MATERIALS AND METHODSPlant material

MATERIALS AND METHODS
Plant materials
In September 2008, maturing fruit containing one to four
tea seeds were collected in a tea plantation (cv. Yabukita)
in Shimizu-ku, Shizuoka, Japan. After removing the
pericarp, tea seeds were placed in a vinyl bag and stored
at 4C until use.
Before placing the seeds on agar medium, the testa was
cracked with a hammer and carefully removed together
with the inner seed coat. The tea seeds were then soaked
in 70% ethanol for 30 s and washed three times in water.
All subsequent manipulations were performed under
sterile conditions. The seed surfaces were then sterilized
by immersion in 1% NaClO for 20 min before being
washed three times with sterile water. The sterilized seeds
were then wiped with aseptic filter paper before being
placed in a test tube containing 10mL of 0.8% agar
medium and incubated in the dark at 25C. After two
weeks, the main shoot had attained a length of 1 cm, and
the root tip was removed with a razor blade to induce
lateral roots for the 6-day but not for the 40-hr
hematoxylin-Al treatment. The tea seeds were cultured
at 25C under a photoperiod of 8 h L : 16 hD with a light
intensity of 40Wm2.
Treatments
Secretion of Al-chelating compounds from tea roots
Six-day treatment: Four months after germination, the
tea seedlings grown on agar medium were aseptically
transferred to test tubes containing hematoxylin-Al
medium (0.05mM AlCl3, 0.01mM hematoxylin,
0.002% (w/v) KIO3 in 0.8% agar). The test tubes were
incubated under the conditions described above and
changes in the color of hematoxylin-Al in the medium
were observed for 6 days. As a control, agar samples
without any tea seedlings were similarly placed on test
tubes containing hematoxylin-Al medium.
Forty-hour treatment: Two months after germination,
the aseptic tea seedlings were transplanted into hematoxyline-
Al medium, as for the 6-day treatment. The
change of the color of hematoxylin-Al medium was
observed for 40 h.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วัสดุและวิธีการวัสดุโรงงานกันยายน 2551 ใกล้สมบูรณ์:ผลไม้ประกอบด้วย 1-4มีการรวบรวมเมล็ดชาในไร่ชา (พันธุ์ Yabukita)ในชิมิซุ-ku ชิสึโอกะ ญี่ปุ่น หลังจากเอาออกpericarp ชาไว้ในกระเป๋าไวนิล และเก็บเมล็ดพันธุ์ที่ 4 C จนกว่าจะใช้ก่อนวางเมล็ดบนกลาง agar, testa ถูกแตก ด้วยค้อน และระมัดระวังเอาไว้ด้วยกันมีเสื้อคลุมเมล็ดภายใน เมล็ดชาได้แล้วที่เปี่ยมล้นไปด้วยในเอทานอล 70% 30 s และหินสามครั้งในน้ำManipulations ภาพทั้งหมดที่ต่อมาได้ดำเนินการภายใต้สภาพผ่านการฆ่าเชื้อ ผิวเมล็ดมี sterilized แล้วโดยแช่ใน 1% NaClO ใน 20 นาทีก่อนการล้าง 3 ครั้งใส่น้ำ เมล็ด sterilizedถูกเช็ดแล้ว มีกระดาษกรองที่เข้มข้นการใส่ในหลอดทดสอบประกอบด้วย 10mL ของ agar 0.8%กลาง และ incubated ในมืดที่ 25 c หลังจากสองสัปดาห์ การถ่ายภาพหลักได้บรรลุความยาว 1 ซม. และคำแนะนำรากถูกลบออก ด้วยใบมีดโกนเพื่อก่อให้เกิดรากด้านข้าง สำหรับ 6 วัน แต่ไม่ใช่ สำหรับ ชั่วโมง 40การรักษาอัล hematoxylin เมล็ดชามีอ่างที่ 25 C ภายใต้ช่วงแสงของ 8 h L: 16 hD ด้วยไฟความเข้มของ 40Wm 2รักษาหลั่งสาร chelating อัลจากรากชารักษาวันที่หก: สี่เดือนหลังจากการงอก การมีกล้าไม้ชาปลูกใน agar กลาง asepticallyโอนย้ายไปทดสอบหลอดประกอบด้วย hematoxylin อัลปานกลาง (0.05 มม. AlCl3, 0.01 mM hematoxylin0.002% (w/v) KIO3 agar 0.8%) หลอดทดสอบได้incubated ภายใต้เงื่อนไขที่อธิบายไว้ข้างต้น และเปลี่ยนแปลงสีของอัล hematoxylin ในสื่อสุภัควันที่ 6 เป็นตัวควบคุม ตัวอย่าง agarไม่ มีชาใด กล้าไม้ในทำนองเดียวกันใส่ในการทดสอบหลอดที่ประกอบด้วยอัล hematoxylin ปานกลางรักษา 40 ชั่วโมง: สองเดือนหลังจากการงอกกล้าไม้ชาเข้มข้นถูก transplanted ใน hematoxyline-กลางอัล สำหรับการรักษา 6 วัน ที่มีการเปลี่ยนสีของ hematoxylin อัลกลางสังเกตสำหรับ 40 h

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วัสดุและวิธีการ
วัสดุที่โรงงาน
ในเดือนกันยายน 2008, สุกผลไม้ที่มี 1-4
เมล็ดชาถูกเก็บไว้ในไร่ชา (CV. Yabukita)
ในชิมิซุ ku, Shizuoka, ญี่ปุ่น หลังจากถอด
เปลือกเมล็ดชาถูกวางไว้ในถุงไวนิลและเก็บไว้
ที่? 4? C จนถึงการใช้งาน.
ก่อนที่จะวางเมล็ดบนอาหารวุ้น, Testa ถูก
แตกด้วยค้อนและลบออกอย่างระมัดระวังด้วยกัน
ที่มีเยื่อหุ้มเมล็ดด้านใน เมล็ดชาที่ได้รับแล้วนำไปแช่
ในเอทานอล 70% สำหรับ 30 วินาทีและล้างสามครั้งในน้ำ.
ทั้งหมดกิจวัตรต่อมาได้รับการดำเนินการภายใต้
สภาพปลอดเชื้อ พื้นผิวของเมล็ดพันธุ์ที่ได้รับการฆ่าเชื้อแล้ว
โดยการแช่ใน 1% NaClO 20 นาทีก่อนที่จะถูก
ล้างสามครั้งด้วยน้ำหมัน เมล็ดฆ่าเชื้อ
ถูกเช็ดแล้วด้วยกระดาษกรองปลอดเชื้อก่อนที่จะถูก
วางไว้ในหลอดทดลองที่มี 10ml ของวุ้น 0.8%
ขนาดกลางและบ่มในที่มืดที่อุณหภูมิ 25 องศาเซลเซียส หลังจากสอง
สัปดาห์ที่ผ่านมายิงหลักได้บรรลุความยาว 1 ซม. และ
ปลายรากจะถูกลบออกด้วยใบมีดโกนเพื่อก่อให้เกิด
รากด้านข้างสำหรับ 6 วัน แต่ไม่ได้สำหรับ 40 ชั่วโมง
hematoxylin อัรักษา เมล็ดชาถูกเลี้ยง
ที่ 25 C ภายใต้แสงจาก 8 ชั่วโมง L: 16 HD ที่มีแสง
? ความเข้มของ 40Wm 2.
การรักษา
ความลับของสารประกอบอัลคีเลตจากรากชา
รักษาหกวัน: สี่เดือนหลังจากที่การงอกของเมล็ด
ชา ต้นกล้าที่ปลูกในกลางวุ้นถูกเลี้ยงในขวดทดลอง
ถ่ายโอนไปยังหลอดทดลองที่มี hematoxylin อั
กลาง (0.05mm AlCl3, 0.01mm hematoxylin,
0.002% (w / v) KIO3 ในอาหารเลี้ยงเชื้อ 0.8%) หลอดทดลองได้รับการ
บ่มภายใต้เงื่อนไขที่ระบุไว้ข้างต้นและ
การเปลี่ยนแปลงในสีของ hematoxylin-อัลในกลาง
ถูกตั้งข้อสังเกตเป็นเวลา 6 วัน เป็นตัวควบคุม, วุ้นตัวอย่าง
โดยไม่มีต้นกล้าชาใด ๆ ที่ถูกวางไว้ในทำนองเดียวกันในการทดสอบ
หลอดที่มีขนาดกลาง hematoxylin อัล.
รักษาสี่สิบชั่วโมง: สองเดือนหลังจากงอก
ต้นกล้าชาปลอดเชื้อได้รับการปลูกถ่ายลงใน hematoxyline-
กลางอัลเป็นสำหรับ 6 วัน การรักษา
การเปลี่ยนแปลงสีของกลาง hematoxylin อัลถูก
ตั้งข้อสังเกตสำหรับ 40 ชั่วโมง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วัสดุและวิธีการ

วัสดุปลูกในเดือนกันยายน 2008 , ผลไม้สุกที่มีหนึ่งถึงสี่
ชาเมล็ดเก็บในไร่ชาพันธุ์ yabukita )
ใน คู ชิซูโอกะ , ญี่ปุ่น หลังจากลบ
เปลือก , เมล็ดชาอยู่ในถุงไวนิลและเก็บไว้
ที่  4  C จนกระทั่งใช้ .
ก่อนวางเมล็ดบนอาหารวุ้น , เทสลา คือ
แตกด้วยค้อนและลบออกอย่างระมัดระวังกัน
กับเยื่อหุ้มเมล็ดชั้นใน ชาเมล็ดแช่แล้ว
ในเอทานอล 70% สำหรับ 30 วินาที และล้างในน้ำสามครั้ง .
manipulations ต่อมามีการปฏิบัติภายใต้
สภาพปลอดเชื้อ เมล็ดพันธุ์พื้นผิวแล้วฆ่าเชื้อ
โดยการแช่ใน 1% naclo นาน 20 นาที ก่อนที่จะถูกล้างด้วยน้ำหมัน
3 ครั้ง . โดยเมล็ดพันธุ์
แล้วเช็ดด้วยกระดาษ กรองก่อน
.อยู่ในหลอดทดลองที่มีที่มาจาก 0.8% วุ้น
ขนาดกลาง และบ่มในที่มืดที่อุณหภูมิ 25 C .
 หลังจากสองสัปดาห์ ยิงหลักได้บรรลุความยาว 1 ซม. และ
ปลายรากฟันถูกลบออกด้วยใบมีดโกนที่ชักนำรากด้านข้างสำหรับ 6 วัน

แต่ไม่ใช่สำหรับ 40 ชม. ย้อมล รักษา ชาเมล็ดเพาะเลี้ยง
ที่ 25  C ภายใต้แสง 8 H L : 16 HD ที่มีความเข้มแสงของ 40wm 

2การหลั่งของสารประกอบอัลคีเล

จากรากชาหกวันสี่เดือนหลังจากการรักษา : การงอก , ต้นกล้าที่ปลูกบนอาหารวุ้น
ชาเป็น aseptically
ย้ายหลอดทดลองที่มีย้อมอัล
ขนาดกลาง ( สุด / > alcl3 0.01mm ย้อม
, , 0.002 % ( w / v ) kio3 ใน 0.8% วุ้น ) หลอดทดสอบ
บ่มภายใต้เงื่อนไขที่อธิบายข้างต้นและ
การเปลี่ยนแปลงในสีย้อมอัลในกลาง
จำนวน 6 วัน เป็นชุดควบคุมต่างๆตัวอย่าง
ไม่มีชาต้นกล้าเป็นเหมือนกับอยู่ในหลอดทดสอบ
ที่มีย้อมลปานกลาง
รักษาชั่วโมงสี่สิบสองเดือนหลังจากการงอกของเมล็ด ต้นกล้ามีการปลอดเชื้อชา
-
เป็น hematoxyline อัล ขนาดกลาง สำหรับการรักษา 6 วัน .
เปลี่ยนสีย้อมอัล )
) 40 ชั่วโมง