Certain species of the genus Cronob

Certain species of the genus Cronobacter are considered opportunistic pathogens, but their detection in milk products according to ISO/TS 22964 may take up to six days. The aim of this study was to develop a fast and sensitive PCR-based detection system for these species including enrichment, DNA-isolation and detection by real-time PCR, using the outer membrane protein gene ompA as a target. The assay was successfully validated using type strains of the genus Cronobacter, as well as 18 strains of closely related genera as controls. A total of 40 Cronobacter spp. food isolates yielded positive results, while the food matrix itself did not influence the PCR reaction. An equal detection limit as achieved with the ISO/TS 22964 method was established in this study, when 0.01 CFU Cronobacter sakazakii DSM 4485T per gram powdered infant formula were successfully detected after 28 days of storage at ambient temperature. In comparison to the ISO/TS 22964 method, the method described here has an equal detection limit, but offers a specific detection at the genus level in an analysis time of 24 h.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

กำลังยกโรคบางชนิดของสกุล Cronobacter แต่การตรวจสอบผลิตภัณฑ์นมตามมาตรฐาน ISO/TS 22964 อาจใช้เวลาถึงหกวัน จุดมุ่งหมายของการศึกษานี้คือการ พัฒนาระบบรวดเร็ว และที่สำคัญผลตรวจสอบสำหรับชนิดเหล่านี้รวมทั้งเติมเต็ม แยกดีเอ็นเอ และตรวจ ด้วย PCR แบบเรียลไทม์ การใช้เมมเบรนนอกโปรตีนยีน ompA เป็นเป้าหมาย การทดสอบที่สำเร็จตรวจใช้ชนิดสายพันธุ์ของพืชสกุล Cronobacter ตลอดจนสายพันธุ์ 18 ของสกุลที่เกี่ยวข้องอย่างใกล้ชิดเป็นตัวควบคุม จำนวน 40 Cronobacter โออาหารแยกหาผลบวก ในขณะที่เมทริกซ์อาหารเองไม่ได้มีอิทธิพลต่อปฏิกิริยา PCR เรียบร้อยแล้วพบขีดจำกัดตรวจสอบเท่าที่มี 22964 ISO/TS วิธีก่อตั้งขึ้นในการศึกษานี้ เมื่อ 0.01 CFU Cronobacter sakazakii DSM 4485T ต่อกรัมผงสูตรทารกหลังจาก 28 วันของการจัดเก็บที่อุณหภูมิ โดยวิธี 22964 ISO/TS วิธีที่อธิบายไว้ที่นี่มีจำกัดการตรวจสอบเท่า แต่ให้ตรวจสอบเฉพาะระดับสกุลในการวิเคราะห์เวลา 24 ชม

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

บางชนิด Cronobacter ประเภทได้รับการพิจารณาเชื้อโรคฉวยโอกาส แต่การตรวจสอบของพวกเขาในผลิตภัณฑ์นมตามมาตรฐาน ISO / TS 22964 อาจใช้เวลาถึงหกวัน จุดมุ่งหมายของการศึกษาครั้งนี้คือการพัฒนาอย่างรวดเร็วและที่สำคัญระบบการตรวจ PCR ที่ใช้สำหรับสายพันธุ์นี้รวมทั้งการตกแต่งแยกดีเอ็นเอและการตรวจสอบโดยวิธี PCR แบบ real-time โดยใช้ยีนโปรตีนเยื่อหุ้มชั้นนอก OMPA เป็นเป้าหมาย การทดสอบประสบความสำเร็จในการตรวจสอบได้โดยใช้สายพันธุ์ของพืชและสัตว์ชนิด Cronobacter เช่นเดียวกับ 18 สายพันธุ์ของจำพวกเกี่ยวข้องอย่างใกล้ชิดเป็นตัวควบคุม รวม 40 Cronobacter เอสพีพี ไอโซเลทอาหารส่งผลในเชิงบวกในขณะที่เมทริกซ์อาหารที่ตัวเองไม่ได้มีผลต่อการเกิดปฏิกิริยา PCR ขีด จำกัด การตรวจสอบเท่ากันประสบความสำเร็จกับการรับรองมาตรฐาน ISO / TS 22964 วิธีการก่อตั้งขึ้นในการศึกษาครั้งนี้เมื่อ 0.01 CFU DSM Cronobacter sakazakii 4485T ต่อกรัมผงสูตรทารกถูกตรวจพบหลังจากที่ประสบความสำเร็จใน 28 วันของการจัดเก็บที่อุณหภูมิห้อง ในการเปรียบเทียบกับมาตรฐาน ISO / TS 22964 วิธีการวิธีการที่อธิบายที่นี่มีการตรวจสอบวงเงินเท่ากัน แต่มีการตรวจสอบเฉพาะในระดับสกุลในเวลาวิเคราะห์ 24 ชั่วโมง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

บางชนิดของพืชสกุล cronobacter ถือว่าฉวยโอกาสก่อโรค แต่การตรวจสอบผลิตภัณฑ์นม ตามมาตรฐาน ISO / TS 22964 อาจใช้เวลาถึง 6 วัน จุดมุ่งหมายของการศึกษานี้คือ เพื่อพัฒนาเทคนิคที่รวดเร็วและไวขึ้น ระบบตรวจจับเหล่านี้ชนิดรวมถึงการแยกและการตรวจหาดีเอ็นเอด้วยวิธี PCR แบบเรียลไทม์ โดยใช้โปรตีนผิวนอกของยีนสูงสุดเป็นเป้าหมายวิเคราะห์ได้ตรวจสอบการใช้ชนิดสายพันธุ์ของพืชสกุล cronobacter เช่นเดียวกับสกุล 18 สายพันธุ์ที่เกี่ยวข้องอย่างใกล้ชิดเช่นการควบคุม 40 cronobacter spp . อาหารสายพันธุ์ให้ผลผลลัพธ์เป็นบวก ในขณะที่เมทริกซ์อาหารเองไม่มีผลต่อการตรวจปฏิกิริยา เท่ากับขีดจำกัดเท่าที่ทำได้ด้วย ISO / TS 22964 วิธีการก่อตั้งขึ้นในการศึกษานี้เมื่อ 001 CFU cronobacter sakazakii DSM 4485t ต่อกรัมผงสูตรทารกถูกเรียบร้อยแล้ว ตรวจพบหลังจาก 28 วันของการเก็บรักษาที่อุณหภูมิห้อง ในการเปรียบเทียบกับมาตรฐาน ISO / TS 22964 วิธี , วิธีการที่อธิบายที่นี่มีขีดจำกัดของการวิเคราะห์เท่ากับ แต่เสนอการตรวจสอบเฉพาะสกุลระดับในการวิเคราะห์เวลา 24 ชั่วโมง