2. Research methodology2.1 Strain a

2. Research methodology
2.1 Strain and medium
S. cerevisiae TISTR 5048 and E. aerogenes TISTR 1468 were obtained from Thailand Institute of
Scientific and Technology Research (TISTR), Thailand. The culture of S. cerevisiae was maintained on
MPDY (malt extract 0.3%, peptone 0.5%, yeast extract 0.3% and dextrose 2%) agar (1.5%) slant at 4oC
[1]. E. aerogenes was cultivated on Luria-Bertani (LB) agar.
Each inoculum was prepared by inoculating the slant culture into 25 mL of the sterile liquid medium
in 100 mL conical flask and growing it on a rotary shaker (100 rpm) for 48 h. 20% (v/v) inoculums (6 x
104 cell/mL) was inoculated into 100 mL sterile pineapple peel hydrolysate in 250 mL conical flask and
was incubated up to 5 days under stationary conditions. All the state experiments were conducted at pH
5.0 and 30oC [1].
2.2 Pineapple peel pretreatment and composition analysis
Pineapple peel was obtained from local canned pineapple industry (Chomporn, Thailand). It was dried
and milled to a particle size of 40 BS (British standard) mesh in an apex mill.
To increase enzymatic degradation in the production of biofuel by enzymatic hydrolysis, a
pretreatment process is necessary. For the pretreatment process, five gram of dry feedstock was placed in
a 50 mL plastic centrifuge tube, and then mixed with 40 mL of distilled water (control), acetic acid
(CH3COOH), phosphoric acid (H3PO4) and ammonium sulfate [(NH4)2SO4] at the concentration of 2%
(w/v). The solid/liquid slurry was incubated in a water bath (50-100oC, 30–240 min), stream explosion
(121oC, 15-60 min), ultrasonic (15-60 min) and microwave (1-3 min). After the reaction, 10 mL of precold
acetone was added into the tube to quench the reaction, and then mixed well by force. Afterward, the
supernatant and cellulosic pellets were collected by centrifugation (10,000 rpm, 10 min) [8]. The
supernatant was filtrated through a 0.2

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. วิธีวิจัยต้องใช้ 2.1 และกลางS. cerevisiae 5048 ววและ E. aerogenes 1468 ววได้รับมาจาก สถาบันวิทยาศาสตร์ และเทคโนโลยีวิจัย (วว), ประเทศไทย วัฒนธรรมของ S. cerevisiae ที่อยู่ในMPDY (มอลต์สกัด 0.3%, peptone 0.5% ยีสต์สารสกัด 0.3% และ 2% ขึ้น) เอียง agar (1.5%) ที่ 4oC[1] . E. aerogenes ได้ cultivated ใน agar Luria-Bertani (ปอนด์)มีเตรียม inoculum ละ โดย inoculating วัฒนธรรมเอียงเป็น 25 mL ใส่น้ำกลางใน 100 mL ทรงกรวยหนาวและเติบโตในเชคเกอร์โรตารี่ (100 รอบต่อนาที) สำหรับ 48 h. inoculums 20% (v/v) (6 x104 เซลล์/มล.) ถูก inoculated ไปด้วยเปลือกสับปะรดใส่ 100 mL ใน 250 mL ทรงกรวยหนาว และมี incubated ขึ้นไปอีก 5 วันกับสภาวะ ได้ดำเนินการทดลองรัฐทั้งหมดที่ pH5.0 และ 30oC [1]2.2 เปลือกสับปะรด pretreatment และองค์ประกอบวิเคราะห์เปลือกสับปะรดที่ได้จากอุตสาหกรรมสับปะรดกระป๋องภายใน (Chomporn ไทย) มันไม่แห้งและสารขนาดอนุภาคของตาข่าย BS (มาตรฐานอังกฤษ) 40 ในโรงสี apexเพิ่มเอนไซม์ในระบบย่อยสลายในการผลิตเชื้อเพลิงชีวภาพ โดยเอนไซม์ในระบบไฮโตรไลซ์ การจำเป็นกระบวนการ pretreatment สำหรับกระบวนการ pretreatment, 5 กรัมของวัตถุดิบแห้งถูกวางไว้ในพลาสติก 50 mL เครื่องหมุนเหวี่ยงท่อ และจากนั้น ผสมกับ 40 mL ของน้ำกลั่น (ควบคุม), กรดอะซิติก(อะเซติก), กรดฟอสฟอริก (H3PO4) และแอมโมเนียซัลเฟต [(NH4) 2SO4] ที่ความเข้มข้น 2%(w/v) สารละลายของแข็ง/ของเหลวถูก incubated ในห้องน้ำ (50-100oC, 30 – 240 นาที), ขยายกระแส(121oC, 15-60 นาที), อัลตราโซนิก (15-60 นาที) และไมโครเวฟ (1-3 นาที) หลังจากปฏิกิริยา 10 mL ของ precoldอะซีโตนถูกเพิ่มเข้าไปในท่อเพื่อแก้ปฏิกิริยา แล้ว ผสมกัน โดยแรง หลังจากนั้น การขี้ supernatant และ cellulosic ถูกรวบรวม โดย centrifugation (10000 รอบต่อนาที 10 นาที) [8] ที่supernatant ที่ filtrated ผ่านตัวกรอง 0.2