To estimate the amount of EGCG boun

To estimate the amount of EGCG bound to the proteins, the total phenolic content of protein–EGCG complexes was determined using the Folin–Ciocalteu method, and the total phenolic content was also confirmed by HPLC (high performance liquid chromatography). As shown in Table 2, the total phenolic content of covalent protein–EGCG complexes prepared by LA, LG, LF and SC was 87.7, 101.7, 97.9 and 104.0 mg/g, respectively. While the total phenolic content of non-covalent protein–EGCG complexes prepared by LA, LG, LF and SC was 31.3, 35.9, 31.6 and 33.4 mg/g, respectively, which was much lower than that of covalent protein–EGCG complexes. This result is in agreement with our previous study (Wang et al., 2014), which shows that LA can bind more EGCG when covalent interactions occur. It may be deduced that covalent modification of milk proteins can lead to stronger EGCG-binding affinities of milk proteins. Besides, as shown in Table 2, EGCG-binding affinities of proteins in the covalent coupling reaction followed the order: SC > LG > LF > LA. Since EGCG can only covalently bind to specific amino acids with active groups exposed for reaction, differences in EGCG-binding affinities may be accounted for differences in protein conformational properties and amino acid composition. Specifically, LA adopts the molten globule conformation and has a compact globular structure (Permyakov & Berliner, 2000). LG has flexible loop regions and free sulfhydryl groups available for reaction (Sawyer & Kontopidis, 2000). LF has a hinge region between two lobes to provide additional flexibility (Gonzalez-Chavez, Arevalo-Gallegos, & Rascon-Cruz, 2009). SC is an unfolded protein and has largely flexible structures (Horne, 2002). Thus, it may be assumed that flexible structures of proteins and exposed active groups are advantageous in covalent interactions between proteins and EGCG.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การประเมินปริมาณของ EGCG ที่ผูกไว้กับโปรตีน ฟีนอเนื้อหารวมของคอมเพล็กซ์โปรตีน – EGCG ถูกกำหนดโดยใช้วิธีท่อง – Ciocalteu และฟีนอเนื้อหาทั้งหมดยังยืนยันการ HPLC (สารละลายน้ำ) ดังแสดงในตารางที่ 2 ฟีนอเนื้อหาทั้งหมดของโควาเลนต์โปรตีน – EGCG คอมเพล็กซ์โดย LA, LG, LF และ SC ก็ 87.7, 101.7, 97.9 และ 104.0 mg/g ตามลำดับ ในขณะที่เตรียมเนื้อหาฟีนอรวมของโปรตีนไม่ใช่โควาเลนต์ – EGCG คอมเพล็กซ์ โดย LA, LG, LF และ SC 31.3, 35.9, 31.6 และ 33.4 mg/g ตามลำดับ ซึ่งถูกมากต่ำกว่าของโควาเลนต์โปรตีน – EGCG คอมเพล็กซ์ ผลลัพธ์นี้คือข้อตกลงการศึกษาก่อนหน้านี้ของเรา (Wang et al. 2014), ซึ่งแสดงให้เห็นว่า ลาสามารถผูก EGCG เพิ่มเติมเมื่อเกิดปฏิสัมพันธ์โควาเลนต์ อาจ deduced ว่า ปรับเปลี่ยนโควาเลนต์ของโปรตีนจากน้ำนมสามารถนำไปสู่ affinities EGCG ผูกแข็งแกร่งของโปรตีนจากน้ำนม นอกเหนือจาก ดังแสดงในตารางที่ 2, affinities EGCG รวมของโปรตีนในโควาเลนต์คลัปปฏิกิริยาตามใบสั่ง: SC > LG > LF > LA. ตั้งแต่ EGCG เท่านั้นด้วยสามารถผูกกับกรดอะมิโนเฉพาะกับกลุ่มใช้งานที่เปิดเผยสำหรับปฏิกิริยา ความแตกต่างใน affinities EGCG ผูกอาจจะลงบัญชีสำหรับความแตกต่างในโปรตีนโครงสร้างคุณสมบัติและกรดอะมิโนองค์ประกอบ เฉพาะ LA adopts โครงสร้าง globule หลอมละลาย และมีโครงสร้างกระจุกขนาดกะทัดรัด (Permyakov & สระว่ายน้ำอุ่น 2000) LG ได้ยืดหยุ่นวงภูมิภาคและกลุ่ม sulfhydryl ฟรีสำหรับปฏิกิริยา (ซอว์เยอร์ & Kontopidis, 2000) LF มีบริเวณบานพับระหว่างกลีบที่ 2 ให้เพิ่มความยืดหยุ่น (ชาเวซกอนซาเลซ Gallegos อเรวาโล และครู ซ Rascon, 2009) SC เป็นโปรตีนการกางออก และมีโครงสร้างยืดหยุ่นส่วนใหญ่ (ฮอร์น 2002) ดังนั้น มันอาจจะสันนิษฐานว่า ยืดหยุ่นโครงสร้างของโปรตีนและกลุ่มใช้งานที่เปิดเผยมีประโยชน์ในปฏิสัมพันธ์โควาเลนต์ระหว่างโปรตีนและ EGCG

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ในการประมาณการปริมาณของสาร EGCG ผูกไว้กับโปรตีนปริมาณฟีนอลรวมของคอมเพล็กซ์โปรตีน EGCG ถูกกำหนดโดยใช้วิธี Folin-Ciocalteu และเนื้อหาฟีนอลทั้งหมดนอกจากนี้ยังได้รับการยืนยันโดยวิธี HPLC (ประสิทธิภาพสูงของเหลว chromatography) ดังแสดงในตารางที่ 2 เนื้อหาฟีนอลรวมของโควาเลนต์คอมเพล็กซ์โปรตีน EGCG จัดทำโดย LA, LG, LF และ SC เป็น 87.7, 101.7, 97.9 และ 104.0 มิลลิกรัม / กรัมตามลำดับ ในขณะที่เนื้อหาฟีนอลรวมของคอมเพล็กซ์โปรตีน EGCG ที่ไม่ใช่โควาเลนต์ที่จัดทำโดย LA, LG, LF และ SC เป็น 31.3, 35.9, 31.6 และ 33.4 มิลลิกรัม / กรัมตามลำดับซึ่งต่ำกว่าที่โควาเลนต์คอมเพล็กซ์โปรตีน EGCG นี่คือผลในข้อตกลงกับการศึกษาก่อนหน้าของเรา (Wang et al., 2014) ซึ่งแสดงให้เห็นว่าสามารถผูก LA EGCG มากขึ้นเมื่อมีปฏิสัมพันธ์โควาเลนต์เกิดขึ้น มันอาจจะอนุมานได้ว่าการปรับเปลี่ยนโควาเลนต์ของโปรตีนนมสามารถนำไปสู่ความพอใจที่แข็งแกร่ง EGCG ผูกพันของโปรตีนนม นอกจากนี้ตามที่แสดงในตารางที่ 2 EGCG ผูกพันชอบพอของโปรตีนในปฏิกิริยาโควาเลนต์มีเพศสัมพันธ์ตามลำดับที่: SC> LG> LF> LA ตั้งแต่ EGCG สามารถ covalently ผูกกับกรดอะมิโนที่เฉพาะเจาะจงกับกลุ่มที่ใช้งานสัมผัสสำหรับปฏิกิริยาความแตกต่างในความชอบพอ EGCG ผูกพันอาจจะคิดแตกต่างในโปรตีนคุณสมบัติโครงสร้างและองค์ประกอบของกรดอะมิโน โดยเฉพาะ LA adopts โครงสร้างเม็ดหลอมเหลวและมีโครงสร้างเป็นรูปทรงกลมที่มีขนาดกะทัดรัด (Permyakov & Berliner, 2000) LG มีห่วงภูมิภาคที่มีความยืดหยุ่นและกลุ่ม sulfhydryl ฟรีสำหรับปฏิกิริยา (เลื่อยและ Kontopidis, 2000) LF มีบานพับภูมิภาคระหว่างสองแฉกเพื่อให้ความยืดหยุ่นเพิ่มเติม (กอนซาเล-ชาเวซ Arevalo-Gallegos และ Rascon ครูซ 2009) SC เป็นโปรตีนกางออกและมีโครงสร้างที่ยืดหยุ่นส่วนใหญ่ (ฮอร์น, 2002) ดังนั้นจึงอาจจะคิดว่าเค้ามีความยืดหยุ่นของโปรตีนและสัมผัสกลุ่มที่ใช้งานมีข้อได้เปรียบในการมีปฏิสัมพันธ์โควาเลนต์ระหว่างโปรตีนและสาร EGCG

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ในการประมาณการปริมาณของ EGCG ผูกไว้กับโปรตีน ปริมาณฟีนอลิกทั้งหมดของโปรตีนและสารประกอบ EGCG ถูกกำหนดโดยใช้ folin – ciocalteu วิธีและปริมาณฟีนอลิกทั้งหมดยังได้รับการยืนยันโดยวิธี HPLC ( High performance Liquid Chromatography ) ดังแสดงในตารางที่ 2 เนื้อหาฟีนอลิกรวมของโปรตีนเชิงซ้อน ( EGCG ที่เตรียมโดยการลา , LG , LF และ SC เป็น 87.7 101.7 97.9 , และ , 104.0 มิลลิกรัม / กรัม ตามลำดับ ขณะที่ปริมาณฟีนอลิกทั้งหมดไม่ใช่การโปรตีนเชิงซ้อน ( EGCG เตรียมจากลา , LG , LF และ SC เป็นเช่นกลุ่มร้อยละ , และ , ลลามิลลิกรัม / กรัม ตามลำดับ ซึ่งต่ำกว่าที่ของโควาเลนต์ ( EGCG โปรตีนคอมเพล็กซ์ ผลที่ได้นี้สอดคล้องกับการศึกษาก่อนหน้าของเรา ( Wang et al . , 2010 ) ซึ่งแสดงให้เห็นว่าลาสามารถผูก EGCG เพิ่มเติมเมื่อปฏิสัมพันธ์การเกิดขึ้น มันอาจจะอนุมานว่ามณฑลอันฮุยของโปรตีนในนมจะทำให้แข็งแกร่ง EGCG มีผลผูกพัน affinities ของโปรตีนนม นอกจากนี้ ดังแสดงในตารางที่ 2 , EGCG มีผลผูกพัน affinities ของโปรตีนในปฏิกิริยาคู่ควบการตามคำสั่ง : D > LG > ถ้า > LA ตั้งแต่ EGCG สามารถ covalently ผูกเฉพาะกรดอะมิโนกับงานกลุ่มที่ได้รับสำหรับปฏิกิริยา ความแตกต่างในการ affinities EGCG อาจจะคิดแตกต่างกันในคุณสมบัติของโปรตีนและกรดอะมิโนองค์ประกอบ โดยเฉพาะลา adopts โครงสร้างเม็ดกลมเล็ก และมีขนาดกะทัดรัด โครงสร้างแบบทรงกลม ( permyakov & เบอร์ลิน , 2000 ) LG ได้ภูมิภาควงยืดหยุ่นและสามารถตอบสนองกลุ่ม sulfhydryl อิสระ ( ซอว์เยอร์ & kontopidis , 2000 ) ถ้ามีบานพับ เขตระหว่างสองแฉกเพื่อให้มีความยืดหยุ่นเพิ่มเติม ( กอนซาเลซ ชาเวส , อเรวาโล กาเยกอส และ rascon ครูซ , 2009 ) SC เป็นโปรตีนห่อและมีโครงสร้างที่ยืดหยุ่น ส่วนใหญ่ ( ฮอร์น , 2002 ) ดังนั้น จึงอาจจะสรุปได้ว่า โครงสร้างที่ยืดหยุ่นของโปรตีนและสัมผัสงานกลุ่มจะได้ประโยชน์ในการปฏิสัมพันธ์ระหว่างโปรตีนและ EGCG .