- ข้อความ
- ประวัติศาสตร์
The notion that a balanced pool of
The notion that a balanced pool of deoxyribonucleoside triphosphate (dNTP) precursors is required for DNA replication and repair has been studied in vitro Human Molecular Genetics
Oxford University Press
Unbalanced deoxynucleotide pools cause mitochondrial DNA instability in thymidine phosphorylase-deficient mice
Luis C. López, Hasan O. Akman, [...], and Michio Hirano
Additional article information
Abstract
Replication and repair of DNA require equilibrated pools of deoxynucleoside triphosphate precursors. This concept has been proven by in vitro studies over many years, but in vivo models are required to demonstrate its relevance to multicellular organisms and to human diseases. Accordingly, we have generated thymidine phosphorylase (TP) and uridine phosphorylase (UP) double knockout (TP−/−UP−/−) mice, which show severe TP deficiency, increased thymidine and deoxyuridine in tissues and elevated mitochondrial deoxythymidine triphosphate. As consequences of the nucleotide pool imbalances, brains of mutant mice developed partial depletion of mtDNA, deficiencies of respiratory chain complexes and encephalopathy. These findings largely account for the pathogenesis of mitochondrial neurogastrointestinal encephalopathy (MNGIE), the first inherited human disorder of nucleoside metabolism associated with somatic DNA instability.
INTRODUCTION
The notion that a balanced pool of deoxyribonucleoside triphosphate (dNTP) precursors is required for DNA replication and repair has been studied in vitro for more than four decades (1,2), but its relevance to human disease was not documented until 1999, when mutations on the TYMP gene were identified as the cause of mitochondrial neurogastrointestinal encephalopathy (MNGIE). This autosomal-recessive disease is characterized by extraocular muscle weakness manifesting as ptosis and ophthalmoplegia, peripheral neuropathy, gastrointestinal dysmotility causing severe cachexia, leukoencephalopathy and mitochondrial abnormalities (3–5). TYMP mutations cause a severe decrease of thymidine phosphorylase (TP) activity; marked elevations of the pyrimidine nucleosides thymidine (Thd) and deoxyuridine (dUrd) in plasma and tissues and somatic multiple deletions, depletion and site-specific point mutations of mtDNA (3,4,6–12). The point mutations are predominantly T-to-C transitions preceded by 5′-AA sequences, suggesting that elevated deoxythymidine triphosphate (dTTP) induces next-nucleotide effects in this disease (9). On the basis of these findings, we hypothesized that elevations of Thd and dUrd in MNGIE cause nucleotide pool imbalance, which, in turn, causes mtDNA instability (4,7). The relationship between increased Thd levels, unbalanced mitochondrial dNTPs and mtDNA alterations has been demonstrated in vitro. HeLa cells and human fibroblasts exposed to 10–50 µm Thd showed unbalanced mitochondrial dNTPs and mtDNA deletions and depletion, which were more prominent in quiescent cells (13–15).
Although the in vitro results support our hypothesis for the pathogenesis of MNGIE, an in vivo model is necessary to validate this mechanism, understand the tissue specificity and test potential therapies. To address these issues, we have generated TP knockout (TP−/−) mice, which have no observable clinical phenotype, but show modest elevations of Thd and dUrd. Because murine uridine phosphorylase (UP) degrades Thd and dUrd, we obtained UP knockout (UP−/−) mice (16) and have generated TP/UP double knockout (TP−/−UP−/−) mice. Similar TP−/−UP−/− mice generated by Haraguchi et al. (17), that show leukoencephalopathy without depletion or deletions of mtDNA, were not Human Molecular Genetics
Oxford University Press
Unbalanced deoxynucleotide pools cause mitochondrial DNA instability in thymidine phosphorylase-deficient mice
Luis C. López, Hasan O. Akman, [...], and Michio Hirano
Additional article information
Abstract
Replication and repair of DNA require equilibrated pools of deoxynucleoside triphosphate precursors. This concept has been proven by in vitro studies over many years, but in vivo models are required to demonstrate its relevance to multicellular organisms and to human diseases. Accordingly, we have generated thymidine phosphorylase (TP) and uridine phosphorylase (UP) double knockout (TP−/−UP−/−) mice, which show severe TP deficiency, increased thymidine and deoxyuridine in tissues and elevated mitochondrial deoxythymidine triphosphate. As consequences of the nucleotide pool imbalances, brains of mutant mice developed partial depletion of mtDNA, deficiencies of respiratory chain complexes and encephalopathy. These findings largely account for the pathogenesis of mitochondrial neurogastrointestinal encephalopathy (MNGIE), the first inherited human disorder of nucleoside metabolism associated with somatic DNA instability.
INTRODUCTION
The notion that a balanced pool of deoxyribonucleoside triphosphate (dNTP) precursors is required for DNA replication and repair has been studied in vitro for more than four decades (1,2), but its relevance to human disease was not documented until 1999, when mutations on the TYMP gene were identified as the cause of mitochondrial neurogastrointestinal encephalopathy (MNGIE). This autosomal-recessive disease is characterized by extraocular muscle weakness manifesting as ptosis and ophthalmoplegia, peripheral neuropathy, gastrointestinal dysmotility causing severe cachexia, leukoencephalopathy and mitochondrial abnormalities (3–5). TYMP mutations cause a severe decrease of thymidine phosphorylase (TP) activity; marked elevations of the pyrimidine nucleosides thymidine (Thd) and deoxyuridine (dUrd) in plasma and tissues and somatic multiple deletions, depletion and site-specific point mutations of mtDNA (3,4,6–12). The point mutations are predominantly T-to-C transitions preceded by 5′-AA sequences, suggesting that elevated deoxythymidine triphosphate (dTTP) induces next-nucleotide effects in this disease (9). On the basis of these findings, we hypothesized that elevations of Thd and dUrd in MNGIE cause nucleotide pool imbalance, which, in turn, causes mtDNA instability (4,7). The relationship between increased Thd levels, unbalanced mitochondrial dNTPs and mtDNA alterations has been demonstrated in vitro. HeLa cells and human fibroblasts exposed to 10–50 µm Thd showed unbalanced mitochondrial dNTPs and mtDNA deletions and depletion, which were more prominent in quiescent cells (13–15).
Although the in vitro results support our hypothesis for the pathogenesis of MNGIE, an in vivo model is necessary to validate this mechanism, understand the tissue specificity and test potential therapies. To address these issues, we have generated TP knockout (TP−/−) mice, which have no observable clinical phenotype, but show modest elevations of Thd and dUrd. Because murine uridine phosphorylase (UP) degrades Thd and dUrd, we obtained UP knockout (UP−/−) mice (16) and have generated TP/UP double knockout (TP−/−UP−/−) mice. Similar TP−/−UP−/− mice generated by Haraguchi et al. (17), that show leukoencephalopathy without depletion or deletions of mtDNA, were not available. In the present work, we characterize the biochemical, genetic and histological traits of our TP−/−UP−/− mice, which reproduce features of MNGIE
Oxford University Press
Unbalanced deoxynucleotide pools cause mitochondrial DNA instability in thymidine phosphorylase-deficient mice
Luis C. López, Hasan O. Akman, [...], and Michio Hirano
Additional article information
Abstract
Replication and repair of DNA require equilibrated pools of deoxynucleoside triphosphate precursors. This concept has been proven by in vitro studies over many years, but in vivo models are required to demonstrate its relevance to multicellular organisms and to human diseases. Accordingly, we have generated thymidine phosphorylase (TP) and uridine phosphorylase (UP) double knockout (TP−/−UP−/−) mice, which show severe TP deficiency, increased thymidine and deoxyuridine in tissues and elevated mitochondrial deoxythymidine triphosphate. As consequences of the nucleotide pool imbalances, brains of mutant mice developed partial depletion of mtDNA, deficiencies of respiratory chain complexes and encephalopathy. These findings largely account for the pathogenesis of mitochondrial neurogastrointestinal encephalopathy (MNGIE), the first inherited human disorder of nucleoside metabolism associated with somatic DNA instability.
INTRODUCTION
The notion that a balanced pool of deoxyribonucleoside triphosphate (dNTP) precursors is required for DNA replication and repair has been studied in vitro for more than four decades (1,2), but its relevance to human disease was not documented until 1999, when mutations on the TYMP gene were identified as the cause of mitochondrial neurogastrointestinal encephalopathy (MNGIE). This autosomal-recessive disease is characterized by extraocular muscle weakness manifesting as ptosis and ophthalmoplegia, peripheral neuropathy, gastrointestinal dysmotility causing severe cachexia, leukoencephalopathy and mitochondrial abnormalities (3–5). TYMP mutations cause a severe decrease of thymidine phosphorylase (TP) activity; marked elevations of the pyrimidine nucleosides thymidine (Thd) and deoxyuridine (dUrd) in plasma and tissues and somatic multiple deletions, depletion and site-specific point mutations of mtDNA (3,4,6–12). The point mutations are predominantly T-to-C transitions preceded by 5′-AA sequences, suggesting that elevated deoxythymidine triphosphate (dTTP) induces next-nucleotide effects in this disease (9). On the basis of these findings, we hypothesized that elevations of Thd and dUrd in MNGIE cause nucleotide pool imbalance, which, in turn, causes mtDNA instability (4,7). The relationship between increased Thd levels, unbalanced mitochondrial dNTPs and mtDNA alterations has been demonstrated in vitro. HeLa cells and human fibroblasts exposed to 10–50 µm Thd showed unbalanced mitochondrial dNTPs and mtDNA deletions and depletion, which were more prominent in quiescent cells (13–15).
Although the in vitro results support our hypothesis for the pathogenesis of MNGIE, an in vivo model is necessary to validate this mechanism, understand the tissue specificity and test potential therapies. To address these issues, we have generated TP knockout (TP−/−) mice, which have no observable clinical phenotype, but show modest elevations of Thd and dUrd. Because murine uridine phosphorylase (UP) degrades Thd and dUrd, we obtained UP knockout (UP−/−) mice (16) and have generated TP/UP double knockout (TP−/−UP−/−) mice. Similar TP−/−UP−/− mice generated by Haraguchi et al. (17), that show leukoencephalopathy without depletion or deletions of mtDNA, were not Human Molecular Genetics
Oxford University Press
Unbalanced deoxynucleotide pools cause mitochondrial DNA instability in thymidine phosphorylase-deficient mice
Luis C. López, Hasan O. Akman, [...], and Michio Hirano
Additional article information
Abstract
Replication and repair of DNA require equilibrated pools of deoxynucleoside triphosphate precursors. This concept has been proven by in vitro studies over many years, but in vivo models are required to demonstrate its relevance to multicellular organisms and to human diseases. Accordingly, we have generated thymidine phosphorylase (TP) and uridine phosphorylase (UP) double knockout (TP−/−UP−/−) mice, which show severe TP deficiency, increased thymidine and deoxyuridine in tissues and elevated mitochondrial deoxythymidine triphosphate. As consequences of the nucleotide pool imbalances, brains of mutant mice developed partial depletion of mtDNA, deficiencies of respiratory chain complexes and encephalopathy. These findings largely account for the pathogenesis of mitochondrial neurogastrointestinal encephalopathy (MNGIE), the first inherited human disorder of nucleoside metabolism associated with somatic DNA instability.
INTRODUCTION
The notion that a balanced pool of deoxyribonucleoside triphosphate (dNTP) precursors is required for DNA replication and repair has been studied in vitro for more than four decades (1,2), but its relevance to human disease was not documented until 1999, when mutations on the TYMP gene were identified as the cause of mitochondrial neurogastrointestinal encephalopathy (MNGIE). This autosomal-recessive disease is characterized by extraocular muscle weakness manifesting as ptosis and ophthalmoplegia, peripheral neuropathy, gastrointestinal dysmotility causing severe cachexia, leukoencephalopathy and mitochondrial abnormalities (3–5). TYMP mutations cause a severe decrease of thymidine phosphorylase (TP) activity; marked elevations of the pyrimidine nucleosides thymidine (Thd) and deoxyuridine (dUrd) in plasma and tissues and somatic multiple deletions, depletion and site-specific point mutations of mtDNA (3,4,6–12). The point mutations are predominantly T-to-C transitions preceded by 5′-AA sequences, suggesting that elevated deoxythymidine triphosphate (dTTP) induces next-nucleotide effects in this disease (9). On the basis of these findings, we hypothesized that elevations of Thd and dUrd in MNGIE cause nucleotide pool imbalance, which, in turn, causes mtDNA instability (4,7). The relationship between increased Thd levels, unbalanced mitochondrial dNTPs and mtDNA alterations has been demonstrated in vitro. HeLa cells and human fibroblasts exposed to 10–50 µm Thd showed unbalanced mitochondrial dNTPs and mtDNA deletions and depletion, which were more prominent in quiescent cells (13–15).
Although the in vitro results support our hypothesis for the pathogenesis of MNGIE, an in vivo model is necessary to validate this mechanism, understand the tissue specificity and test potential therapies. To address these issues, we have generated TP knockout (TP−/−) mice, which have no observable clinical phenotype, but show modest elevations of Thd and dUrd. Because murine uridine phosphorylase (UP) degrades Thd and dUrd, we obtained UP knockout (UP−/−) mice (16) and have generated TP/UP double knockout (TP−/−UP−/−) mice. Similar TP−/−UP−/− mice generated by Haraguchi et al. (17), that show leukoencephalopathy without depletion or deletions of mtDNA, were not available. In the present work, we characterize the biochemical, genetic and histological traits of our TP−/−UP−/− mice, which reproduce features of MNGIE
0/5000
แนวคิดว่า deoxyribonucleoside โนซีนไตรฟอสเฟต (dNTP) precursors พูสมดุลจำเป็นสำหรับการจำลองดีเอ็นเอ และซ่อมแซมได้ศึกษาการเพาะเลี้ยงมนุษย์อณูพันธุศาสตร์ข่าวมหาวิทยาลัยออกซฟอร์ดDeoxynucleotide แจกสระทำ mitochondrial DNA ความไม่เสถียรของหนูไม่ phosphorylase thymidineLuis C. López โอฮะ Akman [...], และ Michio โน่รายละเอียดเพิ่มเติมบทคัดย่อจำลองแบบและการซ่อมแซมดีเอ็นเอต้องสระ equilibrated ของ deoxynucleoside precursors โนซีนไตรฟอสเฟต แนวคิดนี้ได้รับการพิสูจน์ โดยการศึกษาในปี แต่แบบจำลองในสัตว์ทดลองจะต้องแสดงให้เห็นถึงความเกี่ยวข้องของสิ่งชีวิต และโรคในมนุษย์ ดังนั้น เราได้สร้าง thymidine phosphorylase (TP) และ phosphorylase uridine (ค่า) คู่น่าพิศวง (TP−/−UP−/−) หนู ซึ่งแสดงขาด TP รุนแรง thymidine เพิ่ม และ deoxyuridine ในเนื้อเยื่อและ deoxythymidine สูง mitochondrial โนซีนไตรฟอสเฟต เป็นผลของความไม่สมดุลของพูนิวคลีโอไทด์ สมองของหนูกลายพันธุ์พัฒนาจนหมดบางส่วนของ mtDNA ทรงคอมเพล็กซ์โซ่หายใจและ encephalopathy ผลการวิจัยเหล่านี้ส่วนใหญ่บัญชีสำหรับพยาธิกำเนิดของ mitochondrial neurogastrointestinal encephalopathy (MNGIE), โรคสืบทอดมนุษย์ตัวแรกของ nucleoside เกี่ยวข้องกับความไม่มีเสถียรภาพ DNA somaticแนะนำความว่า precursors โนซีนไตรฟอสเฟต (dNTP) deoxyribonucleoside พูสมดุลจำเป็นสำหรับการจำลองดีเอ็นเอ และซ่อมแซมได้ถูกศึกษาในกว่าสี่ทศวรรษที่ผ่านมา (1, 2), แต่ความเกี่ยวข้องกับโรคมนุษย์ไม่ถูกบันทึกจนถึงปี 1999 เมื่อกลายพันธุ์ในยีน TYMP ได้ระบุสาเหตุของ mitochondrial neurogastrointestinal encephalopathy (MNGIE) Autosomal recessive โรคนี้มีลักษณะ โดย extraocular กล้ามเนื้ออ่อนแอ manifesting เป็น ptosis และ ophthalmoplegia, neuropathy พ่วง ระบบ dysmotility เกิด cachexia รุนแรง leukoencephalopathy และความผิดปกติของ mitochondrial (3-5) ลดลงอย่างรุนแรงของ thymidine phosphorylase (TP) กิจกรรม ทำให้เกิดการกลายพันธุ์ TYMP ทำเครื่องหมาย elevations thymidine nucleosides pyrimidine (คิด) และ deoxyuridine (dUrd) ในพลาสมา และเนื้อเยื่อหลาย somatic ลบ จนหมด และกลายพันธุ์จุดเฉพาะของ mtDNA (3,4,6 – 12) กลายพันธุ์จุดส่วนใหญ่จะเปลี่ยน T C นำหน้าตามลำดับ 5′ AA แนะนำที่ deoxythymidine ยกโนซีนไตรฟอสเฟต (dTTP) ก่อให้เกิดผลต่อไปนิวคลีโอไทด์ในโรคนี้ (9) โดยการค้นพบเหล่านี้ เราตั้งสมมติฐานว่าที่ elevations คิดและ dUrd ใน MNGIE ทำให้เกิดนิวคลีโอไทด์สระไม่สมดุล ซึ่ง จะ ทำให้เกิดความไม่เสถียรของ mtDNA (4,7) ความสัมพันธ์ ระหว่างระดับที่คิดเพิ่มขึ้น จำนวน mitochondrial dNTPs mtDNA เปลี่ยนแปลงมีการสาธิตการเพาะเลี้ยง เซลล์ HeLa และ fibroblasts มนุษย์สัมผัสกับ 10 – 50 µm คิดพบ dNTPs แจก mitochondrial และ mtDNA ลบ และลดลง ของ ซึ่งโดดเด่นมากในเซลล์ที่ไม่มีการทำ (13-15)แม้ว่าผลลัพธ์ในการสนับสนุนสมมติฐานของเราสำหรับพยาธิกำเนิดของ MNGIE แบบจำลองในสัตว์ทดลองจำเป็นต้องตรวจสอบกลไกนี้ เข้าใจ specificity เนื้อเยื่อ และทดสอบอาจรักษา การแก้ไขปัญหาเหล่านี้ เราได้สร้าง TP น่าพิศวง (TP− −) หนู ซึ่งมี phenotype คลินิก observable ไม่ แต่แสดง elevations เจียมเนื้อเจียมตัวคิดและ dUrd เพราะ phosphorylase murine uridine (ค่า) เสื่อมคิดและ dUrd เรารับค่าหนูน่าพิศวง (UP− −) (16) และมีสร้างหนูน่าพิศวง TP/สาย คู่ (TP−/−UP−/−) หนู TP−/−UP−/− คล้ายที่สร้างโดย Haraguchi et al. (17), ที่ leukoencephalopathy โดยไม่มีการลดลงของหรือลบของ mtDNA ไม่อณูพันธุศาสตร์ มนุษย์ข่าวมหาวิทยาลัยออกซฟอร์ดDeoxynucleotide แจกสระทำ mitochondrial DNA ความไม่เสถียรของหนูไม่ phosphorylase thymidineLuis C. López โอฮะ Akman [...], และ Michio โน่รายละเอียดเพิ่มเติมบทคัดย่อจำลองแบบและการซ่อมแซมดีเอ็นเอต้องสระ equilibrated ของ deoxynucleoside precursors โนซีนไตรฟอสเฟต แนวคิดนี้ได้รับการพิสูจน์ โดยการศึกษาในปี แต่แบบจำลองในสัตว์ทดลองจะต้องแสดงให้เห็นถึงความเกี่ยวข้องของสิ่งชีวิต และโรคในมนุษย์ ดังนั้น เราได้สร้าง thymidine phosphorylase (TP) และ phosphorylase uridine (ค่า) คู่น่าพิศวง (TP−/−UP−/−) หนู ซึ่งแสดงขาด TP รุนแรง thymidine เพิ่ม และ deoxyuridine ในเนื้อเยื่อและ deoxythymidine สูง mitochondrial โนซีนไตรฟอสเฟต เป็นผลของความไม่สมดุลของพูนิวคลีโอไทด์ สมองของหนูกลายพันธุ์พัฒนาจนหมดบางส่วนของ mtDNA ทรงคอมเพล็กซ์โซ่หายใจและ encephalopathy ผลการวิจัยเหล่านี้ส่วนใหญ่บัญชีสำหรับพยาธิกำเนิดของ mitochondrial neurogastrointestinal encephalopathy (MNGIE), โรคสืบทอดมนุษย์ตัวแรกของ nucleoside เกี่ยวข้องกับความไม่มีเสถียรภาพ DNA somaticแนะนำความว่า precursors โนซีนไตรฟอสเฟต (dNTP) deoxyribonucleoside พูสมดุลจำเป็นสำหรับการจำลองดีเอ็นเอ และซ่อมแซมได้ถูกศึกษาในกว่าสี่ทศวรรษที่ผ่านมา (1, 2), แต่ความเกี่ยวข้องกับโรคมนุษย์ไม่ถูกบันทึกจนถึงปี 1999 เมื่อกลายพันธุ์ในยีน TYMP ได้ระบุสาเหตุของ mitochondrial neurogastrointestinal encephalopathy (MNGIE) Autosomal recessive โรคนี้มีลักษณะ โดย extraocular กล้ามเนื้ออ่อนแอ manifesting เป็น ptosis และ ophthalmoplegia, neuropathy พ่วง ระบบ dysmotility เกิด cachexia รุนแรง leukoencephalopathy และความผิดปกติของ mitochondrial (3-5) ลดลงอย่างรุนแรงของ thymidine phosphorylase (TP) กิจกรรม ทำให้เกิดการกลายพันธุ์ TYMP ทำเครื่องหมาย elevations thymidine nucleosides pyrimidine (คิด) และ deoxyuridine (dUrd) ในพลาสมา และเนื้อเยื่อหลาย somatic ลบ จนหมด และกลายพันธุ์จุดเฉพาะของ mtDNA (3,4,6 – 12) กลายพันธุ์จุดส่วนใหญ่จะเปลี่ยน T C นำหน้าตามลำดับ 5′ AA แนะนำที่ deoxythymidine ยกโนซีนไตรฟอสเฟต (dTTP) ก่อให้เกิดผลต่อไปนิวคลีโอไทด์ในโรคนี้ (9) โดยการค้นพบเหล่านี้ เราตั้งสมมติฐานว่าที่ elevations คิดและ dUrd ใน MNGIE ทำให้เกิดนิวคลีโอไทด์สระไม่สมดุล ซึ่ง จะ ทำให้เกิดความไม่เสถียรของ mtDNA (4,7) ความสัมพันธ์ ระหว่างระดับที่คิดเพิ่มขึ้น จำนวน mitochondrial dNTPs mtDNA เปลี่ยนแปลงมีการสาธิตการเพาะเลี้ยง เซลล์ HeLa และ fibroblasts มนุษย์สัมผัสกับ 10 – 50 µm คิดพบ dNTPs แจก mitochondrial และ mtDNA ลบ และลดลง ของ ซึ่งโดดเด่นมากในเซลล์ที่ไม่มีการทำ (13-15)แม้ว่าผลลัพธ์ในการสนับสนุนสมมติฐานของเราสำหรับพยาธิกำเนิดของ MNGIE แบบจำลองในสัตว์ทดลองจำเป็นต้องตรวจสอบกลไกนี้ เข้าใจ specificity เนื้อเยื่อ และทดสอบอาจรักษา การแก้ไขปัญหาเหล่านี้ เราได้สร้าง TP น่าพิศวง (TP− −) หนู ซึ่งมี phenotype คลินิก observable ไม่ แต่แสดง elevations เจียมเนื้อเจียมตัวคิดและ dUrd เพราะ phosphorylase murine uridine (ค่า) เสื่อมคิดและ dUrd เรารับค่าหนูน่าพิศวง (UP− −) (16) และมีสร้างหนูน่าพิศวง TP/สาย คู่ (TP−/−UP−/−) หนู TP−/−UP−/− คล้ายที่สร้างโดย Haraguchi et al. (17), ที่ leukoencephalopathy โดยไม่มีการลดลงของหรือลบของ mtDNA ไม่ว่าง ในการทำงานปัจจุบัน เรากำหนดลักษณะลักษณะชีวเคมี พันธุกรรม และสรีรวิทยาของหนูของเรา TP−/−UP−/− ซึ่งสร้างลักษณะการทำงานของ MNGIE
การแปล กรุณารอสักครู่..
ความคิดที่ว่าสระว่ายน้ำที่สมดุลของ deoxyribonucleoside triphosphate (dNTP) สารตั้งต้นเป็นสิ่งจำเป็นสำหรับการจำลองแบบและการซ่อมแซมดีเอ็นเอได้รับการศึกษาในหลอดทดลองมนุษย์อณูพันธุศาสตร์
Oxford University Press
สระว่ายน้ำไม่สมดุลทำให้เกิดความไม่แน่นอน deoxynucleotide ยลดีเอ็นเอใน thymidine หนู phosphorylase
ขาดหลุยส์ซีโลเปซ, ฮะซัน ทุม Akman [... ] และ Michio Hirano ข้อมูลเพิ่มเติมบทความบทคัดย่อการจำลองแบบและการซ่อมแซมดีเอ็นเอต้องequilibrated สระว่ายน้ำของสารตั้งต้น deoxynucleoside triphosphate แนวคิดนี้ได้รับการพิสูจน์โดยการศึกษาในหลอดทดลองเป็นเวลาหลายปี แต่ในรูปแบบที่ร่างกายจะต้องแสดงให้เห็นถึงความเกี่ยวข้องกับสิ่งมีชีวิตและโรคของมนุษย์ ดังนั้นเราจึงมีการสร้าง phosphorylase thymidine (TP) และ uridine phosphorylase (UP) คู่ที่น่าพิศวง (TP - / - UP - / -) หนูซึ่งแสดงให้เห็นการขาด TP รุนแรงที่เพิ่มขึ้นและ thymidine deoxyuridine ในเนื้อเยื่อและ triphosphate deoxythymidine สูงยล ในฐานะที่เป็นผลกระทบจากความไม่สมดุลของสระว่ายน้ำเบสสมองของหนูกลายพันธุ์พัฒนาการสูญเสียบางส่วนของ mtDNA ขาดคอมเพล็กซ์ห่วงโซ่ทางเดินหายใจและ encephalopathy การค้นพบนี้บัญชีส่วนใหญ่เกิดโรค encephalopathy neurogastrointestinal ยล (MNGIE) เป็นครั้งแรกที่ได้รับการถ่ายทอดความผิดปกติของมนุษย์ในการเผาผลาญอาหาร nucleoside ที่เกี่ยวข้องกับความไม่แน่นอนดีเอ็นเอร่างกาย. บทนำความคิดที่ว่าสระว่ายน้ำที่สมดุลของ deoxyribonucleoside triphosphate (dNTP) สารตั้งต้นเป็นสิ่งจำเป็นสำหรับการคัดลอกดีเอ็นเอและการซ่อมแซม ได้รับการศึกษาในหลอดทดลองมานานกว่าสี่สิบปี (1,2) แต่ความเกี่ยวข้องกับโรคของมนุษย์ไม่ได้ถูกบันทึกไว้จนกว่าจะถึงปี 1999 เมื่อเกิดการกลายพันธุ์ในยีน TYMP ถูกระบุว่าเป็นสาเหตุของการ encephalopathy neurogastrointestinal ยล (MNGIE) โรค autosomal-ด้อยที่โดดเด่นด้วยกล้ามเนื้ออ่อนแอ extraocular เผยเป็น ptosis และ ophthalmoplegia, ปลายประสาทอักเสบ, ระบบทางเดินอาหารที่ก่อให้เกิด dysmotility cachexia รุนแรงและความผิดปกติ leukoencephalopathy ยล (3-5) การกลายพันธุ์ที่ทำให้เกิด TYMP ลดลงอย่างรุนแรงของ thymidine phosphorylase (TP) กิจกรรม; เอนไซม์ทำเครื่องหมายของ pyrimidine nucleosides thymidine (Thd) และ deoxyuridine (dUrd) ในพลาสมาและเนื้อเยื่อและการลบหลายร่างกาย, การสูญเสียและการกลายพันธุ์จุดเว็บไซต์ที่เฉพาะเจาะจงของ mtDNA (3,4,6-12) การกลายพันธุ์จุดส่วนใหญ่เป็นเสื้อที่จะ-C นำหน้าด้วยการเปลี่ยนลำดับ 5'-AA บอกว่า triphosphate deoxythymidine สูง (dTTP) ก่อให้เกิดผลกระทบต่อไปเบื่อหน่ายในโรคนี้ (9) บนพื้นฐานของการค้นพบเหล่านี้เราตั้งสมมติฐานว่าเอนไซม์ไล Thd และ dUrd ในการทำให้เกิดความไม่สมดุลของสระว่ายน้ำ MNGIE เบื่อหน่ายซึ่งในที่สุดก็ทำให้เกิดความไม่แน่นอน mtDNA (4,7) ความสัมพันธ์ระหว่างระดับ Thd เพิ่มขึ้น dNTPs ยลไม่สมดุลและการเปลี่ยนแปลง mtDNA ที่ได้รับการแสดงให้เห็นในหลอดทดลอง เซลล์ HeLa และเซลล์ของมนุษย์สัมผัสกับ 10-50 ไมโครเมตร Thd แสดงให้เห็น dNTPs ยลไม่สมดุลและการลบ mtDNA และการสูญเสียซึ่งเป็นที่โดดเด่นมากในเซลล์นิ่ง (13-15). แม้ว่าผลในหลอดทดลองสนับสนุนสมมติฐานของเราสำหรับการเกิดโรคของ MNGIE เป็น ในรูปแบบที่ร่างกายมีความจำเป็นต้องตรวจสอบกลไกนี้เข้าใจความจำเพาะเนื้อเยื่อและทดสอบการรักษาที่มีศักยภาพ เพื่อแก้ไขปัญหาเหล่านี้เราได้สร้างสิ่งที่น่าพิศวง TP (TP - / -) หนูที่ไม่มีฟีโนไทป์ทางคลินิกที่สังเกตได้ แต่แสดงระดับเจียมเนื้อเจียมตัวและ Thd dUrd เพราะ phosphorylase uridine หมา (UP) ลด Thd และ dUrd เราได้รับสิ่งที่น่าพิศวงขึ้น (UP - / -) หนู (16) และมีการสร้าง TP / UP คู่ที่น่าพิศวง (TP - / - UP - / -) หนู ที่คล้ายกัน TP - / - UP - / - หนูที่สร้างขึ้นโดย Haraguchi et al, (17) ที่แสดง leukoencephalopathy โดยไม่ต้องสูญเสียหรือการลบ mtDNA เป็นมนุษย์ไม่ได้อณูพันธุศาสตร์Oxford University Press สระว่ายน้ำไม่สมดุลทำให้เกิดความไม่แน่นอน deoxynucleotide ยลดีเอ็นเอใน thymidine หนู phosphorylase ขาดหลุยส์ซีโลเปซ, ฮะซันทุม Akman [... ] และ Michio Hirano ข้อมูลเพิ่มเติมบทความบทคัดย่อการจำลองแบบและการซ่อมแซมดีเอ็นเอต้องequilibrated สระว่ายน้ำของสารตั้งต้น deoxynucleoside triphosphate แนวคิดนี้ได้รับการพิสูจน์โดยการศึกษาในหลอดทดลองเป็นเวลาหลายปี แต่ในรูปแบบที่ร่างกายจะต้องแสดงให้เห็นถึงความเกี่ยวข้องกับสิ่งมีชีวิตและโรคของมนุษย์ ดังนั้นเราจึงมีการสร้าง phosphorylase thymidine (TP) และ uridine phosphorylase (UP) คู่ที่น่าพิศวง (TP - / - UP - / -) หนูซึ่งแสดงให้เห็นการขาด TP รุนแรงที่เพิ่มขึ้นและ thymidine deoxyuridine ในเนื้อเยื่อและ triphosphate deoxythymidine สูงยล ในฐานะที่เป็นผลกระทบจากความไม่สมดุลของสระว่ายน้ำเบสสมองของหนูกลายพันธุ์พัฒนาการสูญเสียบางส่วนของ mtDNA ขาดคอมเพล็กซ์ห่วงโซ่ทางเดินหายใจและ encephalopathy การค้นพบนี้บัญชีส่วนใหญ่เกิดโรค encephalopathy neurogastrointestinal ยล (MNGIE) เป็นครั้งแรกที่ได้รับการถ่ายทอดความผิดปกติของมนุษย์ในการเผาผลาญอาหาร nucleoside ที่เกี่ยวข้องกับความไม่แน่นอนดีเอ็นเอร่างกาย. บทนำความคิดที่ว่าสระว่ายน้ำที่สมดุลของ deoxyribonucleoside triphosphate (dNTP) สารตั้งต้นเป็นสิ่งจำเป็นสำหรับการคัดลอกดีเอ็นเอและการซ่อมแซม ได้รับการศึกษาในหลอดทดลองมานานกว่าสี่สิบปี (1,2) แต่ความเกี่ยวข้องกับโรคของมนุษย์ไม่ได้ถูกบันทึกไว้จนกว่าจะถึงปี 1999 เมื่อเกิดการกลายพันธุ์ในยีน TYMP ถูกระบุว่าเป็นสาเหตุของการ encephalopathy neurogastrointestinal ยล (MNGIE) โรค autosomal-ด้อยที่โดดเด่นด้วยกล้ามเนื้ออ่อนแอ extraocular เผยเป็น ptosis และ ophthalmoplegia, ปลายประสาทอักเสบ, ระบบทางเดินอาหารที่ก่อให้เกิด dysmotility cachexia รุนแรงและความผิดปกติ leukoencephalopathy ยล (3-5) การกลายพันธุ์ที่ทำให้เกิด TYMP ลดลงอย่างรุนแรงของ thymidine phosphorylase (TP) กิจกรรม; เอนไซม์ทำเครื่องหมายของ pyrimidine nucleosides thymidine (Thd) และ deoxyuridine (dUrd) ในพลาสมาและเนื้อเยื่อและการลบหลายร่างกาย, การสูญเสียและการกลายพันธุ์จุดเว็บไซต์ที่เฉพาะเจาะจงของ mtDNA (3,4,6-12) การกลายพันธุ์จุดส่วนใหญ่เป็นเสื้อที่จะ-C นำหน้าด้วยการเปลี่ยนลำดับ 5'-AA บอกว่า triphosphate deoxythymidine สูง (dTTP) ก่อให้เกิดผลกระทบต่อไปเบื่อหน่ายในโรคนี้ (9) บนพื้นฐานของการค้นพบเหล่านี้เราตั้งสมมติฐานว่าเอนไซม์ไล Thd และ dUrd ในการทำให้เกิดความไม่สมดุลของสระว่ายน้ำ MNGIE เบื่อหน่ายซึ่งในที่สุดก็ทำให้เกิดความไม่แน่นอน mtDNA (4,7) ความสัมพันธ์ระหว่างระดับ Thd เพิ่มขึ้น dNTPs ยลไม่สมดุลและการเปลี่ยนแปลง mtDNA ที่ได้รับการแสดงให้เห็นในหลอดทดลอง เซลล์ HeLa และเซลล์ของมนุษย์สัมผัสกับ 10-50 ไมโครเมตร Thd แสดงให้เห็น dNTPs ยลไม่สมดุลและการลบ mtDNA และการสูญเสียซึ่งเป็นที่โดดเด่นมากในเซลล์นิ่ง (13-15). แม้ว่าผลในหลอดทดลองสนับสนุนสมมติฐานของเราสำหรับการเกิดโรคของ MNGIE เป็น ในรูปแบบที่ร่างกายมีความจำเป็นต้องตรวจสอบกลไกนี้เข้าใจความจำเพาะเนื้อเยื่อและทดสอบการรักษาที่มีศักยภาพ เพื่อแก้ไขปัญหาเหล่านี้เราได้สร้างสิ่งที่น่าพิศวง TP (TP - / -) หนูที่ไม่มีฟีโนไทป์ทางคลินิกที่สังเกตได้ แต่แสดงระดับเจียมเนื้อเจียมตัวและ Thd dUrd เพราะ phosphorylase uridine หมา (UP) ลด Thd และ dUrd เราได้รับสิ่งที่น่าพิศวงขึ้น (UP - / -) หนู (16) และมีการสร้าง TP / UP คู่ที่น่าพิศวง (TP - / - UP - / -) หนู ที่คล้ายกัน TP - / - UP - / - หนูที่สร้างขึ้นโดย Haraguchi et al, (17) ว่า leukoencephalopathy แสดงโดยไม่มีการสูญเสียหรือการลบ mtDNA, ไม่สามารถใช้ได้ ในการทำงานปัจจุบันเราลักษณะทางชีวเคมีลักษณะทางพันธุกรรมและเนื้อเยื่อของ TP ของเรา - / - UP - / - หนูซึ่งทำซ้ำคุณสมบัติของ MNGIE
Oxford University Press
สระว่ายน้ำไม่สมดุลทำให้เกิดความไม่แน่นอน deoxynucleotide ยลดีเอ็นเอใน thymidine หนู phosphorylase
ขาดหลุยส์ซีโลเปซ, ฮะซัน ทุม Akman [... ] และ Michio Hirano ข้อมูลเพิ่มเติมบทความบทคัดย่อการจำลองแบบและการซ่อมแซมดีเอ็นเอต้องequilibrated สระว่ายน้ำของสารตั้งต้น deoxynucleoside triphosphate แนวคิดนี้ได้รับการพิสูจน์โดยการศึกษาในหลอดทดลองเป็นเวลาหลายปี แต่ในรูปแบบที่ร่างกายจะต้องแสดงให้เห็นถึงความเกี่ยวข้องกับสิ่งมีชีวิตและโรคของมนุษย์ ดังนั้นเราจึงมีการสร้าง phosphorylase thymidine (TP) และ uridine phosphorylase (UP) คู่ที่น่าพิศวง (TP - / - UP - / -) หนูซึ่งแสดงให้เห็นการขาด TP รุนแรงที่เพิ่มขึ้นและ thymidine deoxyuridine ในเนื้อเยื่อและ triphosphate deoxythymidine สูงยล ในฐานะที่เป็นผลกระทบจากความไม่สมดุลของสระว่ายน้ำเบสสมองของหนูกลายพันธุ์พัฒนาการสูญเสียบางส่วนของ mtDNA ขาดคอมเพล็กซ์ห่วงโซ่ทางเดินหายใจและ encephalopathy การค้นพบนี้บัญชีส่วนใหญ่เกิดโรค encephalopathy neurogastrointestinal ยล (MNGIE) เป็นครั้งแรกที่ได้รับการถ่ายทอดความผิดปกติของมนุษย์ในการเผาผลาญอาหาร nucleoside ที่เกี่ยวข้องกับความไม่แน่นอนดีเอ็นเอร่างกาย. บทนำความคิดที่ว่าสระว่ายน้ำที่สมดุลของ deoxyribonucleoside triphosphate (dNTP) สารตั้งต้นเป็นสิ่งจำเป็นสำหรับการคัดลอกดีเอ็นเอและการซ่อมแซม ได้รับการศึกษาในหลอดทดลองมานานกว่าสี่สิบปี (1,2) แต่ความเกี่ยวข้องกับโรคของมนุษย์ไม่ได้ถูกบันทึกไว้จนกว่าจะถึงปี 1999 เมื่อเกิดการกลายพันธุ์ในยีน TYMP ถูกระบุว่าเป็นสาเหตุของการ encephalopathy neurogastrointestinal ยล (MNGIE) โรค autosomal-ด้อยที่โดดเด่นด้วยกล้ามเนื้ออ่อนแอ extraocular เผยเป็น ptosis และ ophthalmoplegia, ปลายประสาทอักเสบ, ระบบทางเดินอาหารที่ก่อให้เกิด dysmotility cachexia รุนแรงและความผิดปกติ leukoencephalopathy ยล (3-5) การกลายพันธุ์ที่ทำให้เกิด TYMP ลดลงอย่างรุนแรงของ thymidine phosphorylase (TP) กิจกรรม; เอนไซม์ทำเครื่องหมายของ pyrimidine nucleosides thymidine (Thd) และ deoxyuridine (dUrd) ในพลาสมาและเนื้อเยื่อและการลบหลายร่างกาย, การสูญเสียและการกลายพันธุ์จุดเว็บไซต์ที่เฉพาะเจาะจงของ mtDNA (3,4,6-12) การกลายพันธุ์จุดส่วนใหญ่เป็นเสื้อที่จะ-C นำหน้าด้วยการเปลี่ยนลำดับ 5'-AA บอกว่า triphosphate deoxythymidine สูง (dTTP) ก่อให้เกิดผลกระทบต่อไปเบื่อหน่ายในโรคนี้ (9) บนพื้นฐานของการค้นพบเหล่านี้เราตั้งสมมติฐานว่าเอนไซม์ไล Thd และ dUrd ในการทำให้เกิดความไม่สมดุลของสระว่ายน้ำ MNGIE เบื่อหน่ายซึ่งในที่สุดก็ทำให้เกิดความไม่แน่นอน mtDNA (4,7) ความสัมพันธ์ระหว่างระดับ Thd เพิ่มขึ้น dNTPs ยลไม่สมดุลและการเปลี่ยนแปลง mtDNA ที่ได้รับการแสดงให้เห็นในหลอดทดลอง เซลล์ HeLa และเซลล์ของมนุษย์สัมผัสกับ 10-50 ไมโครเมตร Thd แสดงให้เห็น dNTPs ยลไม่สมดุลและการลบ mtDNA และการสูญเสียซึ่งเป็นที่โดดเด่นมากในเซลล์นิ่ง (13-15). แม้ว่าผลในหลอดทดลองสนับสนุนสมมติฐานของเราสำหรับการเกิดโรคของ MNGIE เป็น ในรูปแบบที่ร่างกายมีความจำเป็นต้องตรวจสอบกลไกนี้เข้าใจความจำเพาะเนื้อเยื่อและทดสอบการรักษาที่มีศักยภาพ เพื่อแก้ไขปัญหาเหล่านี้เราได้สร้างสิ่งที่น่าพิศวง TP (TP - / -) หนูที่ไม่มีฟีโนไทป์ทางคลินิกที่สังเกตได้ แต่แสดงระดับเจียมเนื้อเจียมตัวและ Thd dUrd เพราะ phosphorylase uridine หมา (UP) ลด Thd และ dUrd เราได้รับสิ่งที่น่าพิศวงขึ้น (UP - / -) หนู (16) และมีการสร้าง TP / UP คู่ที่น่าพิศวง (TP - / - UP - / -) หนู ที่คล้ายกัน TP - / - UP - / - หนูที่สร้างขึ้นโดย Haraguchi et al, (17) ที่แสดง leukoencephalopathy โดยไม่ต้องสูญเสียหรือการลบ mtDNA เป็นมนุษย์ไม่ได้อณูพันธุศาสตร์Oxford University Press สระว่ายน้ำไม่สมดุลทำให้เกิดความไม่แน่นอน deoxynucleotide ยลดีเอ็นเอใน thymidine หนู phosphorylase ขาดหลุยส์ซีโลเปซ, ฮะซันทุม Akman [... ] และ Michio Hirano ข้อมูลเพิ่มเติมบทความบทคัดย่อการจำลองแบบและการซ่อมแซมดีเอ็นเอต้องequilibrated สระว่ายน้ำของสารตั้งต้น deoxynucleoside triphosphate แนวคิดนี้ได้รับการพิสูจน์โดยการศึกษาในหลอดทดลองเป็นเวลาหลายปี แต่ในรูปแบบที่ร่างกายจะต้องแสดงให้เห็นถึงความเกี่ยวข้องกับสิ่งมีชีวิตและโรคของมนุษย์ ดังนั้นเราจึงมีการสร้าง phosphorylase thymidine (TP) และ uridine phosphorylase (UP) คู่ที่น่าพิศวง (TP - / - UP - / -) หนูซึ่งแสดงให้เห็นการขาด TP รุนแรงที่เพิ่มขึ้นและ thymidine deoxyuridine ในเนื้อเยื่อและ triphosphate deoxythymidine สูงยล ในฐานะที่เป็นผลกระทบจากความไม่สมดุลของสระว่ายน้ำเบสสมองของหนูกลายพันธุ์พัฒนาการสูญเสียบางส่วนของ mtDNA ขาดคอมเพล็กซ์ห่วงโซ่ทางเดินหายใจและ encephalopathy การค้นพบนี้บัญชีส่วนใหญ่เกิดโรค encephalopathy neurogastrointestinal ยล (MNGIE) เป็นครั้งแรกที่ได้รับการถ่ายทอดความผิดปกติของมนุษย์ในการเผาผลาญอาหาร nucleoside ที่เกี่ยวข้องกับความไม่แน่นอนดีเอ็นเอร่างกาย. บทนำความคิดที่ว่าสระว่ายน้ำที่สมดุลของ deoxyribonucleoside triphosphate (dNTP) สารตั้งต้นเป็นสิ่งจำเป็นสำหรับการคัดลอกดีเอ็นเอและการซ่อมแซม ได้รับการศึกษาในหลอดทดลองมานานกว่าสี่สิบปี (1,2) แต่ความเกี่ยวข้องกับโรคของมนุษย์ไม่ได้ถูกบันทึกไว้จนกว่าจะถึงปี 1999 เมื่อเกิดการกลายพันธุ์ในยีน TYMP ถูกระบุว่าเป็นสาเหตุของการ encephalopathy neurogastrointestinal ยล (MNGIE) โรค autosomal-ด้อยที่โดดเด่นด้วยกล้ามเนื้ออ่อนแอ extraocular เผยเป็น ptosis และ ophthalmoplegia, ปลายประสาทอักเสบ, ระบบทางเดินอาหารที่ก่อให้เกิด dysmotility cachexia รุนแรงและความผิดปกติ leukoencephalopathy ยล (3-5) การกลายพันธุ์ที่ทำให้เกิด TYMP ลดลงอย่างรุนแรงของ thymidine phosphorylase (TP) กิจกรรม; เอนไซม์ทำเครื่องหมายของ pyrimidine nucleosides thymidine (Thd) และ deoxyuridine (dUrd) ในพลาสมาและเนื้อเยื่อและการลบหลายร่างกาย, การสูญเสียและการกลายพันธุ์จุดเว็บไซต์ที่เฉพาะเจาะจงของ mtDNA (3,4,6-12) การกลายพันธุ์จุดส่วนใหญ่เป็นเสื้อที่จะ-C นำหน้าด้วยการเปลี่ยนลำดับ 5'-AA บอกว่า triphosphate deoxythymidine สูง (dTTP) ก่อให้เกิดผลกระทบต่อไปเบื่อหน่ายในโรคนี้ (9) บนพื้นฐานของการค้นพบเหล่านี้เราตั้งสมมติฐานว่าเอนไซม์ไล Thd และ dUrd ในการทำให้เกิดความไม่สมดุลของสระว่ายน้ำ MNGIE เบื่อหน่ายซึ่งในที่สุดก็ทำให้เกิดความไม่แน่นอน mtDNA (4,7) ความสัมพันธ์ระหว่างระดับ Thd เพิ่มขึ้น dNTPs ยลไม่สมดุลและการเปลี่ยนแปลง mtDNA ที่ได้รับการแสดงให้เห็นในหลอดทดลอง เซลล์ HeLa และเซลล์ของมนุษย์สัมผัสกับ 10-50 ไมโครเมตร Thd แสดงให้เห็น dNTPs ยลไม่สมดุลและการลบ mtDNA และการสูญเสียซึ่งเป็นที่โดดเด่นมากในเซลล์นิ่ง (13-15). แม้ว่าผลในหลอดทดลองสนับสนุนสมมติฐานของเราสำหรับการเกิดโรคของ MNGIE เป็น ในรูปแบบที่ร่างกายมีความจำเป็นต้องตรวจสอบกลไกนี้เข้าใจความจำเพาะเนื้อเยื่อและทดสอบการรักษาที่มีศักยภาพ เพื่อแก้ไขปัญหาเหล่านี้เราได้สร้างสิ่งที่น่าพิศวง TP (TP - / -) หนูที่ไม่มีฟีโนไทป์ทางคลินิกที่สังเกตได้ แต่แสดงระดับเจียมเนื้อเจียมตัวและ Thd dUrd เพราะ phosphorylase uridine หมา (UP) ลด Thd และ dUrd เราได้รับสิ่งที่น่าพิศวงขึ้น (UP - / -) หนู (16) และมีการสร้าง TP / UP คู่ที่น่าพิศวง (TP - / - UP - / -) หนู ที่คล้ายกัน TP - / - UP - / - หนูที่สร้างขึ้นโดย Haraguchi et al, (17) ว่า leukoencephalopathy แสดงโดยไม่มีการสูญเสียหรือการลบ mtDNA, ไม่สามารถใช้ได้ ในการทำงานปัจจุบันเราลักษณะทางชีวเคมีลักษณะทางพันธุกรรมและเนื้อเยื่อของ TP ของเรา - / - UP - / - หนูซึ่งทำซ้ำคุณสมบัติของ MNGIE
การแปล กรุณารอสักครู่..
ความคิดที่สระว่ายน้ำที่สมดุลของ deoxyribonucleoside ไตรฟอสเฟต ( dntp ) สารตั้งต้นเป็นสิ่งจำเป็นสำหรับการจำลองตัวเองของดีเอ็นเอ และซ่อมแซม ได้ทำการศึกษาในหลอดทดลองของมนุษย์พันธุศาสตร์โมเลกุล สำนักพิมพ์มหาวิทยาลัยออกซ์ฟอร์ด
ไม่ขอขมาลาโทษสระเพราะดีเอ็นเอเพียงความไม่แน่นอนในฟอ ฟรีเลสขาดหนู
ลุยส์ซี. โลเปซ , Hasan . Akman [ . . . ] และ มิชิโอะ ฮิราโนะ
ไม่ขอขมาลาโทษสระเพราะดีเอ็นเอเพียงความไม่แน่นอนในฟอ ฟรีเลสขาดหนู
ลุยส์ซี. โลเปซ , Hasan . Akman [ . . . ] และ มิชิโอะ ฮิราโนะ
การแปล กรุณารอสักครู่..
ภาษาอื่น ๆ
การสนับสนุนเครื่องมือแปลภาษา: กรีก, กันนาดา, กาลิเชียน, คลิงออน, คอร์สิกา, คาซัค, คาตาลัน, คินยารวันดา, คีร์กิซ, คุชราต, จอร์เจีย, จีน, จีนดั้งเดิม, ชวา, ชิเชวา, ซามัว, ซีบัวโน, ซุนดา, ซูลู, ญี่ปุ่น, ดัตช์, ตรวจหาภาษา, ตุรกี, ทมิฬ, ทาจิก, ทาทาร์, นอร์เวย์, บอสเนีย, บัลแกเรีย, บาสก์, ปัญจาป, ฝรั่งเศส, พาชตู, ฟริเชียน, ฟินแลนด์, ฟิลิปปินส์, ภาษาอินโดนีเซี, มองโกเลีย, มัลทีส, มาซีโดเนีย, มาราฐี, มาลากาซี, มาลายาลัม, มาเลย์, ม้ง, ยิดดิช, ยูเครน, รัสเซีย, ละติน, ลักเซมเบิร์ก, ลัตเวีย, ลาว, ลิทัวเนีย, สวาฮิลี, สวีเดน, สิงหล, สินธี, สเปน, สโลวัก, สโลวีเนีย, อังกฤษ, อัมฮาริก, อาร์เซอร์ไบจัน, อาร์เมเนีย, อาหรับ, อิกโบ, อิตาลี, อุยกูร์, อุสเบกิสถาน, อูรดู, ฮังการี, ฮัวซา, ฮาวาย, ฮินดี, ฮีบรู, เกลิกสกอต, เกาหลี, เขมร, เคิร์ด, เช็ก, เซอร์เบียน, เซโซโท, เดนมาร์ก, เตลูกู, เติร์กเมน, เนปาล, เบงกอล, เบลารุส, เปอร์เซีย, เมารี, เมียนมา (พม่า), เยอรมัน, เวลส์, เวียดนาม, เอสเปอแรนโต, เอสโทเนีย, เฮติครีโอล, แอฟริกา, แอลเบเนีย, โคซา, โครเอเชีย, โชนา, โซมาลี, โปรตุเกส, โปแลนด์, โยรูบา, โรมาเนีย, โอเดีย (โอริยา), ไทย, ไอซ์แลนด์, ไอร์แลนด์, การแปลภาษา.
- Zone of inhibition
- Ore caya ko kite ni xdp gewe...tpi spa a
- เรือเกยตื้น
- An effective quality assurance programme
- As the time is close to most families ma
- วิทยาลัยการพลศึกษาวิทยาเขตศรีสะเกษ
- นักเรียน
- ฉันจะเก็บความทรงจำครั้งนี้ตลอดไป.ฉันขอให
- toggling between the two positions
- นักเรียน
- ฉันคิดว่าเขาจะมาแน่นอน
- ฉันนั่งรถกลับบ้านและถึงบ้านตอน19.00pm
- Saucer
- ฉันคิดว่าเขาจะมาแน่นอน
- scaring
- Scientific community
- ฉันอยากเป็นหมอ ฉันรักในอาชีพนี้ เพราะอาช
- Thai fragrant rice
- ฉันอยากเป็นหมอ ฉันรักในอาชีพนี้ เพราะอาช
- ฉันจะเก็บความทรงจำครั้งนี้ตลอดไป.ฉันขอให
- it was small and dirty
- ไมเคิลทำงานเยอะๆเหนื่อยไหม
- เดี๋ยวนัดอีกทีนะ ฉันต้องเข้าบ้านก่อน
- ผนังฝ้า
