5.Detection limit for multiplex PCR

5.Detection limit for multiplex PCR approach
The detection limit is evaluated by determining the numbers
of bacteria in a multiplex PCR system with a serial dilution.
(a)The bacterial suspension of 0.5 McFarland standard (ca.
1.5 × 108 CFU/mL) is diluted in a tenfold serial dilution
and an aliquot of each dilution inoculated on an agar plate
to determine the original number of bacteria in the suspension (CFU/mL).
(b)An aliquot of each dilution is heated at 100 °C for 15 min
and then centrifuged at 10,000 ×g for 1 min. The supernatant is then used as DNA template in the PCR.
The detection limit forN. gonorrhoeae isolates is defined
by the minimum concentration of bacteria (CFU/PCR
reaction) that can be amplified and detected on the 1.5 %
agarose gel.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

5.ตรวจหาขีดจำกัดสำหรับวิธีการ multiplex PCRขีดจำกัดการตรวจสอบจะถูกประเมิน โดยกำหนดหมายเลขของแบคทีเรียในระบบ multiplex PCR กับเจือจางประจำ(a) การระงับเชื้อแบคทีเรีย 0.5 McFarland มาตรฐาน (ca1.5 × 108 CFU/mL) ถูกทำให้เจือจางในการเจือจางประจำ tenfoldและ inoculated เป็นส่วนลงตัวของแต่ละการเจือจางในจานมี agarการกำหนดหมายเลขเดิมของแบคทีเรียในการระงับ (CFU/mL)(b) เป็นส่วนลงตัวของแต่ละการเจือจางเป็นความร้อนที่ 100 ° C สำหรับ 15 นาทีแล้ว centrifuged ที่ 10000 × g ใน 1 นาที แล้วใช้ supernatant ที่เป็นดีเอ็นเอต้นแบบในการ PCRForN จำกัดตรวจสอบ gonorrhoeae แยกไว้โดยความเข้มข้นต่ำสุดของแบคทีเรีย (CFU/PCRปฏิกิริยา) ที่สามารถขยาย และตรวจพบบน 1.5%เจลอาบ agarose

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

5.Detection ขีด จำกัด สำหรับวิธี multiplex PCR
ขีด จำกัด ของการตรวจสอบได้รับการประเมินโดยการกำหนดจำนวน
ของแบคทีเรียในระบบ multiplex PCR ที่มีการเจือจางอนุกรม.
(ก) การระงับแบคทีเรีย 0.5 McFarland มาตรฐาน (แคลิฟอร์เนีย
1.5 × 108 โคโลนี / มิลลิลิตร) คือ เจือจางในการเจือจางอนุกรมสิบเท่า
และ aliquot ของแต่ละเจือจางเชื้อบนจานอาหารเลี้ยงเชื้อ
เพื่อตรวจสอบจำนวนเดิมของแบคทีเรียในการระงับ (โคโลนี / มิลลิลิตร).
(ข) ของแต่ละ aliquot เจือจางความร้อนที่ 100 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 15 นาที
และปั่นแล้วที่ 10,000 ×กรัมเป็นเวลา 1 นาที สารละลายที่ใช้แล้วเป็นแม่แบบในดีเอ็นเอ PCR.
ขีด จำกัด ของการตรวจสอบ Forn gonorrhoeae แยกถูกกำหนด
โดยความเข้มข้นต่ำสุดของเชื้อแบคทีเรีย (CFU / PCR
ปฏิกิริยา) ที่สามารถขยายและตรวจพบใน 1.5%
agarose เจล

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

5 . ขีดจำกัดสำหรับ multiplex PCR วิธี
ขีดจำกัดคือการประเมินโดยการกำหนดตัวเลข
ของแบคทีเรียในระบบ multiplex PCR กับทากทะเล .
( a ) bacterial suspension 0.5 แมคฟาร์แลนด์มาตรฐาน ( .
1.5 × 108 CFU / ml ) เจือจางใน
เจือจาง 10 เท่า และการเทศนาของอนุกรม การปลูกเชื้อบนอาหารแต่ละจาน
หาต้นฉบับจำนวนแบคทีเรียในการระงับ ( CFU / ml )
( B ) เป็นส่วนลงตัวของแต่ละ dilution คืออุณหภูมิ 100 องศา C เป็นเวลา 15 นาที และระดับที่ 10
กรัม× 1 นาที หลังจากนั้นนำใช้เป็นแม่แบบใน DNA PCR
ขีดจำกัดของพื้นที่ . โก โน เรียสายพันธุ์กำหนดความเข้มข้นต่ำสุด
โดยแบคทีเรีย ( CFU /
ปฏิกิริยา PCR ) ที่สามารถขยายและตรวจพบใน 15 %
เจล .