the extracted material was dissolve

the extracted material was dissolved in methanol and separated
by TLC using chloroform–methanol (9:1) as the solvent.
Plates were visualized using both short and long wavelength
UV, sprayed with vanillin in dilute sulphuric acid in
ethanol (vanillin 1) and heated. The plates were divided
into bands (approximately 1 cm), taking care to isolate UV
active spots. The bands were scraped and silica scrapings
eluted with methanol. Analytical HPLC was performed.
The HPLC System (Shimadzu, Kyoto, Japan) was equipped
with a pump (LC-10 ATVP), a PDA detector (LC-10
MAVP), Rheodyne (Cotati, CA, USA) model 7125 injector
with a 20 ll loop. HPLC separation was achieved on a C8
column (Lichrocart, Purosphere; 250 mm, 4 mm, 5 lm) at
25 ± 3C in which the mobile phase consisted of a mixture
of acetonitrile and TDW (80:20) v/v at a flow rate of
1 ml min-1 and temperature 30.0 ± 3C. Column effluent
was monitored at 225 nm. Data was acquired and processed
using CLASS-VP software (version 6.14, Shimadzu,
Japan). Peaks were collected, lyophilized, and tested
for antibacterial activity against Xcc by in vitro dual plate
assay. The bioactive compounds obtained by preparative
HPLC were dissolved in deuterated methanol and analysed
by NMR. All the NMR experiments were performed on
Bruker Biospin Avance II 800 MHz NMR spectrometer
equipped with a 5 mm 1
H/13C/15N triple resonance TCI
cryoprobe. The NMR spectra were recorded at 300 K in a
non-spinning mode by dissolving the purified extract in
CDCl3 99.8% (Sigma Aldrich) with a total sample volume
of 600 ll in the 5-mm NMR tube. The deuterated chloroform
chemical shift peak at 7.26 ppm was taken as internal
reference for 1
H NMR and 77.36 ppm for 13C NMR. 1
H
NMR spectrum was acquired with 65,536 data points,
spectral width of 16.447 kHz, and 64 free-induction decays
were averaged with a total relaxation delay of 4 s. The 13C
NMR experiment was performed at 201.23 MHz with
spectral width of 48.076 kHz; 65,536 data points; pulse
width 90 (10 ls); relaxation delay 2 s.
M

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วัสดุสกัดถูกละลายในเมทานอลและแยกออกจากกัน
โดย TLC ใช้คลอโรฟอร์มเมทานอล (9: 1). เป็นตัวทำละลาย
แผ่นถูกมองเห็นโดยใช้ทั้งในระยะสั้นและระยะยาวความยาวคลื่น
รังสียูวีพ่นด้วยวานิลในกรดกำมะถันเจือจางใน
เอทานอล (วานิล 1) และให้ความร้อน . แผ่นถูกแบ่ง
ออกเป็นวงดนตรี (ประมาณ 1 ซม.), การดูแลเพื่อแยกยูวี
จุดที่ใช้งาน วงดนตรีที่ได้รับการคัดลอกและ scrapings ซิลิกา
ชะด้วยเมทานอล HPLC เพื่อการวิเคราะห์ที่ได้ดำเนินการ.
ระบบ HPLC (Shimadzu เกียวโตญี่ปุ่น) พร้อม
กับปั๊ม (LC-10 ATVP) เครื่องตรวจจับ PDA (LC-10
MAVP) Rheodyne (โคตา, CA, USA) รุ่น 7125 หัวฉีด
ด้วย ห่วง 20 LL แยก HPLC ก็ประสบความสำเร็จใน C8
คอลัมน์ (Lichrocart, Purosphere 250 มมมม 4, 5 LM) ที่
25 ± 3C ซึ่งในเฟสเคลื่อนที่ประกอบด้วยส่วนผสม
ของ acetonitrile และ TDW (80:20) v / V ที่ไหล อัตรา
1 มิลลิลิตรนาที 1 และอุณหภูมิ 30.0 ± 3C น้ำทิ้งคอลัมน์
คือการตรวจสอบที่ 225 นาโนเมตร ข้อมูลที่ได้มาและประมวลผล
โดยใช้ซอฟต์แวร์ CLASS-VP (รุ่น 6.14, Shimadzu,
ญี่ปุ่น) ยอดเขาที่ถูกเก็บรวบรวม, แห้ง, และผ่านการทดสอบ
สำหรับฤทธิ์ต้านแบคทีเรียกับ Xcc โดยในหลอดทดลองจานคู่
ทดสอบ สารออกฤทธิ์ทางชีวภาพที่ได้จากการเตรียม
HPLC ถูกละลายในเมทานอล deuterated และวิเคราะห์
โดย NMR ทุกการทดลอง NMR ได้ดำเนินการใน
Bruker BIOSPIN Avance II 800 MHz NMR สเปกโตรมิเตอร์
พร้อมกับ 5 มม 1
H / 13C / 15N เสียงสะท้อนสาม TCI
cryoprobe NMR สเปกตรัมถูกบันทึกไว้ที่ 300 K ใน
โหมดที่ไม่ใช่การปั่นโดยการละลายสารสกัดบริสุทธิ์ใน
CDCl3 99.8% (ซิกม่าดิช) มีปริมาณกลุ่มตัวอย่างทั้งหมด
600 LL ในหลอด NMR 5 มม คลอโรฟอร์ม deuterated
การเปลี่ยนแปลงทางเคมีสูงสุดที่ 7.26 ppm ถูกนำมาเป็นภายใน
อ้างอิงสำหรับ 1
H NMR และ 77.36 ppm สำหรับ 13C NMR 1
H
NMR สเปกตรัมได้มา 65,536 จุดข้อมูล
ความกว้างของราง 16.447 เฮิร์ทซ์และ 64 สูญสลายฟรีเหนี่ยวนำ
ถูกเฉลี่ยมีความล่าช้าการพักผ่อนรวม 4 s 13C
ทดลอง NMR เป็นที่ 201.23 MHz กับ
ความกว้างของราง 48.076 เฮิร์ทซ์; 65,536 จุดข้อมูล; ชีพจร
ความกว้าง 90 (10 LS); ผ่อนคลายความล่าช้า 2 เอส.
เอ็ม