All enzyme activity assays were est

All enzyme activity assays were established on 96-well microtiter plates. Each sample was treated with 0.005% saponin solution to reduce the surface tension of BBM vesicles. The activity of the disaccharidases lactase (LAC, EC 3.2.1.23), maltase (MAL, EC 3.2.1.20), and sucrase (SUC, EC 3.2.1.48) in BBM was determined by measuring the abundance of glucose released during incubation for 30 min at 37 °C with the substrates lactose, maltose, and sucrose, respectively. The liberated glucose was detected with a Tris-glucose oxidase-peroxidase reagent at A405 in a Tecan Sunrise™ microplate reader (Tecan Austria GmbH, Grödig, Austria) adjusted to the method of Dahlqvist (1968). The activity of aminopeptidase-N (APN, EC 3.4.11.2) in BBM was determined according to Willing and Van Kessel (2009). Briefly, 10 mM l-alanine-4-nitroanilide with 50 mM Tris–HCl at pH 7.3 was used as substrate and absorption was determined at 405 nm. The standard curve ranged from 6.25 to 200 μM of 4-nitroaniline and 50 mM Tris–HCl was used as blank.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ก่อตั้งขึ้นบนแผ่น 96 ดี microtiter assays กิจกรรมของเอนไซม์ทั้งหมด แต่ละอย่างถูกรักษา ด้วยโซลูชัน saponin 0.005% เพื่อลดแรงตึงผิวของอสุจิ BBM กิจกรรม ของ disaccharidases lactase (LAC, EC 3.2.1.23), maltase (MAL, EC 3.2.1.20), sucrase (SUC, EC 3.2.1.48) ใน BBM ถูกกำหนด โดยการวัดความอุดมสมบูรณ์ของกลูโคสที่นำออกใช้ในระหว่างการบ่มใน 30 นาทีที่ 37 ° C ด้วยพื้นผิวย่อยแลคโตส maltose และ ซูโครส ตามลำดับ ตรวจพบน้ำตาลใน liberated กับรีเอเจนต์ oxidase peroxidase เป็นทริสเรทติ้งกลูโคสที่ A405 ในซันไรส์ Tecan ™ microplate อ่าน (Tecan GmbH ประเทศออสเตรีย Grödig ออสเตรีย) ปรับปรุงวิธีการ Dahlqvist (1968) กำหนดกิจกรรมของ aminopeptidase-N (APN, EC 3.4.11.2) ใน BBM ตามยินดี และ Van Kessel (2009) สั้น ๆ 10 มม. l-อะลานีน-4-nitroanilide กับ 50 มม.ตรี – HCl pH 7.3 ถูกใช้เป็นพื้นผิว และดูดซึมได้กำหนดที่ 405 nm มีใช้เส้นโค้งมาตรฐานที่อยู่ในช่วงจาก 6.25 การ μM 200 4 nitroaniline และ 50 มม.ตรี – HCl เป็นว่างเปล่า

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การตรวจการทำงานของเอนไซม์ทั้งหมดได้รับการจัดตั้งขึ้นเมื่อวัน 96 หลุมแผ่นไมโคร ตัวอย่างแต่ละคนได้รับการรักษาด้วยวิธีการแก้ปัญหา 0.005% ซาโปนินเพื่อลดแรงตึงผิวของถุง BBM กิจกรรมของ disaccharidases แลคเตส (LAC, EC 3.2.1.23) maltase (MAL, EC 3.2.1.20) และ sucrase (SUC, EC 3.2.1.48) ใน BBM ได้รับการกำหนดโดยการวัดความอุดมสมบูรณ์ของน้ำตาลกลูโคสที่ปล่อยออกมาในระหว่างการบ่ม 30 นาทีที่ 37 ° C มีแลคโตสพื้นผิว, มอลโตสและซูโครสตามลำดับ กลูโคสปลดปล่อยพบกับทริสกลูโคสสารเอนไซม์ peroxidase ที่-A405 ใน Tecan พระอาทิตย์™อ่าน microplate (Tecan ออสเตรีย GmbH, Grodig, ออสเตรีย) ปรับวิธีการของ Dahlqvist นี้ (1968) กิจกรรมของ aminopeptidase-N (APN, EC 3.4.11.2) ใน BBM ได้รับการพิจารณาตามเต็มใจและแวนเคสเซล (2009) สั้น ๆ , 10 มิลลิ l-อะลานีน-4-nitroanilide 50 มิลลิ Tris-HCl ที่ pH 7.3 ที่ใช้เป็นสารตั้งต้นและการดูดซึมได้กำหนดที่ 405 นาโนเมตร โค้งมาตรฐานอยู่ในช่วง 6.25-200 ไมครอน 4 nitroaniline และ 50 มิลลิ Tris-HCl ถูกใช้เป็นที่ว่างเปล่า

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

พบกิจกรรมของเอนไซม์ที่สร้างขึ้นด้วยไมโคร 96 แผ่น แต่ละตัวอย่างถูกปฏิบัติ ด้วยโซลูชันซาโปนิน 0.005% ลดแรงตึงผิวของ BBM เล็ก ๆ กิจกรรมของ disaccharidases แลคเตส ( ครั่ง , EC 3.2.1.23 ) มอลเทส ( มัล , EC 3.2.1.20 ) ตรง ( SUC , EC ดำเนินงาน .48 ) ใน BBM ถูกกำหนดโดยการวัดปริมาณกลูโคสออกในช่วงระยะเวลา 30 นาทีที่ 37 ° C กับพื้นผิวแลคโตส , มอลโตส และซูโครส ตามลำดับ ปลดปล่อยกลูโคสกลูโคสพบกับบริษัทเปอร์รีเอเจนต์ที่ a405 TECAN พระอาทิตย์ขึ้นในพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทย™อ่าน ( TECAN Austria GmbH , GR öขุด ออสเตรีย ) ปรับวิธีการ dahlqvist ( 1968 )กิจกรรมของ aminopeptidase-n ( APN , EC 3.4.11.2 ) ใน BBM ตั้งใจตามความตั้งใจและแวนเคสเซล ( 2009 ) สั้น ๆ , 10 มม. 50 มม. โดย l-alanine-4-nitroanilide – HCl ที่ pH 7.3 มาใช้เป็นสารอาหารและการดูดซึมตั้งใจที่ 405 nm . เส้นโค้งมาตรฐาน ตั้งแต่ 7.00 ถึง 200 เมตร และμ 4-nitroaniline 50 มม. โดย– HCl ใช้เปล่า