2. Materials and methods
2.1. Sample preparation
Pineapple Fruits (A. comosus) of the Smooth Cayenne variety
were purchased from the local market. Fruits, in the range
11.2–12.8◦ Brix, were manually peeled, cored and cut into half
rings (slices) of 6.0
±
0.5 mm thick and 115
±
5 mm in diameter.
Because there is a great variation in the nutrients content
between the base and the top of the fruit (Miller and Hall, 1953;
Ramallo and Mascheroni, 2004), only the central zone of each
pineapple fruit was used in experiments.
2.2. Drying process
Drying experiments were performed in a convective cross
flow pilot dryer at 45, 60 and 75 ◦C, by triplicate. Air velocity
was fixed at 1.5 m/s. The pineapple slices were put in an
aluminum basket avoiding the contact between fruit pieces.
At pre-established times, three samples were removed (at
random) from the dryer; in order to measure the color and
determine moisture and ascorbic acid content.
Moisture content was determined gravimetrically by oven
drying at 75 ◦C until constant weight (48 h approximately).
2.3. l-Ascorbic acid determination
2.3.1. Extraction process
All analyses were carried out by duplicate on vegetable tissue.
Each sample (7–9 g) was weighed and crushed in porcelain
mortar for 5 min, with gradual addition of 50 mL of buffer solution
(pH 2.5). Buffer solution used in this step is the same of
mobile phase. This mixture was transferred to a dark flask,
sonicated for 10 min and then filtered though filter paper.
Portions of the extract (10 L) were injected into the HPLC chromatograph.
All procedures were carried out carefully without
much exposure to light.
2.3.2. Quantitative determination
l-Ascorbic acid was determined by high performance liquid
chromatography (HPLC), in isocratic conditions with an Alltima
C-18 column (250 mm
×
4.6 mm, 5 mm particle size). A
mobile phase of buffer (potassium phosphate 0.02 M, pH = 2.5
by phosphoric acid):acetonitrile (98:2, v/v) was used at a flow
rate of 1.0 mL/min. Detection of l-ascorbic acid was carried out
at = 254 nm. Identification and quantification were carried
out by comparison of the retention time and the peak area
of the sample with those of a standard reference. Standard
solution of l-ascorbic acid was prepared by diluting 100 mg
l-ascorbic acid (A-0278, Sigma) in 100 mL buffer; then this
solution was diluted (1/10, 1/50 and 1/100). The reference peak
area was obtained by injecting 10 L of solution with standard
concentration of 0.02 mg/mL (external standard procedure).
During the assay, the reference chromatogram was done every
2 h.
2.3.3. l-Ascorbic acid variation in fresh fruit
Variation of l-ascorbic acid content in fresh fruit as a function
of position from the bottom towards the top was studied.
Fruits were peeled, cored and cut into slices of 13
±
1 mm thickness;
these slices were classified according to the position
(number 1 is the top); 8–9 slices of each fruit were obtained.
The l-ascorbic acid content in each piece was evaluated. This
experiment was carried out by triplicate.
2. วัสดุและวิธีการ2.1. ตัวอย่างสับปะรดผลไม้ (A. comosus) หลากหลายป่นเรียบซื้อจากตลาดท้องถิ่น ผลไม้ ในช่วง11.2 – 12.8◦ Brix ด้วยตนเองปอกเปลือก cored และตัดเป็นครึ่งแหวน (ชิ้น) ของ 6.0±115 และหนา 0.5 มม.±เส้นผ่านศูนย์กลาง 5 มม.เนื่องจากมีการเปลี่ยนแปลงที่ดีในเนื้อหาสารอาหารระหว่างฐานและด้านบนของผลไม้ (มิลเลอร์และฮอลล์ 1953Ramallo และ Mascheroni, 2004), เฉพาะพื้นที่ส่วนกลางของแต่ละสับปะรดผลไม้ถูกใช้ในการทดลอง2.2. กระบวนการอบแห้งดำเนินการทดลองอบแห้งในระหว่างด้วยการพานำร่องไหลเป่าที่ 45, 60 และ 75 ◦C โดย triplicate ความเร็วอากาศไม่คงที่ 1.5 m/s ใส่ชิ้นสับปะรดในการหลีกเลี่ยงการสัมผัสระหว่างชิ้นผลไม้ตะกร้าอลูมิเนียมที่ก่อตั้งก่อนเวลา ออกสามตัวอย่างที่สุ่ม) จากเครื่องเป่า การวัดสี และกำหนดเนื้อหาของความชื้นและกรดแอสคอร์บิคชื้นถูกตาม gravimetrically เตาอบแห้งจนน้ำหนักคงที่ที่ 75 ◦C (48 h ประมาณ)2.3 การกำหนดกรดแอสคอร์บิค l2.3.1 การแยกกระบวนการวิเคราะห์ทั้งหมดถูกดำเนิน โดยซ้ำบนเนื้อเยื่อผักชั่งน้ำหนัก และบดในเครื่องเคลือบดินเผาแต่ละตัวอย่าง (7-9 กรัม)ปูนสำหรับ 5 นาที มีสมดุลแห่ง 50 mL ของบัฟเฟอร์(pH 2.5) บัฟเฟอร์ที่ใช้ในขั้นตอนนี้เป็นเหมือนกับของระยะเคลื่อน ส่วนผสมนี้ถูกโอนย้ายไปหนาวมืดsonicated สำหรับ 10 นาทีแล้ว กระดาษกรองกรองแม้ว่าส่วนการดึงข้อมูล (10 L) ถูกฉีดเข้าไปใน HPLC chromatographขั้นตอนทั้งหมดได้ดำเนินการอย่างรอบคอบโดยแสงมากแสง2.3.2 การกำหนดเชิงปริมาณกรดแอสคอร์บิค l ถูกกำหนด โดยของเหลวประสิทธิภาพสูงchromatography (HPLC), isocratic คิดสภาพกับการ Alltimaคอลัมน์ C-18 (250 มม.×4.6 mm, 5 mm ขนาดอนุภาค) Aระยะเคลื่อนที่ของบัฟเฟอร์ (โพแทสเซียมฟอสเฟต 0.02 M, pH = 2.5โดยที่กรดฟอสฟอริก): ใช้ acetonitrile (98:2, v/v) ในขั้นตอนการอัตรา 1.0 มิลลิลิตร/นาทีตรวจพบกรดแอสคอร์บิค l ถูกดำเนินการที่ = 254 nm ทำรหัสและนับออก โดยเปรียบเทียบเวลาเก็บข้อมูลและพื้นที่สูงสุดของตัวอย่างกับการอ้างอิงมาตรฐาน มาตรฐานของกรดแอสคอร์บิค l ถูกเตรียม โดย diluting 100 มิลลิกรัมกรดแอสคอร์บิค l (A-0278 ซิก) ในบัฟเฟอร์ 100 mL แล้วนี้โซลูชันที่ถูกทำให้เจือจาง (1/10, 1/50 และ 1/100) สูงสุดอ้างอิงตั้งกล่าว โดย injecting L 10 ของโซลูชันมาตรฐานความเข้มข้น 0.02 mg/mL (ขั้นตอนมาตรฐานภายนอก)ในระหว่างการทดสอบ ทำ chromatogram อ้างอิงทุก2 h2.3.3. l แอสคอร์บิคปรับกรดในผลไม้สดเปลี่ยนแปลงของกรดแอสคอร์บิค l ในผลไม้เป็นฟังก์ชันตำแหน่งจากด้านล่างสู่ด้านบนถูกศึกษาผลไม้ปอกเปลือก cored และตัดเป็นชิ้นของ 13±ความหนา 1 มม.ชิ้นนี้ถูกแบ่งตามตำแหน่ง(หมายเลข 1 คือ ด้านบน); 8 – 9 ชิ้นของผลไม้แต่ละได้รับมีประเมินเนื้อหากรดแอสคอร์บิค l ในแต่ละชิ้น นี้การทดลองที่ดำเนิน โดย triplicate
การแปล กรุณารอสักครู่..
2. วัสดุและวิธีการ
2.1 การเตรียมสารตัวอย่าง
ผลไม้สับปะรด (A. comosus) ของความหลากหลาย Cayenne เรียบ
ที่ซื้อมาจากตลาดในประเทศ ผลไม้ในช่วง
11.2-12.8◦ Brix ถูกปอกเปลือกด้วยตนเอง cored และตัดเป็นครึ่ง
แหวน (ชิ้น) 6.0
±
0.5 มมหนาและ 115
±
5 มม.
เนื่องจากมีการเปลี่ยนแปลงอย่างมากในเนื้อหาสารอาหาร
ระหว่าง ฐานและด้านบนของผลไม้ (มิลเลอร์และฮอลล์ 1953;
Ramallo และ Mascheroni, 2004) เพียงเขตภาคกลางของแต่ละ
ผลสับปะรดที่ใช้ในการทดลอง.
2.2 กระบวนการอบแห้ง
ทดลองการอบแห้งได้ดำเนินการในข้ามไหลเวียน
ไหลเป่านักบินที่ 45, 60 และ 75 ◦Cโดยเพิ่มขึ้นสามเท่า ความเร็วลม
คงที่ 1.5 เมตร / วินาที ชิ้นสับปะรดวางอยู่ใน
ตะกร้าอลูมิเนียมหลีกเลี่ยงการติดต่อระหว่างชิ้นผลไม้.
ในช่วงเวลาก่อนขึ้นสามตัวอย่างที่ถูกถอดออก (ที่
สุ่ม) จากเครื่องเป่า; เพื่อวัดสีและ
ตรวจสอบความชื้นและปริมาณกรดแอสคอบิ.
ความชื้นถูกกำหนด gravimetrically โดยเตา
อบแห้งที่อุณหภูมิ 75 ◦Cจนน้ำหนักคงที่ (48 ชั่วโมงโดยประมาณ).
2.3 L-Ascorbic มุ่งมั่นกรด
2.3.1 กระบวนการสกัด
การวิเคราะห์ทั้งหมดถูกดำเนินการโดยที่ซ้ำกันในเนื้อเยื่อพืช.
แต่ละตัวอย่าง (7-9 กรัม) ได้รับการชั่งน้ำหนักและบดในเครื่องเคลือบดินเผา
ปูนเป็นเวลา 5 นาทีด้วยนอกเหนือค่อยๆ 50 มิลลิลิตรสารละลายบัฟเฟอร์
(pH 2.5) สารละลายบัฟเฟอร์ใช้ในขั้นตอนนี้จะเหมือนกับของ
เฟสเคลื่อนที่ ส่วนผสมนี้ถูกถ่ายโอนไปยังขวดมืด
sonicated เป็นเวลา 10 นาทีแล้วกรองแม้ว่ากระดาษกรอง.
บางส่วนของสารสกัด (10? L) ได้รับการฉีดเข้าไปใน Chromatograph HPLC.
ขั้นตอนทั้งหมดถูกดำเนินการอย่างรอบคอบโดยไม่ต้อง
เปิดรับแสงมากที่จะ.
2.3 2 การกำหนดปริมาณ
L-ascorbic acid ถูกกำหนดโดยของเหลวสมรรถนะสูง
โค (HPLC) ในสภาพ Isocratic กับ Alltima
C-18 คอลัมน์ (250 มิลลิเมตร
×
4.6 มิลลิเมตร, 5 มมขนาดอนุภาค)
เฟสเคลื่อนที่ของบัฟเฟอร์ (ฟอสเฟตโพแทสเซียม 0.02 M, ค่า pH = 2.5
ด้วยกรดฟอสฟ): acetonitrile (98: 2, v / v) ถูกนำมาใช้ในการไหล
อัตรา 1.0 มิลลิลิตร / นาที การตรวจสอบของ L-ascorbic acid ได้รับการดำเนินการ
ที่? = 254 นาโนเมตร การจำแนกชนิดและปริมาณที่ถูกดำเนิน
การโดยการเปรียบเทียบเวลาการเก็บรักษาและบริเวณจุดสูงสุด
ของกลุ่มตัวอย่างที่มีผู้อ้างอิงมาตรฐาน มาตรฐาน
การแก้ปัญหาของ L-ascorbic acid เตรียมโดยเจือจาง 100 mg
L-ascorbic acid (A-0278, Sigma) ใน 100 มิลลิลิตรบัฟเฟอร์; แล้วนี้
การแก้ปัญหาถูกเจือจาง (1/10, 1/50 และ 1/100) ยอดการอ้างอิง
ในพื้นที่ที่ได้รับโดยการฉีด 10? L ของการแก้ปัญหาที่มีมาตรฐาน
ความเข้มข้นของ 0.02 mg / ml (ขั้นตอนมาตรฐานภายนอก).
ในระหว่างการทดสอบ, chromatogram อ้างอิงได้ทำทุก
2 ชั่วโมง.
2.3.3 L-Ascorbic เปลี่ยนแปลงกรดผลไม้สดใน
รูปแบบที่หลากหลายของเนื้อหา L-ascorbic acid ในผลไม้สดเป็นหน้าที่
ของตำแหน่งจากด้านล่างไปทางด้านบนได้ศึกษา.
ผลไม้ที่ถูกปอกเปลือกคว้านเมล็ดและหั่นเป็นชิ้นของ 13
±
1 มิลลิเมตรหนา;
ชิ้นเหล่านี้ จำแนกตามตำแหน่ง
(จำนวน 1 อยู่ด้านบน); 8-9 ชิ้นของผลไม้แต่ละที่ได้รับ.
เนื้อหา L-ascorbic acid ในแต่ละชิ้นถูกประเมิน นี้
การทดลองได้ดำเนินการโดยเพิ่มขึ้นสามเท่า
การแปล กรุณารอสักครู่..
2 . วัสดุและวิธีการ
2.1 . ตัวอย่างการเตรียม
สับปะรดผลไม้ ( อ. 1 ) ของเรียบ Cayenne ความหลากหลาย
ซื้อมาจากตลาดในประเทศ ผลไม้ ในช่วง◦
11.2 – 12 บริกซ์ , ตนเองปอกเปลือก , cored และหั่นครึ่งวง ( ชิ้น )
6
±
0.5 มม. หนาและ 115 ±
5 มม.
เนื่องจากมีการเปลี่ยนแปลงที่ยิ่งใหญ่ในคุณค่าโภชนาการ
ระหว่างฐานและด้านบนของผลไม้ ( มิลเลอร์และฮอลล์ 2496 ;
ramallo และ mascheroni , 2004 ) เฉพาะพื้นที่ส่วนกลางของแต่ละ
สับปะรดผลไม้ที่ใช้ในการทดลอง
2.2 . การทดลองอบแห้ง
มีการปฏิบัติในการพาข้ามไหลนักบินเครื่องเป่าที่ 45 , 60 และ 75 ◦ C โดยทำสำเนาสามฉบับ . ความเร็วลม
คงที่ 1.5 m / s ชิ้นสับปะรดใส่ใน
อลูมิเนียมตะกร้าหลีกเลี่ยงการติดต่อระหว่างชิ้นผลไม้
ก่อนก่อตั้งครั้ง สามตัวอย่างถูกเอาออก (
สุ่ม ) จากเครื่องเป่า เพื่อวัดสีและตรวจสอบความชื้น และปริมาณวิตามินซี
.
ความชื้นถูกกำหนดโดยการอบแห้งในเตาอบ gravimetrically
75 ◦ C จนน้ำหนักคงที่ ( ประมาณ 48 ชม. )
2.3 L-Ascorbic Acid ปริมาณ
2.3.1 .
ขั้นตอนการสกัดวิเคราะห์ข้อมูลทั้งหมดที่ดำเนินการโดยซ้ำบนเนื้อเยื่อพืช
แต่ละตัวอย่าง ( 7 – 9 g ) หนักและบด ในเครื่องลายคราม
ปูน 5 นาทียังค่อยเป็นค่อยไป
50 มิลลิลิตร สารละลายบัฟเฟอร์ pH 2.5 ) สารละลายบัฟเฟอร์ที่ใช้ในขั้นตอนนี้เป็นเดียวกัน
เฟสเคลื่อนที่ . ส่วนผสมนี้ถูกโอนไปยังขวดมืด
sonicated 10 นาที แล้วกรองแม้ว่า
กระดาษกรองส่วนสารสกัด ( 10 L ) ถูกฉีดเข้าไปใน HPLC โครมาโตกราฟ .
ขั้นตอนทั้งหมด ได้ดำเนินการอย่างรอบคอบ โดยการเปิดรับแสงมาก
.
2.3.2 . การหาปริมาณ L-Ascorbic Acid ตั้งใจ
โดยวิธีโครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูง ( HPLC ) ในเงื่อนไข Isocratic กับ alltima
- คอลัมน์ ( 250 มม. ×
4.6 มิลลิเมตร ขนาด 5 มม. )
เป็นระยะเคลื่อนที่ของบัฟเฟอร์ ( โพแทสเซียมฟอสเฟต 0.02 M pH = 2.5
โดยกรดฟอสฟอริก ) : ไน ( 98:2 , V / V ) คือ ใช้ในอัตราการไหล
1.0 มล. / นาที การตรวจหา L-Ascorbic Acid ครั้งนี้
ที่ = 254 นาโนเมตร การจำแนกชนิดและปริมาณอะมิโน
โดยเปรียบเทียบในเวลาและพื้นที่สูงสุด
ของตัวอย่างกับผู้ที่อ้างอิงมาตรฐาน มาตรฐาน
โซลูชั่นของ L-Ascorbic Acid เตรียมโดยละลาย 100 mg L-Ascorbic Acid (
a-0278 , Sigma ) 100 มิลลิลิตร บัฟเฟอร์ แล้ว โซลูชั่นนี้
เจือจาง ( 1 / 10 1 / 50 หรือ 1 / 100 ) การอ้างอิงสูงสุด
พื้นที่ได้โดยการฉีดสารละลายที่มีความเข้มข้น 10 ลิตรมาตรฐาน
0.02 mg / ml ( ภายนอกขั้นตอนมาตรฐาน ) .
ในระหว่างการทดสอบ , การอ้างอิงโครมาาทุก
2 H .
2.3.3 .L-Ascorbic Acid ความผันแปรในการแปรผล
สดของกรดโมเลกุลเกาะติดของโฮสต์ในผลไม้สดเป็นฟังก์ชัน
ตำแหน่งจากด้านล่างสู่ด้านบน ศึกษา .
ผลไม้ปอกเปลือก , cored และหั่นเป็นชิ้นหนา 1 มม. ± 13
;
ชิ้นนี้ จำแนกตามตำแหน่ง
( อันดับ 1 คือ ด้านบน ) ; 8 – 9 ชิ้นของผลไม้แต่ละ
ที่ได้รับกรดโมเลกุลเกาะติดของโฮสต์ในแต่ละชิ้นถูกประเมิน การทดลองนี้
กระทำโดยทำสำเนาสามฉบับ .
การแปล กรุณารอสักครู่..