TE), tigecycline (15 mg; TGC) and vancomycin (30 mg; VA). Additionally,
in the case of L. innocua, resistance to five more antibiotics
was assayed: erythromycin (15 mg; E), minocycline (30 mg; MH),
streptomycin (10 mg; S), sulfamethoxazole (25 mg; RL) and
trimethoprim (5 mg; W). The following quality control strains were
included with each batch: E. coli ATCC 25922, Staphylococcus aureus
ATCC 25923, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 and Enterococcus
faecalis ATCC 29212.
The diameters of growth inhibition zones were measured and
interpreted according to the breakpoints recommended by the
EUCAST (2013) for the various types of antibiotics, and the strains
were classified as sensitive, intermediate (reduced susceptibility)
or resistant.
There were 62 L. monocytogenes and 85 L. innocua isolates for
which the interpretation of the disc diffusion method was unclear
for six antibiotics. These strains were confirmed by determining the
minimum inhibitory concentrations (MIC) by graded-concentration
antibiotic strips (M.I.C.E. strips; Oxoid). Simply, 0.5 McFarland
inoculum of the Listeria isolates was swab-spread over Muellere
Hinton agar plates and, then, M.I.C.E. strips were aseptically placed
on the dried surface within 15 min. Plates were incubated at 35 C
2.2. ทดสอบความไวต่อยาต้านจุลชีพ: ดิสก์วิธีการแพร่ และค่า MICทดสอบความไวต่อยาต้านจุลชีพของ Listeria ทำโดยวิธีการแพร่ดิสก์แนะนำ โดยในยุโรปคณะกรรมการในการทดสอบ (EUCAST, 2012) ความไวต่อยาต้านจุลชีพจานอาหารเลี้ยงเชื้อ Mueller Hinton ถูกใช้ (Oxoid แฮมไชร์ สหรัฐ สหราชอาณาจักร)บ่มที่ 35 C ใน 24 ชม Inoculum ที่มาตรฐานโดยspectrophotometry (Spectronic 20 ก็ & Lomb โรเชสเตอร์ นิวยอร์คล็อตสหรัฐอเมริกา) inoculating แผ่นกับความเข้มข้นของโดยประมาณ108 cfu/ml โดยใช้สำลีการต่อไปนี้ 20 ยาต้านจุลชีพ (และโหลดดิสก์), รวมทั้งใช้ในการรักษามนุษย์ listeriosis ทดสอบ: amoxicillin clavulanicกรด (30 มก. AMC), โกคอ (10 มก. แอมป์), ciprofloxacin (5 มก. CIP),โร (2 มิลลิกรัม DA), clarithromycin (15 มก. CLR), คคัส(30 มก. ค) gentamicin (10 มก. CN), imipenem (10 มก. IPM),levofloxacin (5 มก. LEV), linezolid (30 มก. LZD), meropenem (10 มก.MEM), moxifloxacin (5 มก. MXF), oxacillin (1 มก. ปีฉลู), ยาเพนนิซิลลิน G(10 มก. P) rifampicin (30 มก. RD), trimethoprimesulfamethoxazole[1.5 มก. - 23.5 มก. SXT], teicoplanin (30 มก. TEC), เตตราไซคลีน (30 มก.TE), tigecycline (15 มก. สถาน) และ vancomycin (30 มก. VA) นอกจากนี้ในกรณีของ L. innocua ความต้านทานต่อยาปฏิชีวนะมากกว่าห้าถูก assayed: ร่าง (15 มก. จ) minocycline (30 มก. MH),streptomycin (10 มก. S) ซัลฟาเมโทซาโซล (25 มก. RL) และไตรเมโทพริม (5 มก. W) ถูกสายพันธุ์ควบคุมคุณภาพต่อไปรวมอยู่ในแต่ละชุด: E. coli ATCC 25922, Staphylococcus หมอเทศข้างลายATCC 25923, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 และ Enterococcusfaecalis ATCC 29212ถูกวัดเส้นผ่าศูนย์กลางของโซนยับยั้งการเจริญเติบโต และตีความตามจุดพักที่แนะนำโดยEUCAST (2013) ชนิดของยาปฏิชีวนะ และสายพันธุ์ถูกจัดประเภทเป็นสำคัญ ระดับกลาง (ลดความอ่อนแอ)หรือทนมีสมอง L. 62 และ 85 L. innocua แยกสำหรับซึ่งการตีความของวิธีการกระจายแผ่นดิสก์ยังไม่ชัดเจนสำหรับยาปฏิชีวนะหก สายพันธุ์เหล่านี้ได้รับการยืนยัน โดยกำหนดให้เข้มข้นยับยั้งต่ำสุด (MIC) โดยความเข้มข้นอย่างช้า ๆยาปฏิชีวนะแถบ (M.I.C.E. แถบ Oxoid) เพียง 0.5 McFarlandinoculum ของ Listeria แยกถูกกวาดแพร่กระจายผ่าน Muellereแผ่นวุ้น Hinton และ แล้ว แถบ M.I.C.E. aseptically วางอยู่บนพื้นผิวแห้งภายใน 15 นาที แผ่นได้รับการกกที่ 35 C
การแปล กรุณารอสักครู่..

2.2 การทดสอบความไวต่อยาต้านจุลชีพ: วิธีดิสก์แพร่กระจายและ
ค่า MIC
ทดสอบยาต้านจุลชีพความไวของเชื้อ Listeria ได้ดำเนินการโดย
วิธีการดิสก์การแพร่กระจายตามคำแนะนำของยุโรป
คณะกรรมการเกี่ยวกับยาต้านจุลชีพไวเซส (EUCAST 2012).
Mueller-Hinton แผ่นวุ้นถูกนำมาใช้ (Oxoid นิวแฮมป์เชียร์ สหราชอาณาจักร) กับ
การบ่มที่อุณหภูมิ 35 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมง เชื้อเป็นมาตรฐานโดย
spectrophotometry (SPECTRONIC 20 Bausch & Lomb โรเชสเตอร์, นิวยอร์ก,
สหรัฐอเมริกา) การฉีดวัคซีนของแผ่นเปลือกโลกที่มีความเข้มข้นของประมาณ
108 CFU / ml โดยใช้สำลี.
ต่อไปนี้ 20 ยาต้านจุลชีพ (และโหลดดิสก์) รวมทั้งผู้ที่
ใช้ในการรักษา listeriosis มนุษย์ได้มีการทดสอบ: amoxicillin-clavulanic
กรด (30 มิลลิกรัม AMC), ampicillin (10 มิลลิกรัม; AMP) ciprofloxacin (5 มิลลิกรัม CIP),
clindamycin (2 มิลลิกรัม DA) clarithromycin (15 มิลลิกรัม CLR) chloramphenicol
(30 มิลลิกรัม; C), gentamicin (10 มิลลิกรัม CN), imipenem (10 มิลลิกรัม IPM)
levofloxacin (5 มิลลิกรัม LEV) linezolid (30 มิลลิกรัม LZD), เมอโรพีเนม (10 มิลลิกรัม
MEM) moxifloxacin (5 มิลลิกรัม MXF) oxacillin (1 มิลลิกรัม; OX) penicillin G
(10 มิลลิกรัม; P), rifampicin (30 มิลลิกรัม RD) trimethoprimesulfamethoxazole
[1.5 mG-23.5 มิลลิกรัม SXT] teicoplanin (30 มิลลิกรัม TEC), tetracycline (30 มิลลิกรัม
TE) tigecycline (15 มิลลิกรัม TGC) และ vancomycin (30 มิลลิกรัม; VA) นอกจากนี้
ในกรณีของแอล innocua ความต้านทานต่ออีกห้ายาปฏิชีวนะ
ได้รับการวิเคราะห์: erythromycin (15 มิลลิกรัม; E), minocycline (30 มิลลิกรัม MH),
streptomycin (10 มิลลิกรัม; s), sulfamethoxazole (25 มิลลิกรัม RL) และ
trimethoprim (5 มิลลิกรัม; W) สายพันธุ์ควบคุมคุณภาพต่อไปนี้ถูก
รวมอยู่กับแต่ละชุด: E. coli ATCC 25922, Staphylococcus aureus
ATCC 25923, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 และ Enterococcus
faecalis ATCC 29212.
เส้นผ่าศูนย์กลางของการเจริญเติบโตการยับยั้งการวัดและการ
แปลความหมายตามจุดพักที่แนะนำโดย
EUCAST (2013) สำหรับประเภทต่างๆของยาปฏิชีวนะและสายพันธุ์
ถูกจัดให้เป็นความละเอียดอ่อนกลาง (ลดลงอ่อนแอ)
หรือทน.
มี 62 ลิตร monocytogenes ได้และ 85 ลิตร innocua แยกสำหรับ
ซึ่งการตีความของวิธีการแพร่กระจายแผ่นดิสก์ที่ไม่ชัดเจน
สำหรับ หกยาปฏิชีวนะ สายพันธุ์นี้ได้รับการยืนยันจากการกำหนด
ความเข้มข้นต่ำสุด (MIC) โดยจัดลำดับความเข้มข้น
แถบยาปฏิชีวนะ (แถบ MICE; Oxoid) เพียงแค่ 0.5 McFarland
เชื้อของเชื้อ Listeria แยกถูกกวาด-แผ่กระจายไปทั่ว Muellere
Hinton agar จานและแล้วแถบไมซ์ถูกวางปลอดเชื้อ
บนพื้นผิวแห้งภายใน 15 นาที แผ่นถูกบ่มที่อุณหภูมิ 35 องศาเซลเซียส
การแปล กรุณารอสักครู่..

2.2 . การทดสอบโดยใช้ดิสก์และวิธีการแพร่เชื้อค่า MICการทดสอบความไวของเชื้อ Listeria ที่ดําเนินการโดยแผ่นกระจายแบบแนะนำโดยยุโรปคณะกรรมการทดสอบโดยใช้จุลชีพ ( eucast , 2012 )มุลเลอร์ ฮินตัน แผ่นวุ้นที่ใช้ ( oxoid Hampshire , UK )การบ่มที่ 35 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 24 ชั่วโมง เชื้อเป็นมาตรฐานโดยวิธี ( spectronic 20 , Bausch & Lomb Rochester , NY ,สหรัฐอเมริกา ) ณจานที่มีความเข้มข้นประมาณ108 CFU / ml โดยใช้ผ้าฝ้าย .20 ยาต่อไปนี้ ( และโหลดดิสก์ ) , รวมทั้งใช้ในการรักษามนุษย์ลิสเทอริโอซิสทดสอบ : amoxicillin clavulanicกรด ( 30 มิลลิกรัม ; AMC ) , แอมพิซิลลิน ( 10 มิลลิกรัม ; amp ) , ซิโปรฟลอกซาซิน ( 5 มิลลิกรัม ; CIP )คลินดามัยซิน ( 2 มิลลิกรัม ; ดา ) , คลาริโทรไมซิน ( 15 มิลลิกรัม ; CLR ) , คลอแรมเฟนิคอล( 30 มิลลิกรัม ; C ) เจนตาไมซิน ( 10 มิลลิกรัม ; CN ) อิมิพีเนม ( 10 มิลลิกรัม ; IPM )ฅนโดดกระชากมิติ ( 5 มิลลิกรัม ; เลฟ ) ไลนิโซลิด ( 30 มิลลิกรัม ; lzd ) , ยา ( 10 มิลลิกรัม ;แหม่ม ) , โมซิฟลอกซาซิน ( 5 มิลลิกรัม ; mxf ) ต่อ 1 มิลลิกรัม ; วัว ) , penicillin G( 10 มิลลิกรัม ; P ) rifampicin ( 30 มิลลิกรัม ; 3 ) trimethoprimesulfamethoxazole[ 1.5 mg-23.5 มิลลิกรัม ; sxt ] , teicoplanin ( 30 มิลลิกรัม ; TEC ) เตตราไซคลีน ( 30 มิลลิกรัม ;te ) ไทกีไซไคลน์ ( 15 มิลลิกรัม ; TGC ) และแวนโคมัยซิน ( 30 มิลลิกรัม ; VA ) นอกจากนี้ในกรณีของ L . innocua ต้านทานต่ออีกห้า ยาปฏิชีวนะซีรั่ม : อีริโทรมัยซิน ( 15 มิลลิกรัม ; E ) , มิโนซัยคลิน ( 30 มิลลิกรัม ; MH )สเตรปโตมัยซิน ( 10 มิลลิกรัม ; S ) , ซัลฟาเมโทซาโซล ( 25 mg ; RL ) และแพร์ซโพลิส ( 5 มิลลิกรัม ; w ) ต่อไปนี้เป็นสายพันธุ์การควบคุมคุณภาพรวมแต่ละรุ่น : E . coli ATCC 25922 , Staphylococcus aureusATCC 25923 , Pseudomonas aeruginosa และเมื่อนำน้ำมันระเหยไปเอ็นเทโรค็อกคัส29212 faecalis ~ i .ขนาดของการเจริญเติบโต ยับยั้ง และโซนถูกวัดตีความตามไปยังจุดที่แนะนำโดยeucast ( 2013 ) สำหรับประเภทต่างๆของยาปฏิชีวนะ และสายพันธุ์ถูกจัดให้เป็นละเอียดอ่อน , กลาง ( ลดความไว )หรือป้องกันมี 62 ลิตร monocytogenes และ 85 ลิตร innocua สายพันธุ์สำหรับซึ่งการตีความของแผ่นกระจายวิธีชัดเจน6 ยาปฏิชีวนะ สายพันธุ์นี้ได้รับการยืนยันโดยกำหนดความเข้มข้นต่ำสุดที่ยับยั้ง ( MIC ) โดยระดับความเข้มข้นยาปฏิชีวนะ ( m.i.c.e. แถบแถบ ; oxoid ) เพียงแค่ 0.5 แมคฟาร์แลนด์ปริมาณของเชื้อ Listeria ถูกกวาดกระจายไป muellereฮินตันวุ้นแผ่น และก็แผ่น m.i.c.e. เป็น aseptically วางไว้บนพื้นผิวที่แห้งภายใน 15 นาที อุณหภูมิ 35 องศาเซลเซียส จาน
การแปล กรุณารอสักครู่..
