2.5. Determination of biochemical composition of biofloc
Biofloc samples for biochemical analysis were collected on a
fortnightly basis. Concentrated floc samples collected from each tank
using a floc separator were dried in an oven at 102°C until constant
weight and then preserved in a refrigerator. At the end of the
experiment, tank-wise pooled samples were ground and processed for
proximate analysis followingAOAC (1990). For ash contents, a known
amount of dry sample was burnt in a muffle furnace at 550 °C for 4 h
and the ash cooled and weighed. The crude protein content was
determined by the Kjeldahl method. Lipid content was determined
with Soxhlet apparatus. The energy content was determined by a
bomb calorimeter (Gallenkamp Autobomb). The C:N ratios were
determined using a CHN analyzer (Perkin Elmer 2400 Series II). Biofloc
samples for fatty acid analysis were collected at the end of the
experiment and freeze-dried. Fatty acid analysis was undertaken by a
modified direct methylation method (Christie, 2003) using an N-Evap
112 Liquid Gas Chromatograph (Organomation Associates Inc.).
2.6. Determination of fish welfare indicators
More than 50% of fish in each tank were sampled fortnightly,
anaesthetized and length and weight measured individually. These
fish were also checked for any skin or fin damage. At the end of the
experiment, one fish in each BFT treatment tank and two fish in each
RAS35 tanks were sacrificed, the 1st and second gills from one side
were removed and preserved in 10% buffered formalin. The samples
were then processed for histology. Unpreserved gills were examined
for parasites using a binocular microscope. Samples of skin mucus
were also checked under microscope.
At the end of the experiment, 10 fish were netted randomly from
each BFT35 and RAS35 tank. They were mildly anaesthetized with
benzocaine in a bucket, weighed and measured. Blood samples were
collected from the dorsal caudal aorta using heparinised syringes and
placed in microcentrifuge tubes. After blood sampling, fish were
individually tagged (internally) and recovered in another bucket with
clean water and air supply. Then they were transferred to another fish
tank within a RAS until they were blood sampled for second time after
1 h following the same procedure mentioned above.
Haematocrit (% packed red cell volume) was measured after
centrifuging sub-samples of whole blood collected the first time using
heparinised micro-haematocrit tubes for 5 min at 5000 g. The
remaining blood was centrifuged at 1200 g for 15 min and the plasma
was separated and stored at −70 °C. Concentrations of plasma cortisol
were determined using the radioimmunoassay described by Ellis et al.
(2004) with the modifications to the steroid extraction. Aliquots
(200 μl) of plasma were extracted with 1 ml ethyl acetate and after
thorough mixing and centrifugation (430 g for 10 min), 200 μl of
chilled (4 °C) supernatant were pipetted into duplicate polypropylene
tubes, which were evaporated to dryness under vacuum at 35 °C and
before cooling to 4 °C. Proximate composition and energy content of
fish were also compared. Ten randomly selected fish at stocking and
three fish in each tank at harvest were analyzed using the similar
methods described above for biofloc.
2.7. Statistical analysis
Water quality parameters were compared by two-way repeated
measures ANOVA with treatment (system type) as main factor and
sampling date as repeated measures factor (Gomez and Gomez, 1984).
The fish yield and blood parameters and biochemical composition of
floc and fish were compared using one-way ANOVA. If main effects
were significant, differences among the treatments were tested with
Tukey's multi-comparison test of means. The analyses were run at 5%
significance level using Statistica package.
2.5 การวิเคราะห์องค์ประกอบทางชีวเคมีของ biofloc
biofloc ตัวอย่างเพื่อการวิเคราะห์ทางชีวเคมีครั้งนี้มี
พื้นฐานรายปักษ์ เข้มข้นฟล็อคจำนวนจากถังแต่ละ
โดยใช้ฟล็อคคั่นแห้งในเตาอบที่ 102 ° C จนน้ำหนักคงที่
แล้วดองไว้ในตู้เย็น ในตอนท้ายของ
ทดลองถังปัญญารวมจำนวนดินและประมวลผลสำหรับ
followingaoac การวิเคราะห์โดยประมาณ ( 1990 ) สำหรับเถ้า , รู้จัก
จํานวนแห้งตัวอย่างถูกเผาในเตาเผาที่อุณหภูมิ 550 องศา C 4 H
และเถ้าเย็นและชั่งน้ำหนัก โปรตีนหยาบ โดยพิจารณาเนื้อหา
0 วิธีการ ไขมันตั้งใจ
ด้วย 1 เครื่อง เนื้อหาพลังงานถูกกำหนดโดยบอมบ์แคลอริมิเตอร์ (
gallenkamp autobomb ) อัตราส่วน C : N (
พิจารณาการใช้เครื่องวิเคราะห์ ( เพอร์กินเอลเมอร์ CHN 2400 Series II ) biofloc
ตัวอย่างวิเคราะห์กรดไขมันในตอนท้ายของ
ทดลองและแห้ง . การวิเคราะห์กรดไขมันถูกดำเนินการโดย
แก้ไขวิธีจากโดยตรง ( คริสตี้ , 2003 ) โดยใช้ n-evap
แก๊สเหลว 112 ( organomation Associates Inc . ) .
2.6 การกำหนดตัวชี้วัดสวัสดิการปลา
มากกว่า 50% ของจำนวนปลาในถังแต่ละรายปักษ์ ,
ให้ยาสลบโดยความยาวและน้ำหนักและวัดแบบ ปลาเหล่านี้
ยังตรวจสอบผิวใด ๆหรือความเสียหาย ครีบ ในตอนท้ายของ
การทดลองหนึ่งปลาในถังและรับการรักษาแต่ละสองปลาในแต่ละ
ras35 รถถังพลีชีพ , 1 และ 2 เหงือกจากด้านหนึ่ง
ถูกเอาออก และเก็บรักษาไว้ใน 10% ฟอร์มาลินบัฟเฟอร์ . ตัวอย่าง
ถูกประมวลผลแล้วเพื่อขึ้นไป unpreserved เหงือกตรวจร่างกาย
ปรสิตใช้กล้องจุลทรรศน์กล้องส่องทางไกล ตัวอย่างของ
เมือกผิวยังตรวจสอบภายใต้กล้องจุลทรรศน์ .
เมื่อสิ้นสุดการทดลอง 10 ปลาเป็นตาข่ายสุ่มจากแต่ละ bft35 ras35
และถัง พวกเขาอย่างอ่อนโยนให้ยาสลบโดยกับ
สมณศักดิ์ในถัง , ชั่งน้ำหนักและวัด ตัวอย่างเลือดถูก
รวบรวมจากหลอดเลือดแดงใหญ่ส่วนหาง ใช้เข็มฉีดยาและ heparinised
อยู่ในหลอดไมโครเซนตริฟิวจ์ . หลังจากตัวอย่างเลือด ปลาถูก
แบบแท็ก ( ภายใน ) และคืนในถังอีก
สะอาดและอากาศ . แล้วพวกเขาก็ถูกย้ายไปยังอีกปลา
ถังภายในราสจนเลือด โดยครั้งที่สองหลังจาก
1 H ตามขั้นตอนเดียวกันที่กล่าวข้างต้น
ฮีมาโตคริต ( % บรรจุเซลล์สีแดงปริมาตร ) สารตัวอย่างถูกวัดหลังจาก
ซับเลือดเก็บครั้งแรกใช้
heparinised ไมโครฮีมาโตคริตหลอดสำหรับ 5 นาทีที่ 5000 g .
เหลือเลือดระดับ 1200 กรัม 15 นาทีและพลาสมา
ถูกแยกเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 70 องศา − 10
cortisol พลาสม่า วิเคราะห์การใช้ radioimmunoassay อธิบายโดย Ellis et al .
( 2547 ) ด้วยการปรับเปลี่ยนไปใช้ในการสกัด เฉยๆ
( 200 μ L ) พลาสมาถูกสกัดด้วยเอทิลอะซีเตท 1 มิลลิลิตร และหลังจาก
อย่างละเอียดผสมและปั่น ( 430 กรัมต่อ 10 นาที ) , 200 μ l
แช่เย็น ( 4 ° C ) นำกำลัง pipetted เข้าท่อโพลิโพรพิลีน
ซ้ำ ซึ่งระเหยแห้งภายใต้สูญญากาศที่อุณหภูมิ 35 องศา C
ก่อนเย็น 4 องศาเนื้อหาองค์ประกอบและพลังงานโดยประมาณของ
ปลาก็เทียบได้ สิบสุ่มปลาที่ปล่อยและ
3 ปลาในแต่ละถังที่เก็บเกี่ยวโดยใช้วิธีการที่อธิบายข้างต้นสำหรับ biofloc เหมือนกัน
.
2.7 . การวิเคราะห์คุณภาพน้ำในพารามิเตอร์
เปรียบเทียบโดยการวิเคราะห์ความแปรปรวนแบบสองทาง ซ้ำ
มาตรการการรักษา ( ประเภทระบบ ) เป็นปัจจัยหลักและ
ตัวอย่างอาจเป็นปัจจัยวัดซ้ำ ( Gomez และ Gomez 1984 ) .
ปลาผลผลิตและองค์ประกอบทางชีวเคมีของเลือด และค่า
ฟล็อคและปลามาเปรียบเทียบ โดยใช้การวิเคราะห์ความแปรปรวนแบบทางเดียว ถ้าผลหลักเป็นสำคัญ ความแตกต่างระหว่างวิธีทดสอบกับ
ทดสอบหลายการทดสอบเปรียบเทียบว่า รวมถึง การวิเคราะห์ใช้อย่างมีนัยสำคัญทางสถิติที่ระดับ 5 เปอร์เซ็นต์ statistica
ใช้แพคเกจ
การแปล กรุณารอสักครู่..
