3.3.4. Effect of calcium on trypsin

3.3.4. Effect of calcium on trypsin thermostability
The increased rate of proteolysis of proteases at elevated temperatures is one of the factors responsible for the rapid thermal inactivation of enzymes. Several works reported that calcium ion plays a major role in enzyme stabilization at high temperatures. To determine whether Ca2+ enhanced thermal stability of trypsin during thermal inactivation, the stability was examined by incubating the purified trypsin for 4 h 30 min at 50 ◦C in the absence and presence
of 2 mM CaCl2 or 2 mM EDTA. The thermal stability profiles reported in Fig. 4a showed a continuous decrease in trypsin activity in the absence of CaCl2 or in the presence of EDTA with increasing incubation time. The enzyme retained 50% and 34% of its activity after 60 min incubation in the absence of CaCl2 or in the presence of EDTA, respectively. However, the stability of the enzyme was promote the formation of active trypsin from trypsinogen and stabilize trypsin against autolysis. Similarly, trypsins from other fish species were activated by calcium ion [13,27]. On the contrary, trypsin from pyloric ceca of the starfish Asterina pectinifera was neither activated nor stabilized by calcium ion [34]. Protease activity was not affected by Ba2+, NaCl and KCl at a concentration of 5 mM. The trypsin activity was reduced by Zn2+ to
10%. Cu2+ and Hg2+ completely inhibited trypsin activity. Since CaCl2 enhances trypsin activity, the effect of its concentration on enzyme activity was also studied. As shown in Fig. 4b, maximum activity was obtained with 5 mM CaCl2 and there was 220% increase in the activity compared to that realized without CaCl2. Beyond 5 mM Ca2+, trypsin activity decreased. These results indicated that the enzyme require Ca2+ for its optimal activity. The calcium requirement for trypsin activity is highly specific since other metal ions (such as Mn2+, Mg2+, and Ba2+) are not able to enhance, or slightly stimulated the enzyme activity.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

3.3.4 ผลของแคลเซียมใน trypsin ทนร้อน
อัตราการเพิ่มขึ้นของ proteolysis ของโปรตีเอสที่อุณหภูมิสูงเป็นหนึ่งในปัจจัยที่รับผิดชอบในการใช้งานความร้อนอย่างรวดเร็วของเอนไซม์ ผลงานหลายรายงานว่าไอออนแคลเซียมมีบทบาทสำคัญในการรักษาเสถียรภาพของเอนไซม์ที่อุณหภูมิสูง เพื่อตรวจสอบว่า Ca2 + เพิ่มเสถียรภาพทางความร้อนของ trypsin ระหว่างพลังความร้อนที่มีความมั่นคงได้รับการตรวจสอบโดยการบ่ม trypsin บริสุทธิ์ 4 ชั่วโมง 30 นาทีที่ 50 ◦Cในกรณีที่ไม่มีและการปรากฏตัว
ของ 2 มิลลิ CaCl2 หรือ 2 มิลลิ EDTA โปรไฟล์เสถียรภาพทางความร้อนรายงานในรูป 4a แสดงให้เห็นว่าการลดลงอย่างต่อเนื่องในกิจกรรม trypsin ในกรณีที่ไม่มี CaCl2 หรือในที่ที่มี EDTA มีเวลาบ่มที่เพิ่มขึ้น เอนไซม์ที่เก็บไว้ 50% และ 34% ของกิจกรรม 60 นาทีหลังจากการบ่มในกรณีที่ไม่มี CaCl2 หรือในที่ที่มี EDTA ตามลำดับ แต่ความมั่นคงของเอนไซม์เป็นส่งเสริมการก่อตัวของ trypsin ใช้งานจาก trypsinogen trypsin และความมั่นคงกับการย่อยตัวเอง ในทำนองเดียวกัน trypsins จากปลาชนิดอื่น ๆ ที่ถูกเปิดใช้งานโดยแคลเซียมไอออน [13,27] ในทางตรงกันข้าม trypsin จากซีกั pyloric ของปลาดาว Asterina pectinifera ไม่ถูกเปิดใช้งานหรือมีเสถียรภาพโดยแคลเซียมไอออน [34] กิจกรรมโปรติเอสไม่ได้รับผลกระทบจาก Ba2 + โซเดียมคลอไรด์และโพแทสเซียมคลอไรด์ที่ความเข้มข้น 5 มิลลิ กิจกรรม trypsin ลดลง Zn2 + เพื่อ
10% Cu2 + และ Hg2 + กิจกรรม trypsin ยับยั้งสมบูรณ์ ตั้งแต่ CaCl2 ช่วยเพิ่มกิจกรรม trypsin ผลของความเข้มข้นที่มีต่อการทำงานของเอนไซม์ศึกษายัง ดังแสดงในรูป 4b กิจกรรมที่ได้รับสูงสุด 5 มิลลิ CaCl2 และมีการเพิ่มขึ้น 220% ในกิจกรรมเมื่อเทียบกับที่โดยไม่ต้องตระหนัก CaCl2 นอกเหนือจาก 5 มิลลิ Ca2 + กิจกรรม trypsin ลดลง ผลการศึกษานี้ชี้ให้เห็นว่าเอนไซม์ต้อง Ca2 + กิจกรรมที่เหมาะสม ความต้องการแคลเซียมกิจกรรม trypsin เป็นอย่างมากโดยเฉพาะตั้งแต่ไอออนโลหะอื่น ๆ (เช่น MN2 + Mg2 + และ Ba2 +) ไม่สามารถที่จะเพิ่มหรือเล็กน้อยกระตุ้นการทำงานของเอนไซม์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

3.3.4 . อิทธิพลของแคลเซียมต่อทริปทดล
อัตราการเพิ่มขึ้นของโปรติโอไลซีสของน้ำหนักโมเลกุลที่อุณหภูมิสูงเป็นหนึ่งในปัจจัยที่รับผิดชอบในการยับยั้งความร้อนอย่างรวดเร็วของเอนไซม์ ทำงานหลายรายงานว่าแคลเซียมไอออนในบทบาทหน้าที่ของเอนไซม์คงตัวที่อุณหภูมิสูงเพื่อตรวจสอบว่าแคลเซียมเพิ่มเสถียรภาพทางความร้อนของซินในการยับยั้งความร้อน , เสถียรภาพทางเศรษฐกิจ ทำการทดสอบโดยการแช่เอนไซม์บริสุทธิ์ 4 ชั่วโมง 30 นาทีที่ 50 ◦ C ในการขาดงานและการปรากฏตัว
2 มม. ผลิตหรือ 2 mM EDTA . ระบบความมั่นคงรายงานในรูปโปรไฟล์4 พบว่าลดลงอย่างต่อเนื่องในกิจกรรมของเอนไซม์ในการผลิตหรือในการปรากฏตัวของ EDTA กับเพิ่มระยะเวลาการบ่มดิน เอนไซม์รักษา 50% และ 34% ของกิจกรรม หลังจาก 60 นาที ระยะเวลาในการผลิต หรือในการปรากฏตัวของ EDTA , ตามลำดับ อย่างไรก็ตามเสถียรภาพของเอนไซม์ คือ ส่งเสริมการใช้รูปจากทริปซิโนเจนและความมั่นคงต่อการย่อยเอนไซม์ . ในทํานองเดียวกัน trypsins จากปลาสายพันธุ์อื่น ๆ เปิดใช้งาน โดยแคลเซียมไอออน [ 13,27 ] ในทางตรงกันข้ามเอนไซม์จาก CECA pyloric ของปลาดาว asterina pectinifera ก็ไม่เปิด หรือทรงตัว โดยแคลเซียมไอออน [ 34 ] กิจกรรม ได้รับผลกระทบ โดย ba2 ติ ,และเกลือโพแทสเซียมที่ระดับความเข้มข้น 5 มิลลิเมตร การเปลี่ยนแปลงกิจกรรมลดลง zn2

10 % และยับยั้งกิจกรรมของเอนไซม์ hg2 CU2 . ตั้งแต่ผลิตกิจกรรมเอนไซม์ช่วยเพิ่มผลของความเข้มข้นของเอนไซม์และศึกษา . ดังแสดงในรูปที่ 4B ,กิจกรรมสูงสุดได้ 5 มม. และมีการผลิตเพิ่มขึ้น 220% ในกิจกรรม เปรียบเทียบกับการตระหนักโดยไม่ผลิต . นอกเหนือจากแคลเซียม 5 มิลลิเมตร กิจกรรมของเอนไซม์ลดลง ผลการทดลองนี้ชี้ให้เห็นว่ามีกิจกรรมเอนไซม์แคลเซียมที่เหมาะสมของมัน ความต้องการแคลเซียมสำหรับกิจกรรมเอนไซม์เฉพาะเจาะจงอย่างมากเนื่องจากไอออนโลหะอื่น ๆ ( เช่น mn2 mg2 , และ ba2 ) ไม่สามารถที่จะเพิ่มประสิทธิภาพหรือจะกระตุ้นกิจกรรมของเอนไซม์ .