Rhizosecretion is an attractive tec

Rhizosecretion is an attractive technology for the production of recombinant proteins from transgenic plants. However, to date, yields of plant-derived recombinant pharmaceuticals by this method have been too low for commercial viability. Studies conducted focused on three transgenic plant lines grown in hydroponic culture medium, two expressing monoclonal antibodies Guy’s 13 and 4E10 and one expressing a small microbicide polypeptide cyanovirin-N. Rhizosecretion rates increased significantly by the addition of the plant growth regulator α-naphthalene acetic acid. The maximum rhizosecretion rates achieved were 58 μg/g root dry weight/24 h for Guy’s 13, 10.43 μg/g root dry weight/24 h for 4E10, and 766 μg/g root dry weight/24 h for cyanovirin-N, the highest figures so far reported for a full-length antibody and a recombinant protein, respectively. The plant growth regulators indole-butyric acid, 6-benzylaminopurine, and kinetin were also demonstrated to increase rhizosecretion of Guy’s 13. The effect of the growth regulators differed, as α-naphthalene acetic acid and indole-butyric acid increased the root dry weight of hydroponic plants, whereas thecytokinins benzylaminopurine and kinetin increased rhizosecretion without affecting root mass. A comparative glycosylation analysis between MAb Guy’s 13 purified from either hydroponic culture medium or from leaf extracts demonstrated a similar pattern of glycosylation comprising high mannose to complex glycoforms. Analysis of the hydroponic culture medium at harvest revealed significantly lower and less complex levels of proteolytic enzymes, in comparison with leaf extracts, which translated to a higher proportion of intact Guy’s 13 IgG in relation to other IgG products. Hydroponic medium could be added directly to a chromatography column for affinity purification, allowing simple and rapid production of high purity Guy’s 13 antibody. In addition to the attractiveness of controlled cultivation within a contained environment for pharmaceutical-producing plants, this study demonstrates advantages with respect to the quality and downstream purification of recombinant proteins.—Drake, P. M. W., Barbi, T., Sexton, A., McGowan, E., Stadlmann, J., Navarre, C., Paul, M. J., Ma, J. K.-C. Development of rhizosecretion as a production system for recombinant proteins from hydroponic cultivated tobacco.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Rhizosecretion เป็นเทคโนโลยีที่น่าสนใจสำหรับการผลิตโปรตีนจากพืชดัดแปรพันธุกรรม อย่างไรก็ตามในวันที่อัตราผลตอบแทนของพืชที่ได้มาจากยา recombinant โดยวิธีการนี​​้ได้รับต่ำเกินไปสำหรับศักยภาพในเชิงพาณิชย์ การศึกษาดำเนินการมุ่งเน้นไปที่สามสายพันธุ์พืชที่ปลูกในอาหารเลี้ยงเชื้อ hydroponic สองแสดงโคลนอลแอนติบอดีผู้ชาย 13 และ 4E10 และเป็นหนึ่งในการแสดงเพปไทด์ไมโครบิไซด์เล็ก cyanovirin-N อัตรา Rhizosecretion เพิ่มขึ้นอย่างมากโดยการเติมสารควบคุมการเจริญเติบโตของพืชα-เหม็นกรดอะซิติก อัตรา rhizosecretion สูงสุดประสบความสำเร็จได้ 58 ไมโครกรัม / กรัมน้ำหนักแห้งราก / 24 ชั่วโมงสำหรับผู้ชาย 13, 10.43 ไมโครกรัม / กรัมน้ำหนักแห้งราก / 24 ชั่วโมงสำหรับ 4E10 และ 766 ไมโครกรัม / กรัมน้ำหนักแห้งราก / 24 ชั่วโมงสำหรับ cyanovirin-N, ตัวเลขที่สูงที่สุดเพื่อให้ห่างไกลรายงานแอนติบอดียาวเต็มรูปแบบและโปรตีนตามลำดับ ควบคุมการเจริญเติบโตกรดอินโดลบิวทิริก-6-benzylaminopu​​rine และ kinetin ถูกแสดงให้เห็นถึงยังเพิ่ม rhizosecretion ของผู้ชาย 13. ผลของการควบคุมการเจริญเติบโตที่แตกต่างกันเช่นกรดอะซิติกα-เหม็นและกรดอินโดล-butyric รากเพิ่มขึ้นของน้ำหนักแห้ง hydroponic พืชในขณะที่ thecytokinins benzylaminopu​​rine และ kinetin rhizosecretion เพิ่มขึ้นโดยไม่มีผลต่อมวลราก การวิเคราะห์เปรียบเทียบระหว่าง glycosylation แอนติบอดีผู้ชาย 13 บริสุทธิ์จากทั้งสื่อวัฒนธรรม hydroponic หรือจากสารสกัดจากใบแสดงให้เห็นถึงรูปแบบที่คล้ายกันของ glycosylation ประกอบ mannose สูงเพื่อ glycoforms ซับซ้อน การวิเคราะห์ของสื่อวัฒนธรรม hydroponic ที่เก็บเกี่ยวเปิดเผยอย่างมีนัยสำคัญที่ลดลงและระดับที่ซับซ้อนน้อยกว่าของเอนไซม์โปรตีนในการเปรียบเทียบกับสารสกัดจากใบซึ่งแปลเป็​​นสัดส่วนที่สูงขึ้นจาก 13 คนเหมือนเดิมของ IgG ในความสัมพันธ์กับผลิตภัณฑ์อื่น ๆ IgG ไฮโดรโปนิกลางอาจจะเพิ่มโดยตรงกับคอลัมน์โครมาสำหรับการทำให้บริสุทธิ์ความสัมพันธ์ที่ช่วยให้การผลิตที่ง่ายและรวดเร็วของแอนติบอดีที่มีความบริสุทธิ์สูง 13 ของผู้ชาย นอกเหนือจากความน่าสนใจของการเพาะปลูกการควบคุมภายในสภาพแวดล้อมที่มีอยู่สำหรับยาที่ผลิตพืชการศึกษาครั้งนี้แสดงให้เห็นถึงข้อได้เปรียบที่เกี่ยวกับคุณภาพและการทำให้บริสุทธิ์ล่อง proteins. -เป็ด recombinant, PMW, Barbi ตันเซกซ์ตัน, a, แมคโกแวน อี, Stadlmann เจนาฟซี, พอลเอ็มเจแม่ JK-C การพัฒนา rhizosecretion เป็นระบบการผลิตโปรตีนไฮโดรโปนิจากยาสูบที่ปลูก

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

rhizosecretion เป็นเทคโนโลยีที่น่าสนใจสำหรับการผลิตรีคอมบิแนนท์โปรตีนจากพืชดัดแปรพันธุกรรม . อย่างไรก็ตาม ปัจจุบันผลผลิตของพืชซึ่งใช้ยาโดยวิธีนี้ได้รับต่ำเกินไปสำหรับศักยภาพเชิงพาณิชย์ การศึกษาเน้นสามต้นพืชที่ปลูกในบริเวณเส้นกลางวัฒนธรรม ,2 การแสดงโมโนโคลนอลแอนติบอดีคนที่ 13 และ 4e10 และการแสดง polypeptide ไมโครบิไซด์เล็ก cyanovirin-n. rhizosecretion อัตราเพิ่มขึ้นนอกเหนือจากการควบคุมการเจริญเติบโตพืชแอลฟาแนพทาลีน กรดอะซิติก อัตราความ rhizosecretion สูงสุดเท่ากับ 58 μกรัม / กรัมน้ำหนักแห้งของราก / 24 H สำหรับผู้ชาย 13 , 10.43 μกรัม / กรัมน้ำหนักแห้งราก / 24 ชั่วโมง 4e10 ,และ นายμกรัม / กรัมน้ำหนักแห้งของราก / 24 ชั่วโมง cyanovirin-n , สูงสุดตัวเลขเพื่อให้ห่างไกลที่รายงานสำหรับแอนติบอดีเต็มตัวและโปรตีนรีคอมบิแนนท์ตามลำดับ และสารควบคุมการเจริญเติบโตของพืช indole butyric acid 6-benzylaminopurine และ kinetin ยังแสดงการเพิ่ม rhizosecretion ของผู้ชาย 13 ผลของการใช้สารควบคุมการเจริญเติบโตแตกต่าง ,เป็นธาลีน กรดแอลฟา และ indole butyric acid เพิ่มราก น้ำหนักแห้งของพืชที่ปลูก และ thecytokinins benzylaminopurine ลเพิ่มขึ้น และ rhizosecretion โดยไม่มีผลต่อมวลรากการเปรียบเทียบการวิเคราะห์ระหว่าง glycosylation มาบผู้ชาย 13 บริสุทธิ์ จากทั้งสื่อวัฒนธรรม Hydroponic หรือจากสารสกัดจากใบแสดง รูปแบบคล้ายของ glycosylation ประกอบด้วยองค์ประกอบสูง glycoforms ซับซ้อน การวิเคราะห์สื่อวัฒนธรรม Hydroponic ที่เก็บเกี่ยวพบลดลงอย่างมีนัยสำคัญและซับซ้อนน้อยกว่าระดับของโปรตีน เอนไซม์ ในการเปรียบเทียบกับสารสกัดจากใบซึ่งแปลเป็นสัดส่วนที่สูงของเหมือนเดิม ผู้ชาย 13 IgG ในความสัมพันธ์กับสินค้ากลุ่มอื่น ๆ บริเวณกลางสามารถเพิ่มโดยตรงกับทางคอลัมน์โครมาโทกราฟีสำหรับบำบัดน้ำเสีย ที่ช่วยให้ง่ายและรวดเร็วของการผลิตความบริสุทธิ์สูงผู้ชาย 13 แอนติบอดี นอกจากความน่าสนใจของการควบคุม ภายในมีสภาพแวดล้อมด้านเภสัชกรรมการผลิตพืชการศึกษาครั้งนี้แสดงให้เห็นถึงประโยชน์ที่มีต่อคุณภาพและการเกิดของโปรตีนรีคอมบิแนนท์ - เป็ด พี เอ็ม ดับบลิว Barbi ต. เซกซ์ตัน , อ. แมคโกแวน ว่าน , stadlmann เจ นาวาร์ , C . , พอล เอ็ม เจ มา เจ. เค. - C . การพัฒนา rhizosecretion เป็นระบบการบริหารการผลิตโปรตีนรีคอมบิแนนท์จากบริเวณที่ปลูกยาสูบ