Samples to visualise only germination were prepared for
transmission electron microscopy (TEM) and scanning electron
microscopy (SEM). Spores were heat activated (80 C, 15 min), and
incubated (12 h) aerobically at 30 C in a filter sterilised (0.45-mm
syringe filter, Millipore) germinant solution comprising L-alanine
(100 mM), L-lactate (50 mM) and NaHCO3 (50 mM) in TriseHCl
buffer (20 mM, pH 7.4) (Sigma). Samples (500 ml) were then
removed and prepared for TEM and SEM. To prepare samples to
visualise germination and subsequent emergence and outgrowth,
SEM was used. Spore suspensions were heat activated (80 C,
15 min), and incubated anaerobically at 30 C in TY broth plus Lalanine
(100 mM) and L-lactate (50 mM) to observe emergence and
outgrowth. Samples (500 ml) were taken at 30 min intervals for 5 h,
centrifuged (4000 g, 2 min, 4 C), and the remaining pellet prepared
for SEM.
ตัวอย่างที่ visualise เฉพาะการงอกได้เตรียมไว้สำหรับส่งอิเล็กตรอน microscopy (ยการ) และอิเล็กตรอนสแกนmicroscopy (SEM) เพาะเฟิร์นถูกเปิดใช้งานความร้อน (80 C, 15 นาที), และincubated (12 h) ที่ C 30 ในตัว aerobically sterilised (0.45 มม.ตัวกรองเข็ม มาก) germinant โซลูชันที่ประกอบด้วยอะลานีน L(100 mM), L-lactate (50 mM) และ NaHCO3 (50 mM) ใน TriseHClบัฟเฟอร์ (20 mM, pH 7.4) (ซิกมา) ตัวอย่าง (500 มล.) ถูกแล้วยการ และ SEM. เอาเตรียมไว้สำหรับ การเตรียมตัวอย่างเพื่อvisualise การงอก และเกิดขึ้นตามมา และ ไปมีใช้ SEM บริการสปอร์ถูกเปิดใช้งานความร้อน (80 C15 นาที), และ incubated anaerobically ที่ 30 C ในซุป TY บวก Lalanine(100 mM) และ L-lactate (50 mM) สังเกตเกิดขึ้น และไป ตัวอย่าง (500 มล.) ที่ถ่ายในช่วงเวลา 30 นาทีสำหรับ 5 hcentrifuged (4000 g, 2 นาที 4 C), และเม็ดที่เหลือที่เตรียมไว้สำหรับ SEM.
การแปล กรุณารอสักครู่..

ตัวอย่างที่เห็นภาพเดียวงอกเตรียม
กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนแบบส่องกราด ( TEM ) และกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนแบบส่องกราด ( SEM )
. สปอร์ถูกเปิดใช้งานความร้อน ( 80 C , 15 นาที ) ,
) ( 12 ชั่วโมง ) aerobically 30 C ในตัวกรอง sterilised ( 0.45-mm
กรอง , เข็มมิลลิ ) โซลูชั่นประกอบด้วย germinant อะลานีน
( 100 mM ) , l-lactate ( 50 มม. ) และโซเดียมไบคาร์บอเนต ( 50 มม. ) ใน trisehcl
บัฟเฟอร์ ( 20 อืม , pH 74 ) ( Sigma ) ตัวอย่าง ( 500 มล. ) แล้ว
ลบออกและเตรียม TEM และ SEM การเตรียมตัวอย่างเพื่อการงอกและงอกตามมาและเห็นภาพ
สำหรับ SEM , ใช้ สปอร์แขวนลอยอยู่ร้อนเปิดใช้งาน ( 80 C
15 นาทีและบ่มพ 30 C ในไทซุปบวก lalanine
( 100 มม. ) และ l-lactate ( 50 มม. ) เพื่อสังเกตและวิวัฒนาการ
ผลพลอยได้ .ตัวอย่าง ( 500 มล. ) ถ่ายที่ 30 นาทีช่วง 5 H ,
ไฟฟ้า ( 4000 กรัม 2 นาที 4 C ) , และเม็ดที่เหลือเตรียม
สำหรับ SEM
การแปล กรุณารอสักครู่..
