sulphhydryl group content of myosin was determined by the
method of Duan et al. (2013) Reagent grade chemicals were used
to prepare the followings: Tris–glycine buffer (10.4 g Tris, 6.9 g glycine
and 1.2 g EDTA per litre, pH 8.0, denoted as Tris–Gly), Ellman’s
reagent (5,50
-dithiobis-2-nitrobenzoic acid, Sigma–Aldrich, SaintLouis, MO, USA) in Tris–Gly (4 mg/mL), and 8 M urea in Tris–Gly.
The reaction system included 100 lL of protein solutions
(0.25 mg/mL), 500 lL of 8 M urea in Tris–Gly, and 4 lL of Ellman’s
reagent. Absorbance was measured at 412 nm on Multiskan GO
Microplate Spectrophotometer (Thermo Scientific, Massachusetts,
USA). The SH content (in per gram myosin protein) was calculated
according to the following equation:
SH contentðlM=gmyosinÞ ¼ 73:53 A412 D=C
where A412 was the absorbance at 412 nm; C was sample concentration
in mg solids/mL; and D was dilution factor, 6.04.
sulphhydryl กลุ่มเนื้อหาของไมโอซินถูกกำหนดโดยการใช้วิธีของ al. et ด้วนสารเคมีเกรดรีเอเจนต์ (2013)การเตรียมตัวต่อไปนี้: บัฟเฟอร์ตรี – glycine (10.4 g ตรี glycine 6.9 gและ 1.2 g EDTA ต่อลิตร ค่า pH 8.0 ตามทริสเรทติ้ง – Gly), ของ Ellmanรีเอเจนต์ (5,50-dithiobis - 2-nitrobenzoic กรด ซิก-Aldrich, SaintLouis, MO สหรัฐอเมริกา) ในยูเรียตรี – Gly (4 mg/mL), และ 8 เมตรในตรี – Glyระบบปฏิกิริยารวม 100 จะโซลูชั่นของโปรตีน(0.25 mg/mL), 500 จะของ urea 8 M ในตรี – Gly และ 4 จะเป็น Ellmanรีเอเจนต์ มีวัด absorbance ที่ 412 nm ใน Multiskan ไปMicroplate (เทอร์โมวิทยาศาสตร์ รัฐแมสซาชูเซตส์ เครื่องทดสอบกรดด่างสหรัฐอเมริกา) เนื้อหาดี (ในต่อกรัมโปรตีนไมโอซิน) มีคำนวณตามสมการต่อไปนี้:SH contentðlM 73:53 gmyosinÞ ¼ A412 D = C =ที่ A412 ถูก absorbance ที่ 412 nm C คือ ความเข้มข้นของตัวอย่างในของแข็ง mg/mL และ D เป็นตัวเจือจาง 6.04
การแปล กรุณารอสักครู่..
เนื้อหากลุ่ม sulphhydryl ของ myosin ถูกกำหนดโดย
วิธีการของด้วนและคณะ (2013) สารเคมีเกรด Reagent ถูกนำมาใช้
เพื่อเตรียมความพร้อมดังต่อไปนี้: บัฟเฟอร์ Tris-ไกลซีน (10.4 กรัม Tris 6.9 กรัม Glycine
และ 1.2 กรัม EDTA ต่อลิตรค่า pH 8.0 แสดงเป็น Tris-Gly) Ellman ของ
สาร (5,50
-dithiobis -2-nitrobenzoic กรด Sigma-Aldrich, Saintlouis, MO, USA) ใน Tris-Gly (4 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร) และ 8 M ยูเรียใน Tris-Gly.
ระบบปฏิกิริยารวม 100 lL ของโซลูชั่นโปรตีน
(0.25 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร ), 500 lL 8 M ยูเรียใน Tris-Gly และ 4 lL ของ Ellman ของ
น้ำยา การดูดกลืนแสงวัดที่ 412 นาโนเมตรบน Multiskan? GO
ไมโคร Spectrophotometer (เทอร์โมวิทยาศาสตร์, แมสซาชูเซต,
ประเทศสหรัฐอเมริกา) เนื้อหา SH (ในต่อโปรตีน myosin กรัม) ที่คำนวณได้
ตามสมการต่อไปนี้:
SH contentðlM = gmyosinÞ¼ 73:53? A412? D = C
ที่ A412 ก็ดูดกลืนแสงที่ 412 นาโนเมตร; C เข้มข้นเป็นตัวอย่าง
ในของแข็งมิลลิกรัม / มิลลิลิตร; และ D เป็นปัจจัยเจือจาง 6.04
การแปล กรุณารอสักครู่..
sulphhydryl กลุ่มเนื้อหาของ myosin ถูกกำหนดโดย
วิธีด้วน et al . ( 2013 ) เคมีรีเอเจนต์เกรดใช้
เตรียมดังนี้ บริษัทที่มีบัฟเฟอร์ ( 10.4 กรัม ) นอกจากนี้ 6.9 กรัมไกลซีน
และ 1.2 กรัมต่อลิตร ตามลำดับ พีเอช 8.0 , กล่าวคือเป็นบริษัท ( GLY ) เอลเมิ่นเป็นรีเอเจนต์ ( 5,50
-
dithiobis-2-nitrobenzoic –กรด ซิกม่า Aldrich เซ็นหลุยส์ โม , สหรัฐอเมริกา ) ในบริษัทและ GLY ( 4 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร ) และ 8 M ยูเรียในบริษัทและ GLY .
ระบบปฏิกิริยารวม 100 จะได้โปรตีนโซลูชั่น
( 0.25 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร ) , 500 จะ 8 M ยูเรียในบริษัทและ GLY และ 4 จะเ ล์แมนเป็น
3 . การผ่านก๊าซซัลเฟอร์ไดออกไซด์ที่ในพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทย ไป
multiskan Spectrophotometer ( เทอร์โมวิทยาศาสตร์ , Massachusetts ,
สหรัฐอเมริกา ) ส่วน sh เนื้อหา ( ใน 1 กรัม โปรตีนไมโอซิน ) คำนวณได้จากสมการดังนี้
sh เนื้อหาð LM = gmyosin Þ¼ 73:53 a412 D = c
ที่ a412 คือการดูดกลืนแสงที่ 412 นาโนเมตร ; C ตัวอย่างความเข้มข้น
ในมก. ของแข็ง / ml ; D ( , ปัจจัยมาก
การแปล กรุณารอสักครู่..